Способ получения производных 1,8-нафтиридина или их солей Советский патент 1984 года по МПК C07D471/04 A61K31/4375 A61K31/496 A61P31/04 

Изобретение относится к способа получения новых производных 1,8нафтиридина, обладающих антибактериальными свойствами, которые могу найти применение в медицине. Известен гидролиз производных карбоновых кислот, таких как эфиры нитрилы, ё1миды, амидины, иминоэфир в соответствующую свободную кислоту Ц. Цель изобретения - получение производных 1,8-нафтиоилина, обладакяцих ценными фармакологическими свойствами. Поставленная цель достигается основанным на известной реакции сп собом получения производных 1,8нафтиридина общей формулы ннП IT к где R - этил или винил, или их солей, заключающимся в том, что в соединении общей формулы к.ЭДг где R имеет указанные значения; 2 С -С алкоксикарбонил, кар бокси-, циано-, карбамоиламидиногруппа или группа -C(NH)OAIk, где Alk - С -алкил;RJ - водород или защитная групп гидролизуют группу Rjj, когда она не карбоксил, и/или удаляют защитную группу RJ с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли. предпочтительно проведение гидро лиза с использованием водного растворителя в присутствии кислоты или основания при 30-100°С. Исходные продукты получают по стандартным методикам. Стандартная методика 1. К 10 г полифосфорной кислоты добавляют 2,18 г диэтил-N-C6-(4-ацетил) -1-пиперазинил)-5-фтор-2-пиридил -Н-этиламинометиленмалоната, и полученную смесь нагревают при 110120 С и перемешивании в течение 15 мин. После охлаждения сиропообразный продукт смешивают с ледяной водой, доводят до рН 620%-ным водны раствором гидроокиси натрия и экстр гируют хлороформом. Экстракт после высушивания упаривают досуха. Ocfaток кристаллизуют добавлением этилацетата, nocfie перекристаллизации из этилацетата получают 1,3 г этил-7-{4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата, т.пл. 195197°С. Стандартная методика 2. При нагревании этил-Ы-Сб-(4-ацетил-1-пиперазинил)-5-фтор-2-пиридилЗаминометиленцианоацетата (3,3 г), полученного из 6-(4-ацетил-1-пиперазинил)-5-фтор-2-аминопиридина и этилэтоксиметиленцианоацетата, до 255 С получают 2,3 г 7-(4-ацетил-1г -пиперазинил)-6-фтор-1,4-дигидрО- 4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбонитрила. Полученный нитрил без дальнейшей очистки обрабатывают йодистым этилом и карбонатом калия в диметилформамиде. Реакционную смесь упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток экстрагируют хлороформом, экстракт промывают водой и сушат. Полученное твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанола и xj opoформа. Получают 2,2 г 7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-oKco-l,8-нафтиридин-З-карбонитрила, т.пл. 289-290 с. Стандартная методика 3. Смесь 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты (3,25 г) и фосфорилхлорида (30 мл) кипятят в течение 5 мин. После отгонки избытка фосфорилхлорида к остатку при перемешивании добавляют 30 г ледяной воды и смесь остав ляют при комнатной темпегратуре на ночь. Осадок отделяют фильтрацией, промывают водой и перекристаллизовывают из ацетонитрила. Получают 3,2 г 7-хлор-1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 265-267С. Стандартная методика 4. При реакции 2,6-дихлор-З-нитропиридина с N-этоксикарбонилпиперазинсм получают б-хлор-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-нитропиридин. При нагревании продукта (без предварительной очистки) с раствором аммиака в этиловс спирте в запаянной трубке при 120-125с получают 6-амино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазиния)-3-нитропиридин (т.пл. 132-134 с), обработка, которого уксусным ангидридом в уксусной кислоте приводит к 6-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-нитропиридину (т.пл. 168-169 С)с При каталитическом гидрировании этого соединения в уксусной кислоте в присутствии 5%-ного палладия на угле получают 3-ги«1ино-б-ацетиламино-2- (4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)пиридин. Это 3-аминопроизводное без очистки растворяют в смеси этилового спирта и 42%-ной борфтористоврдородной кислоты, и к этому раствору добавляют при перемешивании раствор изоамилни рита в этиловом спирте при температуре ниже . Через 20 мин к раствору добавляют эфир. Получеиный оса док тетрафторбората б-ацетиламино-2-(4-этоксикар€онил-1-пиперазинил-3-пиридиндиазони,я отфильтровывают и промывсцот виачале смесью метанола и эфира, а затем хлороформом (т.пл. 117-117, с разл.) , Суспензию диа ниевой соли в толуоле медленно нагревают до 120°С (температура бани) и выдерживают при этой температуре при постоянном перемешивании 30 мин После удаления растворителя при пониженном давлении остаток подщелачи вают 10%-ным раствором карбоната натрия, а затем экстрагируют хлороформом . Хлороформенный экстракт высушивают безводным карбонатом натри После упаривания растворителя кристаллический остаток перекристаллизовь1вают из этилацетата. Получают 6-ацетиламино-2-(4-этоксикарбонил-1 -пиперазинил)-3-фторпиридин (т.