Изобретение относится к способу получения новых производных нафтиридина, которые могут найти применение в медицине.
Известен способ получения 7-пиперазинопроизводных 1,8-нафтиридина взаимодействием 7-галогёнпроизводных 1,8-нафтиридина с пиперазинами 1 J.
Цель изобретения - получение новых биологически активных соединений.
Поставленная, цель достигается согласно способу получения производных нафтиридина формулы
о
X ...Л СООНг
СП
«О
N 1Г
где X . представляет собой атом фтора или хлора , этил или винил; атом водорода или низший
алкил;
или их фармацевтически пригодных солей, заключающему ся в том, что соединения общей формулы
Cl)
где У - атом галогена, низший алкоксил, низшая, алкилтио-, низший алкилсульфинил, низший алкилсульфонил, низшая алкилсульфонилокси-, или арилсульфонилокси группа; Х,К1и1ишеют указанные значения, подвергают взаимодействию с пиперазином в присутствии инертного растворителя при 20-150 С с последующим выделением целевого гфодукта в свободном состоянии или в виде солей
Соли нафтиридиновыхЪоединений образуют взаимодействием, нафтиридинового соединения с кислотами или основаниями.
Кислоты могут быть неорганические или органические: соляная, уксусная, молочная, янтарная и метансульфокйслота.
Основания представляют собой любые неорганические или органические основания, способные давать соли с карбоксильными группами соединений формулы(1), например гидpooкиf си металлов, как например, гидроокиси натрия или кальция и карбонаты металлов, такие как карбонаты натрия или калия.
Предпочтц.тельными солями формулы(I ) являются хлориды или метансуль фонаты.
в зависимости от условий нафтиридиновые соединения формулы (I могут быть выделены в форме гидратов.
Реакцию замещения атома водорода 7-й позиции формулы(1 ) пиперазильной группой
/
-н
осуществляют нагреванием.соединения ЛQ формулы.(II ) и пиперазина в растворителе, при необходимости используют герметичный реакционный сосуд. Предпочтительно проводить реакцию в присутствии основания дпя нейтрали- зации кислоты, такого как бикарбона ,- натрия, карбонат натрия, карбонат клия, триэтиламин, пиридин или пиколин.
Соединения берут в стехиометрических количествах. Кроме того, может быть использован избыток соединения пиперазина также для нейтрализации кислоты.
Растворитель, используемый в реакции, выбирают с учетом свойств ис25 ходных веществ. Примерами раствори. теля могут служить алифатические спирты, такие как этанол или пропанол, ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, галоидалка30 ны, такие как дихлорэтан или хлороформ, эфиры, такие как тётрагидрофуран, диоксан или дифениловый эфир, . ацетонитрил, диметилсульфоксид, ди. .метилформамид и вода. Их можно испол25 ,зовать как в чистом виде, так и в смеси друг с другом.
Соединения данного изобретения, . полученные приведенным способом, выделяют и очищают обычными методами.
40 Соединения общей формулы (I ) получают в свободном виде или в виде соли в зависимости от выбора исходных материалов и условий реакции. Они могут быть переведены в фармацевтически применимые соли путем обработки их кислотой или основанием.В качестве кислот используют различные органические и неорганические кислоты: янтарная, лактановая, щавелевая и
5Q метансульфоновая.
Новые производные 1,8-нафтиридина, относящееся к данному изобретению, обладают, как показано в приведенных примерах, высокой антибактериальной активностью. Поэтому эти
соединения можно применять в качестве препаратов для лечения или предупреждения бактериальных инфекций теплокровных животных и человека.
