Способ диагностики продуктивной формы остеомиелита челюстей у детей Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

.-

11

Изобретение относится к медицине, в частности к детской хирургической стоматологии, и может .быть использовано в онкологии для диагностики опухолей костной ткани.

Целью изобретения является повьше- ние точности диагностики.

Способ осуществляется следующим образом.

У обследуемых лиц забирают по 0,5 мл крови в пробирки с гепарином и по 0,2 мл помещают в пробирки, содержащие 2 мл среды 199, антибиотики и 20% бычьей сыворотки. В опытные пробирки вносят по 5 мкг/мл ФГА фир- мы Дифко в 0,1 мл физиологического раствора, в контрольные пробирки - 0,1 мл физиологического раствора. Пробы инкубируют 72 ч при 37°С в атмосфере, содержащей 5% СО . После ин- кубации эритроциты лизируют 10%-ной уксусной кислотой, пробы центрифугируют, окрашивают.и осадок переносят на. предметное стекло. Высушивают, окрашивают азур-эозином и считают ко личество бластных форм лимфоцитов на 200-300 клеток. Для подсчета Т-лимфо цитов, последних получают при центрифугировании цельной гепаринизирован- ной крови, разведенной средой 199 в соотношении 1:1 на градиенте фиколл- уротрасте (плотность 1,077 г/мл). Готовят 0,5%-ную взвесь эритроцитов барана на среде 199. Смешивают равны объемы 0,5%-ной суспензии эритроци- тов баран и лимфоцитов в концентрации 1x10 клеток, инкубируют 10 мин при 37 С, затем 1 ч при 40°С и центрифугируют 50 мин при 5000 об/мин. Полученные Е-РОК переносят на пред- метное стекло, высушивают, фиксируют окрашивают азур-эозином и считают под микроскопом при увеличении об.90 ок.10 лимфоциты, образующие розетки на 200 клеток. Розеткой считается лимфоцит, к которому прикреплено не менее 3 эритроцитов. При наличии содержания бластных форм лимфоцитов 35 45% и Т-лимфоцитов 41 - 45% диагноструют продуктивную форму остеомиелита

Пример 1. Больной С., 5 лет. Для осуществления способа диагностик делалось следующее. Кровь из локтево вены в количестве 0,5 мл забирают в пробирки с гепарином и 20% бычьей сыворотки. В опытные пробирки вносит по 5 мкг/мл ФГА фирмы Дифко в О,1 м физиологического раствора. Пробы ин-25

3221

5

35 40 , 45 - и, 50

и й re л 502

кубируют 72 ч при 37 С в атмосфере содержащей 5% СО. После инкубации эритроциты лизируют 10%-ной уксусной кислотой, пробы центрифугируют и осадок переносят на предметное стекло. Высушивают, фиксируют, окрашивают азур-эозином и считают количество бластных форм лимфоцитов на 200- ЗОО клеток.

Процентное содержание бластных лимфоцитов 35%.

Т-лимфоциты вьщеляют из гепаринизи- рованной крови на градиенте фикола и уротраста. Готовят 0,5%-ную взвесь эритроцитов барана на среде 199. Смешивают равные объемы 0,5%-ной суспензии эритроцитов барана и лимфоцитов в концентрации 1x10 клеток, инкубируют ТО мин при 37 С, затем 1 ч при 4 С и центрифугируют 50 мин при 5000 об/мин. Полученные Е-РОК переносят на предметное стекло, высушивают, фиксируют, окрашивают азур-эозином и считают под микроскопом при увеличении об. 90 ок. 10 лимфоциты, образующие розетки на 200 клеток.

Процентное содержание .Т-лимфоцитов 45%.

Диагноз: продуктивная форма остеомиелита, тела нижней челюсти.

П р и.м е р 2. Больная 6 лет. Процентное содержание бластных форм лимфоцитов и Т-лимфоцитов определили по предлагаемому способу, указанному в примере 1.

Содержание бластных форм лимфоцитов 45%.

Количество Т-лимфоцитов 43%.

Диагноз: продуктивная форма остеомиелита ветви нижней челюсти.

Пример 3, Больная 0., 5 лет. Содержание бластных форм лимфоцитов и Т-лимфоцитов выявили по указанному способу.

Содержание бла1.стных форм лимфоцитов 39%.

Содержание Т-лимфоцитов 41%.

Диагноз: продуктивный остеомиелит тела нижней челюсти.

По предлагаемому способу обследовано 18 больных и установлено, что при содержании бластиьгх форм лимфоцитов от 35% до. 45% и Т-лимфоцитов от 41 до 45% у 10 больных диагностирована поодуктивная форма остеомиелита. А у

3 13221504

8 больных при нормапьном содержанииФормула изобретения бластов и Т-лимфоцитов диагностирова- Способ .диагностики продуктивной

на фиброзная остеодисгшазия.формы, остеомиелита челюстей у детей.

Таким образом, подтверждается вы-путем исследования крови больных, сокая дифференциальная способность 5отличающийся тем, что, с способа, что значительно снижает про-целью повышения точности диагностики, цент диагностических ошибок и пред--в исследуемой крови определяют проставляет возможность правильно назна-центное содержание Т-лимфоцитов и их чить лечение и предотвратить дальней-бласттрансформирующую способность шее прогрессирование заболевания, а Ои при наличии их содержания от 41 до значит сократить сроки лечения реаби-45% и бласттрансформирующих клеток литации больных и улучшить прогнозот 35 до 45% диагностируют продуктив- за счет правильно выбранного лечения.ную форму остеомиелита.

Составитель В.Фролова Редактор С.Патрушева Техред А.Кравчук Корректор л.Бескид

Заказ 2856/39 Тираж 776Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская ;наб,, д. 4/5

. Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

Изобретение относится к детской хирургии. Цель изобретения - повышение точности диагностики. Кровь.с бычьей сывороткой инкубируют. Эритроциты лизируют, пробы центрифугируют. Осадок на предметном стекле высушивают, фиксируют, окрашивают и считают количество бластных форм лимфоцитов. Из крови вьщеляют Т-лимфоциты. Смешивают суспензию эритроцитов барана и лимфоциты, инкубируют и центрифугируют. Определяют количество лимфоцитов, образующих розетки. Способ позволяет сократить сроки лечения и улучшить прогноз заболевания.