пл. 132-133С) . 3-Фторпроизводное гидро лизуют смесью 15%-ной соляной кислоты и метанола (1:2 по объему). По лучают 6-амино-2-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-3-фторпиридина. Это соединение обрабатывгиот диэтилэток;сиМетиленмалонатом при 13О-140 С, Получают (4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-З-фтор-6-пиридинил -аминометиленмалонат (т.пл. 144145°С), затем продукт циклизуют при нагревании при в этил-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-6-фтор-1,4 дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилат (т.пл. 279-281 Стандартная методика 5. Смесь этил-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-6-фтор-1,4-дигидро-4-6ксо-1,8-нафтиридин-З-карбоксила та (10,5 г), диметилформамида (100 мл) и карбонат. калия (7,4 г) нагревают при в течение 15 ми К раствору добавляют раствор 10,1 г этиленбромгидрина в диметилформамиде и смесь нагревают при100°С и перемешивании в течение 45 мин. После удаления образующегос неорганического соединения фильтрацией фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют ВО мл воды, и полученные кристаллы отделяют фильтрацией и пе рекристаллизовывают из этилового спирта. Получают 10,2 г этил-7-(4 этоксикарбонш1-1-пиперазинил)-6-фтор-1-(2-оксйэтил)-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксйлата (т.пл, 215-217 О. К раствору этого оксиэтилпроизводиого (4,6 г) ц хло.роф01 4е (50 мл) добавляют 5,0 г тионилхлорида, и смесь кипятят с обрат ньм холодильнике в течение 30 мин. После охлаждения раствор обрабатывают 30 мл воды и нейтрализуют насыщенным раствором бикарбоната натрия. Хлороформный слой отделяют, промывают водой и высушивают безводным сульфатом натрия. После удаления растворителя остаток хроматографируют на силикагеле (элюент - хлороформ) , и кристаллы, полученные упариванием основной фракции, перекристаллизовывают из эт.илацетата. Получают 4,7 г этил-1-(2-хлорэтил)-7- (4-этоксикарбонил-1-пиперазинш1) -б-ф1:ор-1, 4-дигидpo-4-oкco-l,8-нaфти pидин-3-кapбoкcилaтa (т.пл. 143144С). Стандартная методика 6. К хорошо перемешиваемой смеси этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-1,4-дигидро-6-нитро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (4,7 г) и карбойата калия (3,77 г) в 40 мл диметилформамида при добавляют 3,6 г йодистого этила. Смесь перемешивают в течение 80 мин при той же температуре () . После удаления нерастворимого остатка фильтраци фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и экстрагируют хлороформом.Послеупаривания хлороформа и добавления эфира к остатку получают 4,5 г этил-7-(4 ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-1,4-дигидро-6-нитро-4-оксо-1,8-на:фтирйдин- 3-карбоксилата, т.пл. 211-212с. К раствору этого продукта (8,0 г) в 200 мл уксусной кислоты при 7080с добавляют порциями 16 г восстановленного железа. После перемешивания в течение 0,5 ч при этой же температуре к смеси добавляют этиловый спирт. После фильтрования фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 300 мл воды, и смесь охлаждают в бане со льдом. Полученное твердое вицество собирают и перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают 5,8 г этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-6-амино-1-этил-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоксилата, т.пл .265-270 С. i Пример 1. Этил-1-этил-б -фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(4-пиперазинил)-1,Ь-нафтиридин-3-карбоксилат (3,48 г) нагревают с 30 мл водной 5%-ной гидроокиси натрия на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения уксусной кислотой рН доводят до 7. Полученный твердый продукт собирают и иерекристашлизовывают из смеси этилового спирта н хлороформа. Получают 3,0 г 1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (l-nHne- разинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 220-224°С. Пример 2. Смесь этил-7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (20 г) и 20%ной соляной кислоты кипятят с обрат ным холодильником в течение 3,5 ч, а затем к реакционной смеси добавляют 100 мл воды и 200 мл этилового спирта. Получившееся твердое вещест во собирают и растворяют в 300 мл горячей воды, В раствор добавляют 5 активированного угля и отфильтровывают. К фильтрату добавляют 25,5 мл концентрированной- соляной кислоты и при охлаждении в бане со льдом по лучают 15,2 г гидрохлорида 1-этил-б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-{1-пип разинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоново кислоты, т.пл. выше 200с. 14,2 г гидрохлорида растворяют в 100 мл водной 4%-ной гидроокиси натрия и разбавленной уксусной кислотой доводят до рН 7,5. Осадок собирают, промывают и перекристаллизо вывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 11,7 г 1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1,Ь-нафтиридин-3-карбоно вой кислоты. Пример 3. 