Способ диагностики острого сепсиса Советский патент 1983 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использова для диагностики острого сепсиса. Известен микробиологический диагностики;сепсиса. Метод заклю чается в посеве крови напитательные .среды, вьвделении чистой культуры воз буди т ел ни его идентификации. Определение вида и типа возбудителя производят по ряду признаков: морфологии способности окрашиваться различ ными красителями (тинкториальные сво ства) S характеру роста на. Искусственных питательных средах (культурал ные свойства), ферментации углеводов и белков (биохиклческие свойства). Окончательно-, принадлежность выделенной культу ры к определенному виду (типу) микроорганизмов устанавливают после изучения антигенной структуры, используя различные им унологичес кие реакции (агглютинации, преципитации, нейтрализации и др;), В первый день кровь засевают на чаь.ки с агаром Посевы выдерживают в термостате при 37°С 18-20 ч.На второй день просматривают колонии, делают мазки, микроекопируют колонии окруженные зоной гемолиза, отсев&ют в пробирку с бульоном, ria третий день учитывают характерный рост и . проводят определение серологической группы, изучают, определяя признаки патогенностио В зависимости от всех этих качеств культивирование продолжается 5-7 дней l . Известен-также способ диагностики сепсиса путем клинического аналиЬа крови. В ма3.ках крови наблюдают {лейкоцитоз с нейтрофилезом, ядерный сдвиг влево за счет миелобластов,миешоцитов анемию ипохромного типа. однако аналогичные изменения бывают при любом тяжело.м воспалительном про цессе и, следовательно, этот способ не можег быть специфическим при данном заболевании 2 . Известные способы характеризуются недостаточной точностью, малой инфор мативностью, длительностью исследова ния, в т BpeTiis как сепсис может воз никнуть практически1при любом бактери альном заболевании, лечебных и диагностических манипуляциях, и летальность составляет. 33 - 71%. Цель изобретения - ускорение диагностики и повышение ее точности. Поставленная цель достигается тем что согласно способу диагностики острого сепсиса путем исследования крови кровь разделяют в градиенте фиколуротраста, выделяют фракцию с плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимфоциты с наличий.1 участко синтеза рибонуклеиновой кислоты (РНК) в ядрышках и при повышении их количества на 10-20% по сравнению с нормой диапюсцируют о стрый сепсис. Способ осуществляют следующим образом. В силиконизированнуюпробирку на 3 мл фикол-уротраста с плотностью 1,065-1,080 г/л .наслаивают 3 мл цельной крови, взятой у пациента, центрифугируют при 4®С и об/мин в течение 2Q мин. Получают чистую популяцию лимфоцитов. Взвесь клеток наносят на предметное стекло, сушат, красит 30 мин., считают 100 лимфоцитов и вычисляют процент лимфоцитов с наличием участков синтеза РНК (активированных) . Содержание активированных лимфоцитов (АЛ) у практически здорового человека 2%„Пример 1. Больной А. поступит в клинику по поводу мочекаменной болезни, сос-тояния после ушивания дефекта правог.о мочеточника. Больному произведена операция удаление камня из правого мочеточника. Через месяц, после операции мочевой затек забрюшинного пространства. На экскреторных урогрэммах функции почек удовлетворительная, пассаж мочи не нарушен, структура чашечно-лоханочной системЕд не изменена. В верхней трети правого мочеточника имеется дефект примерно 3 см. Больному про- из.ведена срочная операция - ревизия забрюшинно: 6 пространства справа вскрытие мочевого затека, нефростомия, ушивание дефекта верхней трети мочеточника, дренирование забрюшинного пространства. . У больного после операции берут кровь. в силиконизированную центрифужную пробирку на 3 мл раствора фикол-уротраста плот-ностью 1,080 г/л насл аивают 3,0 мл крови, центрифугйр уют при ОС и 1000 об/мин в течение . 15 мин, считают в иммерсионной сис.теме микросжопа 100 лимфоцитарных клеток. В исследуемой крови содержание АЛ 3%. Количество АЛ близко к норме сегментоядерных нейтрофилов 3720 в 1 мил (60%), эозинофилов 62 в i мкЛ (1%), лимфоцитов 1736 в 1 мкл (28%), моноцитов 1736 в 1 мкл -(10%) . С первых дней после операции правая почка перестала функционировать ,ч т о подтверждено данными нефросцинтиграфии, У больного на 18 сутки после операции температура поднялась до 38,4°С, озноб. Область почки безболезнена. Рекомендовано провести исследование крови на содержание АЛ„ Проводят наслаивание крови на градиент фикол-уротраста плотностью 1.,075 г/л и центрифугированием при 4°С, 1500 об/мин в течение 10 мин. СодержаниЪ АЛ 11%. Дано заключение - у больного острый сепсис. В тот же день : взята кровь на посев. ria ангиограмме обнаружен тромбоз артерии he по 6(5 справа. Больному произведена срочная нефрэктомия., Через семь дней получены результаты посева . ОДнаружена,кишечная палочка и сапрофиты. Повторный анализ крови показывает, что процент АЛ составляет 11%,лейкоциты 9250 в 1 мкл, .палочк ядерные нейтрофилы 92,5 в 1 мкл (l%) , сегментоядерные нейтрофилы4995 в 1 мкл (54%), лимфо циты 3977,5 в 1 мкл (43%), моноциты 185 в 1 мкл (2%). Температура 38 по веч.