Дозировка предлагаемого соедине60 ния общей фор-1улы (I ) или его солей при назначен.ии человеку может быть определена с учетом возраста, веса тела и состояния пациента, способа применения, частоты введения препарата и др. Обычная доза aufi взрослого составляет 0,1-7 г в день, предпочтительно 0,2-5 г в день. Предлагаемые соединения могут применяться как лекарства, например в форме фармацевтических композиций содержащих в смеси с органическими или неорганическими твердыми ,или жидкими применимыми в фармацевт ке вспомогательными веществами, при годными для применения внутрь или для местного применения. Фармацевтическими применимыми вспомогательными веществами являютс вещества, которые не реагируют с предлагаемыми соединениями. Примера ми могут быть вода, желатин, лактоза, крахмал, целлюлоза (преимущественно микрокристаллическая целлюлоза ), карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, сорбит, стеарат магния, тальк, растительные масла, бензиловый спирт, смолы, пропиленгликоль, полиалкиленгликоил, метилоксалилмочевина и другие известные в фармаце тике вспомогательные вещества, фармацевтические композиции могут пред ставлять собой порошки, гранулы, таблетки, мази, свечи, кремы, капсулы, т.д. Они могут быть стерилизо ваны и/или содержать вспомогательные средства, такие как консерванты, стабилизирующие или увлажняющие вещества, кроме того, могут содержа другие терапевтически ценные вещест ва в зависимости от назначения препарата . Способ получения новых соединени общей формулы (I ) и их солей, а так же их фармакологическая активность приведены ниже. Примеры А-С демонстрируют фармакологическую активность соеди нения общей формулыfтуи их солей в сравнении с контрольными соединения ми, выходящими за рамки данного изо .Е)етёния. . , Q Соединения, приведенные в примерах и стандартных методиках, были исследованы элементным анализом, ИК-спектроскопией, ЯМР-спектроскопи ей, масс-спектрометрией и хроматогр фией в тонком слое. Срав(1ительная методика 1. Получе ние исходного соединения формулы 5 СООН хйс С1 - Смесь 1-эхил-б-фтор-1,4-дигидро -7-ОКСИ-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты 1з,25 г ) и хло ристого фосфорила (ЗО мл нагревают с обратным холодильником в те чение 5 мин. После удаления избытка хлористого фосфорила путем отгонки к остаточному продукту отгонки добавляют 30 г смеси лед-вода при одновременном перемеигивании, смесь выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. Выпавший осадок извлекают путем фильтрации, промывают и перекристаллизовывают из ацетонитрила, в результате получают 3,2 г 7-хлор-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-OKCO-l,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, с т.пл. 265-267t. Элементный анализ. Найдено, %: С 48,89; Н 2,92, N10,33i С1 13,21. F 7,07. . C I N OjClF %: С 48,81; Н 2,98; Вычислено, N10,35; С1 13,10; F 7,02. IR(KBr ), см-З,- 1710, 1630. Пример 1.Получение соединения общей формулы (I). К перемешанной смеси (поддерживаемой при температуре 70°CJ безводного пиперазина (7,96 г) и ацетонитрила (200 мл) добавляют горячий раствор 7-хлор-1-зтил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты (5,0 г) в 200 мл ацетонитрила. Реакционную смесь выдерживают при 70°С в течение 1 ч при одновременном перемешивании. После удаления ацетонитрила путем отгонки к остаточному продукту отгонки добавляют 150 мл водного 3%-ного растьора уксусной кислоты. IНерастворимой материал отфильтровывают и фильтрат выпаривают досуха при пониженном давлении . К остаточному продукту выпаривания добавляют 100 мл воды и 10 мл 28%-ного водного раствора аи мийка , смесь нагревают в течение нескольких минут и охлаждают на ледяной бане. Получаемый в результате твердый продукт извлекают,промывают водой и перекристаллизовывают из смеси э.танола с хлороформом, в результату чего получают 5,4 г 1-этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пцперазинил) -1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты с т.