7-(4-Ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-6-фтор-1,4-дигиДро-4-оксо-1,.8-нафтиридин-б-карбо нитрил (3,43 г) растворяют при нагревании в 10 мл концентрированной серной кислоты. Раствор нагревают в течение 15 мин на паровой-бане, а затем выливают в ледяную воду. Раст |вор доводят до рН 8 водной 10%-ной гидроокисью натрия и экстрагируют хлороформом. Экстракт промывают водой, .высушивают и упаривают хлороформом. Полученный осадок кристалли зуют добавлением этилового спирта и хлороформа. Получают 3,35 г 7-(4-ацетил-1-пиперазинил)-1-этил-6-фто -1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-.3-к арб оке амида, т.пл. 282-283°С. Смесь 7-(4-ацетил-1-пиперазинил) -1-:9тил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО71,В-нафтиридин-3-карбоксамида (3,3 г) уксусной кислоты (20 мл) и концентрированной соляной кислоты (20 мл) кипятят с обратным холодиль ником в течение 4ч. Смесь упаривают до трети объема и доводят рН до 7 водной 10%-ной гидроокисью нат рия. Полученное твердое вещество собирают, промывают водой и перекри таллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 2,92 1-этил-б-фтор-1,4-дигидрр-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. П.ример 4. К перемешиваемом раствору этил-1-этил-6-фтор-1,4-диГИДРО-4-ОКСО-7-(4-трифторацетил-1-пиперазин-ил) -1,8-нафтиридин-З-карбоксилата (2,66 г) в смеси хлороформа (20 мл) -г и метанола (30 мл) добавляют раствор карбоната натрия (4,14 г) в 60 мл воды. Смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре, нейтрализуют уксусной кислотой и экстрагируют хлороформом. Экстракт высушивают и хлороформ упаривают. Получают кристаллический продукт. Сырой продукт перекристаллизовывают из этилацетата, при этом получают 2,0 г этил-1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата, т.пл. 150-15lc. Карбоксилат (1,74 г) нагревают с 15 мл 5%-ного водного раствора гидроокиси натрия на водяной бане в течение 20 мин. После охлаждения уксусной кислотой доводят . . рН реакционной смеси до 7. Получсзнное твердое вещество собирают и перекристаллизовывают из смеси этанола и хлороформа. Выделяют 1,5 г 1-этил-6-фтор-1., 4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. Пример 5. 6-Фтор-1,4-дигидРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1-винил-1,В-нафтиридин-3-карбоновой кислоту (т.пл. 256-260°С) получают из этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1-винил-1,8-нафтириг дин-3-карбоксилата по способу примера 4 . Пример 6. раствор гидроокиси натрия (30 мл) добавляют к 1,5 г 7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1-ВИНИЛ-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в те чение 5ч. После охлаждения рН раствора доводят до 7 уксусной кислотой Полученный осадок отделяют фильтрованием. Осадок растворяют в водной 10%-ной уксусной кислоте при нагревании, и рН раствора доводят до 7 раствором аммиака. Полученный осадок отделяют фильтрованием, выделяют 0,98 г б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1-винил-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. Пример 7. Смесь этил-1-этил -7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-б-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (10 г), 15%ной соляной кислоты (50 мл) и этилового спирта (50 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 45 мин. После упариван5«я этанола смесь охлаждают. Полученное твердое вещество отделяют, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси дихлорметана и этилового спирта. Получают 7,5 г 1-ЭТИЛ-7-(4-этоксикарбонил-1-пиперазинил)-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 246-247 С. Раствор 7,5 г 1-этил-7-(4-этoкcи кapбoнил-l-пипepaзинил) -6-фтор-1 , 4-дигидро-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты.в 75 мл водной 10%-ной ГИДРООКИСИ натрия кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч Смесь охлаждают и доводят рН до 7 уксусной кислотой. Полученное твердое вещество собирают, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 5,45 г 1-этил -6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. П р и м е р 8. Перемешиваемый раствор 1-ЭТИЛ-6.-ФТОР-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-трифторацетил-1-пиперазинил)-1/8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты (1,12 г) в 30 мл уксусной кислоты оставляют на ночь при комнат ной температуре. После упаривания уксусной кислоты при пониженном давлении рН остатка доводят до 8-9 разбавленным раствором аммиака. Выпавши осадок собирают, промывают водой и перекристаллизовывают из смеси зтилового спирта и хлороформа. Получают 0,6 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты. Пример 9. К раствору 7-(4-бензилоксикарбонил-1-пиперазинил)-1-зтил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты (1,4 г, т.