Штамм гриба @ @ @ . @ . @ .55-продуцент таннин-ацилгидролазы Советский патент 1983 года по МПК C12N15/00 C12N9/14 

О

:л :л vj

sl

о Изобретение - штамм гриба A.bohe mica 55, - образующего фермент таннин-ацилгидролазу, относитс-я к микр биологии. Известна способность микрооргани МОЕ Streptomyces, Fusarium, Aspergi 6us, PeniciEBium образовывать та нин-ацилгидролазу. В промышленности за рубежом в качестве основных продуцентов таннин-ацилгидролазы исполь зуются плесневые грибы рода Aspergi f«us ij и 2 . Однако грибы этого рода,имеют существенные недостатки: споры и мицелий аспергиллов, попав в лёгкие или с пищей в желудочно-кишечный тракт человека и животных, могут выделять токсические продукты метаболизма. Грибы рода Aspergi-Seus оказывают- как местное, т4к и общее токсическое дей ствие: токсическую аллергическую реакцию, катаральные, язвенные, некротические процессы, поражают централь ную нервную и сердечно-сосудистую системы, легочный аппарат., любые органы iT ткани.Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является гриб AspergiBEiUs АТСС № 9362. Этот гриб в Англии используется в качестве основного коммер ческого продуцента таннйн-ацилгидролазы. Куль уральные признаки этого продуцента Неизвестны, но показано что гриб обладает активностью 14 ед/мг З . Известно, что грибы рода Asper;giERus вызывают ряд п|)офессионадьннк заболеваний. Аспергиллез легких наблюдается как профессиона льное заболевание у-работников заводов п6 производству спиртов, органических кислот, ферментов, соприкасающихся со спорами аспергиллов, применяемых в качестве продуцентов, у лиц, имеющих контакт с заплесневелым зерном, мукой, сеном, фруктами. Отсюда законное требование необходимости тщап тельного отбора штаммов-продуцентов для ферментной и пищевой промышленности. Предлагаемый штамм Ascochyta Ьоhemica 55 обладает хорошим ростом и образует конидии, погруженные в . пикнидисшьную слизь, благодаря чему сЗТабо переносится аэрогенным путем. .Гриб не вызывает заболеваний человека и животных. Цель изобретения - выявление штамма гриба А. bohemica 55, используемого в Кс1честве продуцента таннин-ацилгидЕ)олазы, не вызывающего профессиональных заболеваний. Гриб А. bohemica 55 выделен из листьев Campanula sp. Таксономическое положение культуры: отдел Fungi, класс CoefEoniycetes, порядок SphaeropsidaEes, род Ascochyta .(Мельник В.А. Определитель грибов рода Ascochyta Lib; Наука, 1977). Гриб продуцирует фермент таннин-ацилгидролазу. Полученный изолят имеет следующие морфологические и физиологические характеристики. Морфологические призна- к и.i Штамм на 7 сутки роста на суслоагаре образует колонию 48 мм в диаметре и развивает воздушный мицелий беловатого или белесоватого цвета (д-3) , образует мицелиальные тяжи, состоящие из пигментированных гиф, ширина тяжей от 20-30 мкм. Растущий край колонии белого цвета (д-3). Пикниды 100-140 мкм в диаметре, конидии цилиндрические ,5-3 мкм. Физиологические признаки. Отношение к углеводам: усваивает сахарозу, глюкозу, таннйн, плохо крахмал, целлюлозу. Отношение к источнику азота: усваивает NaNO ,. , аргинин, гистидин, валйн, тирозин, триптофан. Плохо цистин. Кардинальные температуры для роста, штамма: максимальная , оптимальная 24-25с, минимальная . При культивировании гриба А. bo- hemica 55 при в течение 5 сут на. среде, содержащей, г/л: таннйн 2; (NH,)S04 30, MgSO 0,5 ZriSO4 0,1, штамм образует фермент таннин-ацилгидролазу, активность которой 15 i + 1,1 ед/г. Определение таннин-ацилгидролазной активности в культуральной жидкости гриба А. bohemica 55 дано в таблице. Активность фермента выражеfia в относительных единицахf в мг рбразовавиейся галловой кислоты на i.r веса сырого мицелия .за 1ч..

Продолжение таблицы

Штамм гриба Ascochyta bohemica Kab.et.Bub.55 (коллекция института биохимии и физиологии микрооргаииэ|мов АН СССР, коллекционный номер Р 2447Д) - продуцент таннин-ацилгид-, ролазы.

Среднее опыта 15,2, полуширина ин терв&па - 1,1, выборочное стандартное отклонение S) - 0,42, число проб - 6, С вероятностью 95%, ферментативная активность 15 ± 1,1 ед/г Предлагаемое изобретение может ть использовано в биохимических ш:следовани 1х, в промышленности для очистки ферментов, в пищевой прО1«шленности для обработки плодов растений с целью увеличения выхода соков и улучшения их вкусошвс качеств, для осветления холодного чая. . Предлагаемой в качестве продуцента таннин-ацилгидролазы штамм А. Ьо- nemlca 55 не является возбудителем бвлезнёй человека к животных. Гриб при культивировании на среде, содер жашей. ,обладает хорошим ростом и образует фермент - таннин-ацилгйдролазу, активность которого 15 ± ±1,1 ед/г. Нёсмот1)я на большую практическую значимость продуцента таннин-ацилгидролазы, отечественной промышленностью он не производится. Техникоэкономический эффект от внедрения изобретения складшвается из отсутствия для человека и животных патогенных свойств у продуцента и дрстато но высокого выхода фермента. Гриб А. bonanlca 55 кгис продуцент фермента таннин-ацилгидролазы предлагается впервые-.. .