СОЛИ N-БЕНЗИЛИДЕНМОНОГИДРАЗИДА МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИАРИТМИЧЕСКУЮ, АНТИАГРЕГАНТНУЮ И АНТИТРОМБИНОВУЮ АКТИВНОСТЬ Советский патент 1994 года по МПК C07C243/30 A61K31/16 

Изобретение относится к синтезу биологически активных химических соединений, конкретно к синтезу солей N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты общей формулы I
CH= NNHCOCH= CHCOOR, где R-NH₄, Li, Na, K, 1/2 Mg, проявляющих антиаритмическую, антиагрегантную и антитромбиновую активность.

Указанные свойства позволяют предполагать возможность применения их в медицине.

Ближайшим аналогом предлагаемых соединений по структуре является N-бензилиденмоногидразид малеиновой кислоты формулы
CH= NNHCOCH=CHCOOH, полученный при взаимодействии малеинового ангидрида с гидразингидратом при охлаждении в среде абсолютного спирта с последующей обработкой сухого остатка избытком бензальдегида в водной среде.

Биологическая активность данного соединения не известна.

В качестве эталона сравнения антиаритмической активности испытан известный антиаритмический препарат новокаинамид, а эталона антиагрегантной и антитромбиновой активности - папаверин, который обладает высокой антиагрегантной и антитромбиновой активностью.

Цель изобретения - изыскание соединений, обладающих улучшенными антиаритмическими свойствами, меньшей токсичностью, проявляющих также антиагрегантные и антитромбиновые свойства и расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм. Указанные свойства определяются химической структурой солей N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты, которая выражается общей формулой I.

Соли N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты (I) получают при взаимодействии N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты с эквимолярным количеством соответствующего основания в спирте при температуре 70-75^оС по схеме
CH= NNHCOCH= CHCOOH + ROH OR, где R-NH₄, Li, Na, K, 1/2 Mg.

Соединения I представляют собой кристаллические вещества, растворимые в воде, трудно растворимые в спирте, хлороформе. Строение соединений I подтверждено ИК- и ПМР-спектрами.

П р и м е р 1. Аммонийная соль N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты.

К раствору 6,54 г (0,03 моль) N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты в 300 мл этилового спирта при температуре 70-75^оС добавляют при перемешивании 15 мл (избыток) 25%-ного раствора аммиака. Полученную реакционную массу охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 1 ч, затем спирт испаряют и остаток перекристаллизовывают из воды. Получают 6,8 г (95,7%) кристаллического продукта с Т.пл. = 186-188^оС (с разложением).

Вычислено,%: N 17,86; C 56,16; Н 5,57.

Найдено,%: N 18,02; С 56,32; Н 5,61.

C₁₁H₁₃N₃O₃
П р и м е р 2. Натриевая соль N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты.

К раствору 6,54 г (0,03 моль) N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты в 300 мл этилового спирта при температуре 70-75^оС добавляют при перемешивании раствор 1,2 г (0,03 моль) едкого натра в 20 мл воды. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 1 ч, затем спирт испаряют и остаток перекристаллизовывают из воды. Получают 7,0 г (97,2%) кристаллического продукта с Т._пл. = 282-284^оС (с разложением).

Вычислено,%: N 11,66; С 55,01; Н 3,78.

Найдено,%: N 11,54; С 55,20; Н 3,69.

C₁₁H₉N₂O₃Na
П р и м е р 3. Магниевая соль N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты.

К раствору 6,54 г (0,03 моль) N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты в 300 мл этилового спирта при температуре 70-75^оС добавляют 0,875 г (0,015 моль) гидроокиси магния и перемешивают до полного растворения. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 1 ч, затем спирт испаряют и остаток перекристаллизовывают из воды. Получают 6,6 г (95,6%) кристаллического продукта с Т._пл. = 113-115^оС (с разложением).

Вычислено,%: N 12,21; С 57,61; Н 3,96.

Найдено,%: N 12,09; С 57,85; Н 3,72.

C₂₂H₁₈N₄O₆Mg
П р и м е р 4. Калиевая соль N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты.

К раствору 6,54 г (0,03 моль) N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты в 300 мл этилового спирта при температуре 70-75^оС добавляют при перемешивании раствор 1,68 г (0,03 моль) едкого кали в 20 мл воды. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 1 ч, затем спирт испаряют и остаток перекристаллизовывают из воды. Получают 7,4 г (96,2%) кристаллического продукта с т.пл. 276-278^оС (с разложением).