пл. 232-234 с) в смеси этилового спирта 20 мл), воды (8 мл) и пиридина (2 мл) добавляют 140 мг 5%-ного палладия на угле. Смесь гидрируют при комнатной температуре при встряхивании. После поглощения 84 мл водорода смесь фильтруют для удаления катгшизатора и фильтрат концентрируют досуха при пониженном давлении. К остатку добавляют 16 мл воды и рН раствора доводят до 7, при этом образуетс1я осадок. Осадок отделяют, промывсцот водой и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 0,82 г 1-этилг-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазйнил)1-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты Пример 10. 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7- (4- (/1,(Ь,й-трихлорэтоксикарбонил)-1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновую кислоту (500 мг) обрабатывают 500 мг цинкоэой пыли и 5 мл уксусной кислоты при к(Я4натной температуре в течение 2ч. После фильтрования фильтрат упариваю при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и нейтрализуют раствором аммиака. Полученный ;осадок собирают и перекристаллизовывают из смеси этилового спирта и хлороформа. Получают 290 мг 1-этнп-6-фтор -1,4-днгидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты. П р и м е р 11. Смесь этил-1-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-этоксикарЬонил-1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (т.пл. 171173с) (0,8 г) , 10%-НОЙ гидроокиси натрия (б мл) и этилового спирта (2 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 3ч. После охлаждения рН раствора доводят до 7,0-7,5 10%-ной уксусной кислотой. Осадок отделяют Фильтрованием, промывают этиловым спиртом и перекристаллизовывают из смеси диметилформамида и этилового спирта. Получают 0,57 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты. Полученную карбоновую кислоту (0,2 г) растворяют в 5%-ной соляной кислоте, раствор упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток кристаллизуют из воды. Получают гидрохлорид этой кислоты (0,21 г). 0,2 г указанной карбоновой кислоты растворяют в 7%-ном растворе мётансульфоновой кислоты при нагревании. После охлаждения осадок перекристаллизовывают из водного метанола. Получают аддукт мётансульфоновой кислоты с этой карбоновой кислотой (0,22 г) с т.пл. выше (с разл.). Карбоновую кислоту (1,0 г) при нагревании растворяют в этиловом спирте, затем к раствору добавляют уксусную кислоту (1 мл). После охлаждения смеси полученные кристаллы отделяют,. перекристаллизовывают из этилового спирта. Получают аддукт уксусной кислоты и карбоновой кислоты (0,93 г) с т.пл. 228-229с. Стандартная методика 7. К смеси 37%-ного фЬрмалина (12 мл) и муравьиной кислоты (18 мл) добавляют 6,0 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-окСо- 7-( 1-пиперазинил) -1,8-нафтиридин-3-карбоноврй кислоты. Смесь нагревают при 120-125 С в течение 4 ч при перемешивании. Затем смесь упаривают досуха при пониженном давлении, и рН остатка доводят до 8 добавлением водного 7%-ного бикарбоната натрия. Экстрагируют хлороформом. Экстракт высушивгиот и растворитель упаривают. Осадок перекристаллизовывают из смеси хлористого метилена и этилового спирта. Получают 5,0 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-7-(1-метил-1-пиперазинил)-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 228-230°С. Соединение- 1. 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновая кислота. 910759 Соединение 1. 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пипераэинил)-1,8-нафтиридинметансульфонат,° Соединение 2. 6-Фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пипврази- 5 нил)-1-винил-1,8-нафтиридин-3-карбоновая кислота, Соединение А (извест. нре) . 1-Этил-1,4-Дигидро-4-оксЬ-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин- 10 -3-карбоновая кислота (незамещенный 6-нафтирилин). C о е д и н е н и е В (получено стандартным методом). 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-7-(4-метил-1-пиперази- 5 вил)-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоновая кислота. Соединение С (известное). б-Хлор-1-этил-1,4-дигидро-4-оксо-7- Q -(1-пиперазинил)-хинолин-3-карбоновая кислота., 7610 Соединение D (известное), 1-Этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пипераэинил)хинолин-3-карбоновая кислота. С о е д и и е н и е Е .(известное). 1-Этил-1,4-дигидро-7-метил-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновая кислота. Соединениер (известное). 8-Этил-5,8-дигидро-5-оксо-2-(1-пиперазинил)пиридо(2, 3-о1) пиримидин-6-карбоновая кислота. Соединение G (известное). Натриевая соль dt -(5-индaнилoкcикapбонил)бензилпенициллина. Соединение Н (известное). D- -Аминобензилпенициллин. Соединение (известное). 7-(итоС-Аминофенилацетамидо) .дезацетоксицефаллоспоринова я кислота. Антибактериальная активность in vitro при минимальных ингибирующих концентрациях предлагаемых соединений приведена в табл. 1 и 2. . б л и ц а 1

