Способ Дзержинской И.И.дифференциальной диагностики острых и хронических воспалительных процессов Советский патент 1983 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической биохимии для диагностики ост рых и хронических воспалительных урологических заболеваний. Известен способ дифференциальной диагностики острых и хронических воспалительных заболеваний путем цитологического исследования костного мозга l . Однако известный способ недостаточ но специфичен и точен для дифференциальной диагностики урологических заболеваний, поскольку проводят общее цитологическое исследование клеток гранулоцитарного ряда, подсчет их по морфологическим признакам. Известный способ не позволяет с достаточной достоверностью и точностью определить переход острой фо мы заболевания в хроническую. Целью изобретения является повышение точности способа при диагностике урологических заболеваний. Поставленная цель - достигается тем, что согласно способу дифференциальной диагностики и хронических воспалительных процессов путем цитологического исследования костного мозга пунктат костного мозга разделяют в градиенте фикол-уротра та, выделяют, фракцию с плотностью 1,060-1,065 г/л, центрифугируют 20-40 мин со скоростью 1000-1500 об/мин, далее инкубируют с 2,5%-ным раствором эритроцитов барана ОБ), микроскопически определя ют число спонтанных розеткообразующих клеток и по снижению этого числ в5-7 раз относительно нормы диагно цируют хронический воспалительн.ый процесс, а при увеличении этого числа в 5-9 раз относительно нормы диагносцируют острый воспалительный процесс. Способ осуществляют следующим образом. У пациента берут пунктат костног мозга. Полученную костно-мозговую жидкость наносят на градиент фикол-уро раста с плотностью 1,090-1,095 г/л, .далее производят отстаивание в течение 30-60 мин, при этом в осадо 9адятся эритроидные элементы, надо1садочную взвесь с нейтрофильными элементами переносят на четырехступенчатый градиент фикол-уротраста 1,060-1,065; 1,070-1,075; 1,0801,085; 1,090-1,095 г/л, центрифугируют 20-40 мин при 0°С со скоростью 1000-1500 об/мин. Получают четыре взвеси клеток: промиелоциты образуют кольцо между раствором 1,060-1,065 г/л и костно.мозговой жидкостью, миелоциты - меж |ду растворами 1,070-1,075 и 1,060F/D65 г/л, юные и палочкоядерные нефтрофилы - между растворами 1,0801,085 и 1,060-1,075 г/л, нейтрофилы сегментоядерные - между растворами с плотностью 1,090-1,095 и 1,0801,085 г/л. Соединяют взвесь клеток с плотностью градиента 1,060-1,065 г/л с2,5%-ным раствором эритроцитов барана и инкубацию производят при 0-4°С в течение 10-20 мин, далее осаждаю.т центрифугированием при 0-4°С. Пример 1. Пациент А. Берут пробу костного мозга. В силиконизированную пробирку на 3 мл смеси фикол-уротраста плотностью 1,093 г/л наслаивают 3 мл костно-мозговой жидкости, остаивают 4 мин на льду. Полученную взвесь с нейтрофильными элементами переносят на градиент с плотностью 1,063 г/л, центрифугируют 15 мин при 4с и 1000 об/мин. Взвесь клеток соединяют с 0,1 мл 2,5%-ного раствора ЭБ. Инкубацию осуществляют при 4°С в течение 15 мин, осаждают роэеткообразующие клетки центрифугированием 4°С. Фиксируют 3%-ным раствором глутарового альдегида, центрифугируют, осадок наносят на предметное стекло, сушат, фиксируют метанолом 4 мин, красят азур-эозином 3 мин, считают в 6-7 разных полях зрения в иммерсионной системе микроскопа 300 клеток, присоединивших не менее 3 ЭБ. Абсолютное содержание розеткообразующих клеток рассчитывают по формуле где L - количество костно-мозговых клеток гранулоцитарного ряда; - % промиелоцитов, миелоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных нейрофилов в формуле костного мозга; Р- процент розеткообразующих. клеток; 100 - показатели, приводящие результаты к объему 1 мкл, Пример расчета. В иммерсионной системе микроскопа в 7 разных полях получено 88,0% розеткообразующих промиелоцитов. Содержание клеточного состава костного мозга в 1 мкл 14300, процен ное содержание нейтрофильных элементов костного мозга: промиелоцитовы 0,5%. Поставив в формулу цифровые, значения, получают 14300-88,0«0,5 - 62,9 в 1 мкл. 100 100

Способ дифференциальной диагностики острых- и хронических воспалительных процессов путем цитологического исследования костного мозга,отличающий с я тем, что, с целью повьшения точности способа при диагностике урологических заболеваний, пунктат костного мозга разделяют в градиенте фикол-уротраста, вь деляют фракцию с плотностью 1,060-1,065 г/л, центрифут гируют 20-40 мин со скоростью 10001500 обУмин, далее инкубируют с 2,5%-ньм раствором эритроцитов барана, микроскопически определяют число спонтанных розеткробразукщих клеток и по снижению этого числа в 5-7 раз относительно нормы диагносцируют хронический воспалительный процесс;, а при увеличении этого числа в 5-9 раз относительно нормы диагнбсцируют острый воспалительный процесс.