Вычислено,%: N 10,93; С 52,55; Н 3,54.

Найдено,%: N 10,97; С 51,32; Н 3,61.

C₁₁H₉N₂O₃K.

П р и м е р 5. Литиевая соль N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты.

К раствору 6,54 г (0,03 моль) N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты в 300 мл этилового спирта при температуре 70-75^оС добавляют при перемешивании раствор 1,26 г (0,03 моль) моногидрата гидроокиси лития в 20 мл воды. Полученную реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 1 ч, спирт испаряют, остаток перекристаллизовывают из воды. Получают 6,5 г (96,7%) кристаллического продукта с Т_.пл. = 136-138^оС (с разложением).

Вычислено,%: N 12,50; С 58,95; Н 4,05.

Найдено,%: N 12,39; С 58,72; Н 4,12.

C₁₁H₉N₂O₃Li.

У предлагаемых соединений испытывали:
антиаритмическую активность на белых мышах на модели хлоридкальциевой аритмии;
антиагрегантную активность тромбоцитов. Агрегацию тромбоцитов крови собак, вызванную АДФ (0,05 мг/мл), исследовали фотометрическим методом Борна и оценивали в процентах падения оптической плотности;
антитромбиновую активность, оценивали по результатам исследования влияния предлагаемых соединений на величину тромбинового времени плазмы собак, определяемого по Э.Сирмаи и смертность белых мышей от внутривенного введения им тромбина в дозе 1250 УД/кг;
острую токсичность на белых мышах при внутривенном введении.

Исследование антиаритмической активности предлагаемых соединений показывает (см. табл. 1), что все они проявляют выраженную антиаритмическую активность, причем аммониевая и натриевая соли уступают новокаинамиду по активности, их ЕД₅₀ составляет соответственно, 86 и 140 мг/кг, а у новокаинамида она равна 52 мг/кг. Литиевая, калиевая и магниевая соли значительно превосходят новокаинамид по активности, их ЕД₅₀ соответственно равны 28,5, 37,0 и 20 мг/кг. Все испытанные соединения в значительной степени превосходят новокаинамид по антиаритмическому индексу, отражающему относительную широту фармакологического действия, особенно значителен он у литиевой соли и составляет 70,5, то есть больше, чем антиаритмический индекс новокаинамида в 33,6 раза.

Исследование антиагрегантной активности показывает (см. табл.2), что все предлагаемые соединения достоверно угнетают агрегацию тромбоцитов плазмы собак, но уступают по активности эталону сравнения - параверину.

При исследовании влияния предлагаемых соединений на величину тромбинового времени установлено (см. табл.3), что все соединения тромбиновое время достаточно удлиняют, особенно высока эта активность у кадмиевой соли; удлинение составляет 16,7 с или 76,6%, у папаверина - 5,2 с или 28,5%.

Проведение тромбиновой пробы дает следующие результаты: все предлагаемые соединения статистически достоверно снижают смертность мышей от внутривенного введения им тромбина. Наиболее активными в этом отношении являются аммониевая и калиевая соли, которые уменьшают смертность на 60%. Такую же активность проявляет и папаверин, но в слабой степени (см. табл.4).

Результаты исследований острой токсичности предлагаемых соединений представлены в табл. 1-4. Из них видно, что токсичность всех предлагаемых соединений значительно меньше эталонов сравнения - новокаинамида и папаверина. Наиболее низкая токсичность у натриевой соли: она меньше, чем у новокаинамида и папаверина соответственно в 21,8 и 88,9 раза.

Таким образом, новые соединения проявляют выраженную антиаритмическую активность и значительно превосходят известный антиаритмический препарат новокаинамид по активности и по относительной широте фармакологического действия. Кроме того, все эти соединения угнетают агрегацию тромбоцитов, все удлиняют тромбиновое время и уменьшают смертность мышей при введении им тромбина, то есть проявляют антитромбиновую активность. Токсичность всех новых соединений значительно меньше токсичности эталонов сравнения.

Следовательно, соединения формулы I могут найти применение в качестве лекарственных средств для профилактики и лечения аритмий и предупреждения образования тромбов, которые нередко бывают главной причиной развития аритмий.

Соли N-бензилиденмоногидразида малеиновой кислоты общей формулы
_,
где R - NH₄, Li, Na, K, 1/2 Mg,
проявляющие антиаритмическую, антиагрегантную и антитромбиновую активность.