Таблица 2

1, Способ получения производных 1,8-нафтирИдина общей формулы JxiV нО н к, где И. - этил или винил, или их солей, отличающийчто в соединении общей с я тем, формулы 0. . i. где R имеет указанные значения; : R2 - галкоксикарбонил, карбокси-, циано-, карбамоил-, амидиногруппа или группа С NH)OAIk где Alk - С -С -алкил; RJ - водород или защитная группа, гидролизуют группу RJ, когда она не карбоксил, и/или удаляют защитную группу RJ с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что гидролиз проводят водным растворителем в присутствии кислоты или основания при 30100°С. Ч сл ) о:)

Streptococcus faecalis Рт2473

Streptococcus pyogenes 65 A

ICorynebacterium pyogenes С 21

200

1,56

50

200

0,2 0,025 0,78

200

25

3,13 1,56 l.,56 Из результатов табп, 1 и 2 следует, что соединения 1, l и 2 обладают очень высокой антибактериальной активностью по отношению к грамположительным и грамотрицательным бактериям, включая Pseudomonas aeruglnosa; соединение А (6-незамеценный 1,8-нафтиридин) уступает по антибактериальной активности по отношению к грамположительным и грамотрицательн|Л111 бактерий предлагаемым соединениям.

Продолжение табл. 2 Терапевтическая эффективность in vivo. Соединения 1, 1и 2, а также соединения А - G (каждое) растворяют в дёионизированной воде или суспенди руют в 2,0%-HOh4 водном растворе CWIC. Саждый из растворов вводят орально мыиам, Предварительно зараженным тест-микробами, Средняя эффективная доза ( ) представлена в табл. 3. Таблиц в 3

Рассчитано для свободной карбоновой кислоты. Мыши-самцы (ddy) весом г заражаются инфекцией Staphylococcus aureus № 50774 внутривенно дозой 5 10 LD50(около 9хГО клеток/мышь) ба териальной суспензии в физиологичес ком растворе. Escherichia coli Р-5101. Внутрибрюшная инфекция дозой 5 - 10 LDso (около Эх 10 клеток/мышь) бактериальной суспензии в триптосоевом бульоне. Preudomonas aeruginosa № 12. Внутрибркяиинная инфекция дозой 50 100 LDjo (около 9 X 10 клеток/мьииь) бактериальной суспензии в.триптосоев бульоне с 4% муцина. Лечение: препарат вводится дважды (через 5 мин и б ч после заражения) . Наблюдение: Staphylococcus aureu 50774 - 14 дн.; Escherichia coli Р-5101 - 7 дн.; Pseudomonas aerugi- nosa I 12 - 7 дн. Из результатов табл. 3 следует, что соединения 1 и l демонстрируют высокую терапевтическую эффективнос при общей инфекции грамположительны ми и грамотрицательными бактериями; терапевтическая эффективность соеди иения 2 в отношении грамположительных бактерий ниже, чем соединений 1 и 1 , но в отношении грамотрицатель ных бактерий его терапевтическая эффективность выше. Таким образом,

Продолжение табл. 3 соединение 2 особенно полезно для лечения общей инфекции, вызываемой jPseudomonas aeruginosa; соединения 1, l и 2 демонстрируют лучшую терапевтическую эффективность при общей инфекции гра 1положительными бактериями, особенно Pseudomonas aeruginosa, чем соединения А и С, соединения Е и F, которые представляют собой промышленные синтетические антибактериальные вещества, и соединения G, Н И, которые представляют собой промышленные антибиотики; соединения 1 .