ерам. Больному назначен декарис по 150 мг день, общая доза 600 мг. ЧереЭ 4 дня процент АЛ равен 5 Лейкоциты 9100 в 1 мкл, палочкоядерных нейтрофилов 91 в 1 мкл (1%), сегментоядерных нейтрофилов 5551 (53%), зозинофилов 637 в 1 мкл (7%) лимфоцитов 2912 в 1 мкл (32%), моноцитов 637 в 1 мкл (7%). Температура по вечерам 37 - 37,5С В последующем больному были прог ведены еще два курса декариса и уси лена противовоспалительная терапия в течение месяца. Количество АЛ 2%, лейкоцитов 5600 в 1 мкл, палочкоядерных нейтрофилов 22,4 в 1 мкл, сегментоядерных нейтрофилов 2856 в i мкл (51%), зозинофилов 56 в 1 мкл (1%), лимфоцитов 1904 в 1 мкл (3-4%) , моноцитов 560 в 1 мкл (10%) . При посеве крови роста нет. Состояние больного удовлетворительное. Таким, образа 1, несмотря на то, что содержание форменных элементов было в нормр и по клиническим данным нельзя отдифференцировать воспалительный процесс от сепсиса, тем не менее содержание активированных лим фоцитов свидетельствует о наличии острого сепсиса, который развился, вследствие трсмибоза артерии 1-е па , что потребовало .срочной нефрэ-ктомии Данные посева подтвердили наличие микроорганизма в КРОВИ . П р и м е р 2. Больная О. поступила с диагнозом: острый прав.0сто- ронний. пиелонефрит, бактериемйЧ€#ски шок, мочеточниково-влагалищный свищ, правой почки. У больной) берут кровь в силиконизированную пробирку на раствор фикол-уротраста с плотнос тью 1,065 г/л наслаивают 3МЛ крови центрифугируют при и 1000 об/мин в течение 15 мин, взвесь клеток красят 16 мин. Содержание АЛ 4%, лейко цитов 5200 в 1 мкл, палочкоядерных нейтрофилов 52 в 1 мкл(1%),сегментоедерных нейтрофилов 3224 в 1 мкл (62%) , зозинофилов 52 в 1 мкл (1%) , лимфоцитов 1352 в 1 мкл (26%) , моноцитов 520 в 1 мкл (10%) . 4/1V 1981 г произведена операция - пиелостомия справа, релюмботомия, декапсуляция нижнего полюса правой почки. В послеоперационном периоде суб фебрильная температура. В крови лей-. коциты до 9000 в 1 мкл. Боли в области почки, слабость. Через 10 дней состояние больной без положительной динамики. В силиконизированную пробирку на раствор фикол-урохраста с плотностью 1,,070 г/л наслаивают 3 мл крови, центрифугируют при , 1000 об/мин в течение 10 мин, просчитывали 100 лимфоцитов. Количество АЛ 19%, диагностируют острый сепсис. При этом содержание в 1 мкл лейкоцитов 9300, палочкоядерных нейтрофилов 558 (6%) , сегментоядерных нейтрофилов 6510 (70%), зозинофилов 93 (1%) , лимфоцитов 186 (20%) , моноцитов 219 (3%) т При посеве крови роста микроорганизмов нет. Больной j назначена усиленная™ антибактериальная терапкяJ однако положительной динамики нет, наступила civiepTb. Патоморфологический диагноз: причина смерти сепсис, сэптическая интоксикация, менингит. Таким образом, несмотря на то, что посев крови оказался отрицательым, тем не менее процент АЛ свидетельствовал о наличии острого сепсиса, .что было подтверждено при патсморфопогическом исследовании. При гнойно-воспалительных осложнениях процент АЛ не превышал 6%, развитие сепсиса резко увеличивало содержание АЛ о-: 10 до 20%, Посев крови было положительным в 45,7%. Клинический анализ крови не явился информативным, так как гнойно-воспалительные осложнения сопровождались также лейкоцитозе и, следовательно, он не имел диагностической ценкости. Всего обследовано 230 больных. Из них 55 больных - реципиентов трупной аллопочки. У 17 (30,9%) больных с помощью метода АЛ установлен у всех сепсис (100%) . Посев кроЕи оказался положительным у 5 больных (23,5%), которым удален трансплантат и получена положитель:; ая динамика в лечении, 12 умерло. На секции у всех подтверждено, что смерть наступила вследствие сепсиса. У 90 больных с хронической почечной недостаточностью (Xnri) в терминальной стадии сепсис развился у 23 больных (32/с), С помощью изобретения выявлен репсис у 26 больных (90,3%) . Посев крови положительный у 15 больных (58%). 123 бальных было с различными урологическими заболеваниями. Основт нЬе заболевание осложнилось сепсисом у 26 больных (21%) . АЛ положительные у 26 больных (100%) . Посев крови по-

51060172

ложятельный у 14 больных (53,8%) .Способ является информативным и

Летательным исходом закончилось за-точньм, позволяет диагностировать наболевание среди реципиентов трупнойличие сепсиса и т&л самым дает возможаплопочки у 12 больных (70,6%) , срединость своевр1еменно внести коррекцию

больных ХЯП - у 6 больных (21,4%),в лечение, сократить cfJoK лечения и

среди урологических больных - у 2 уменьимть летальность при столь серь

(7,7%) .езном осложнении.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО СЕПСИСА путем иссп€и1ования крови, о тли чающий с я тем, что, с целью ускорения диагностики и повышения |ее точности, кровь разделяют в градиенте фикол-уротраста, выделяют фрак- цию с. плотностью 1,065-1,080 г/л, далее выявляют в ней лимфоци ты с наличием участков синтеза рибонуклеи.новой кислоты в ядрышках и при повьвиении их количества на 10-20% по сравнению с нормой диагносцируют острый сепсис.