и 1 обладают большей терапевтической эффективностью, чем |соединение D в отношении грамположительных бактерий in vivo. Терапевтическая эффективность in vivo. Терапевтическую эффективность соединений 1 и 2 определяют на мышах при восходящей инфекции почек, вызываемой Pseudomonas aeruginosa № 12. Полученные результаты (, мг/кг) представлены/в табл. 4. Методика испытания. У мышей-самок (ddY) весом 22-30 г ПОД внутривенным пентабарбиталовым наркозом (50 мг/кг) небольшим надлобковым надрезом вскрывают пузырь и вводят 0,1 мл разбавленной в отношении 1:10000 культуры Pseudomonas aeruginosa 12, выращенной за 20 ч, с помощью 0,25 мл шприца и 0,25 мм иглы. Мышей о1раничивают в питье в течение 1-3 дней и на 1-й день после инфицирования в течение трех дней после инфицирования дважды в день вводят испытуемые препараты. Д выявления бактерий на пятый деиь после заражения почки извлекают, го товят поперечные среды, псвлецают в агар Кинг А и инкубируют при в течение иочи. При этом в поч не обнаруживают бактерий восходящей инфекции почек Значения БО рассчитаны с поьющью усредненных анализов. Эффективность in vivo соедйнеийй при восходящей инфекции почек Pseud monas aeruginosa №12 иа мышах приведена в табл.4. Та б ли ц а 4 Из результатов табл. 4 следует, что терапевтическая эффективность соединений 1 и 2 при восходящей инфекции почек, вызванной Pseudomonas aeruginosa, намного -выше, чем соеди нения D. / Острая токсичность. Растворы предлагаемых и известны соединений в различных концентрация перорально вводят мышам-самцам (udY (группы от 4 до 8 особей) дозой 0,1 мл на каждые 10 г веса мыши. К личество погибших мышей рассчитывае ся через 7 дней, и в соответствии с известным методом рассчитывается значение средней летальной дозы ; (ID, мг/кг) . Полученные результаты представле ны в табл.5. -Т а б л и ц а 5 74000 Продолжение табл. 5 Значения, рассчитанные для карi боновой кислоты. На основании результатов табл.5 можно сделать выводы о том, что | предлагаемые соединения имеют очень низкую токсичность; соединение В, полученное введением метильной группы в положение 4, в 1-пиперазинильной группе соединения 1 демонстрирует одинаковую или более высокую антибактериальную активность, чем предлагаемые соединения (см.табл. 1-3), однако оно имеет очень высокую токсичность. Подострая токсичность. Соединение 1 перорально вводят однократно шести мышам-самцам (3CL- ICR линии), имеющим средний вес 20 г, в количестве 2 мг/кг в один из 14 дней. В течение испытательного периода производят взвешивание каждой из М1Л11ей. На 15-й день проводят гематологическое исследование. После гематологического исследования мышей умерщвляют и взвеиивают каждый из органов, а также проводят гистопатологич ее кое исследов ан ие. Не наблюдается отклонений от нормы в вейе тела и органов в группе мышей, которой вводили соединение 1. Гематологические исследования и гис;топатологическое наблюдение также не обнаруживают отклонений по сравнению с контрольной группой мышей. Уровень в плазме.. Собакам (кобели) весом л12 Kic как, дый- перорально вводят капсулы, содержащие одно из соединений 1 и 2, дозой по 25 мг/кг веса с 200 мл моло ка. Образцы крови берут из вены каждой из собак через 0,5; 1, 2, 3, 6, 8 и 10 ч после введения и центрифугированием каждого образца отделяют плазму. Уровень препарата в крови определяют тонкослойной хроматографией с использованием Escherichia coil Кр в качестве индикатора. Полученные при этом результаты показаны в табл.6.

Из результатов табл.6 видно, что соединения 1 и 2 хорошо абсорбируются организмом при пероральном введении, и уровень препарата в плазме сохраняется на высоком уровне в течение довольно долгого времени, в частности, соединение 1 демонстрирует более высокий уровень в плазме, чем значения МИК (см. табл.1), в отношении большинства бактерий в течеПие 1 - 10 ч после введения. Так, например, уровень соединения 1 в плазме (5,9 мг/мл) в 8 раз превышает значения МИК против Pseudomonas aeru ginosa 12 и Staphylococcus aureus 507704, и в 60 превышает значение МИК против Escherichia coli Р-5101.

соединения 1 и 2 демонстрируют довольно высокий уровень в плазме и таким образом, высокая антибактернгшьная активность препарата наблюдается при низких дозах при лечении общей инфекции, вызываемой различными бактериями.

Выделение с мочой.

Мочу собак, использованных в предыдущем примере, собирают в течение 24 ч, и содержание соединений 1 и 2

Из результатов табл. 7 следует, что выделение соединений 1 и 2 с мочой достаточно хорошее и составляет

0 за 24 ч 30-40% от препарата, вве денного перорально; уровень препаратов 1 и 2 (326-205 мг/мл) в моче 1превышает в 13 - 6000 раз значения МИК (0,1-25 мг/мл) для различных

5 бактерий (табл.1); соединения 1 и 2 демонстрируют более высокую эффективность при низких дозах при лечении инфекции мочевых путей, вызываемой различными бактериями.

Как следует из табл. 1-7 предлагаемые соединения, особенно соединения 1, 1 и 2, демонстрируют высокую терапевтическую эффективность при сильных заражениях грамположи5 тельными и грс1мотрицательными бактериями. После перорального введения они сохраняют высокий уровень в плазме крови и моче в течение длительного времени. Они низкотоксичны и эффективны при низких дозах при лечении инфекций мочевых путей и общей инфекции, вызываемых различными бактериями.