пл. 220-224С. Элементный анализ. Найдено, %: С 56,35; Н 5,37, 17,38; F 5,87. Вычислено, %: С 56,24; Н 5,35; 17, 48; F 5,93. IR(KBr), CM 1l7lO, 1635. П р и м е р 2. Получение сложного эфира соединения общей формулы (.Г J. Раствор зтил-1-этил-7-этансульфонил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-З-карбоксилата (1,0 г) ,и безводного пиперазина (0,6 г) в 60 мл ацетонитрила нагре вают с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь выпаривают досуха при пониженном давлении и остаточный продукт выкристаллизовыв.ают и:з этнлацстата. Извлеченный тверда продукт перекристаллиэовывают из этилацетата, в результате получают 0,63 г этил-1-этил-6-фтор-1, -ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пипераэинил) -1,8-нафтиридин-З-карбоксилата, т.пл. 150-15lOc. Элементный ангшиз. Найдено, %: С 58,62; Н 6,30; N 15,90; F 5,44. Ц. Рассчитано, %: С 58,61,Н 6,08; N i6,08;F 4,58.: ), см-ь1710, 1680, 1610. Пример 3. Осуществляя процесс аналогично примеру 1, получаю следующие соединения. Соединение-1: а)хлоргидрат 1-этил-6-фтор-1,4 -дигидpo-4-oкco-7-(;l-пипepaзинил) -1,8-нафтиридин-З-карбоновой кисло ты. .пл.- выше . Элементный анализ. Найдено, %: С 50,40, Н 5,10, N 15,67; С1 9,86; F 5,18. СЛ 40эС1Р Вычислено, .%: С 50,50; Н 5,09, 1 15,70; С1 9,94, F 5,33. IR (КВг) см-; 1725, 1535. б)метансульфонат 1-этил-6-фто -1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты.Т.пл. выше 300°С (пла ление с разложением). Элементный анализ. Найдено %: С 46,28; Н 5,19; Я 13,27| S 7,74} F 4,58, Q.,,0-,SF Вычислено, %: С 46,14, Н 5,08, N 13,46; S 7,70; F 4,56. IR(KBr) ci ;:1720, 1625. в)ацетат 1-этил-6-фтор-1,4-ди ГИДРО-4-ОКСО-7- 1-пиперазинил)-1, -нафтиридин-3-карбоновой кислоты. Т.пл. 228-229 0. Элементный анализ. Найдено, %: С 53,80; Н 5,78, N 14,60-, F 4,96. c Y OslВычислено, %: С 53,68; Н 5,57/ N 14,73; F 4,99. IR(KBr), 1705, 1625. Соединение 2. а) 6-фтор-1,4-дигидро-4-Ьксо-7 -(1-пипёразинил)-1-винил-1,8-нафт ридин-3-карбоновая кислота. Т.пл 256-260с (с разложением). Элементный анализНайдено %: С 56,55; Н 4,77; N 17,51; F 6,05. , С 56,60; Н 4,75; Вычислено, %:, .. . N 17,во; F 5,97. IR (КВг), CM.U620, б) хлоргидрат 6-фтор-}.,4-дигид -4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1-винил -1,8-нафтиридин-3-карбоновой кисл Т.пл. (с разложением) . Эл€ ментный анализ. Найдено, t: С 50,63; Н 4,44; 15,5, С1 9,95; Г 5,30. %: С 50,78; Н 4,55; Вычислено, 15,79; С1 9,99; F 5,36. IR(KBr), см :1720, 1620. в) метансульфонат 6-фтор-1,4игидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1инил-il, 8-нафтиридин-З-карбоновой сЛоты. - Т.пл. 291-293°С,(с разжением 1Элементный анализ. Найдено, %: С 46,45; Н 4,45/ 13,26; S 7,68; F 4.47. Вычислено, %: С 46,37; Н 4,62; 13,52; S 7,74; F 4,58. IR(KBr), civr.;1710, 1620. Соединение 3: хлоргидрат 6-хлор-1-этил-1,4-диДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1,8афтиридин-3-карбоновой кислоты. пл. выше 300 С. Элементный анализ. Найдено, %: С 48,26, Н 6,10; 14,80; С1 19,22. Вычислено, %: с 48,27; Н 4,86; 15,01; CI 19,00. IR(KBr), см-;1710, 1600. Соединение 4: 6-хлор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1 иперазинил)-1-винил-1,8-нафтиридин-карбоновая кислота. Т.пл. 2724 0. Элементный анализ. Найдено, %: С 53,96; Н 4,49/ 16,57; С1 10,77. CJlJj.OaCI ВЕЛчйслено, %: С 53,81, Н 4,51) 16,74; С1 10,59. IR(KBr), см- 11620. Пример4; Осуществляя просс аналогично примеру 2, получают единения. Сложный И-пропиловый эфир соединия общей формулы{1 )-Н-пропил-1тил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-71-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3арбоксилат. Т.пл. 133-135 с. Элементный анализ. Найдено, %: С 54,48; Н 6,49; 15,41; F 5,40. Гслено, %: С 59,66; Н 6,40, 15,46; F 5,24. IR(KBr) ,см Л-1720, .1670, 1620. Сложный Н-бутиловый эфир -бутил-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафридин- 3-карбоксилат. Т.пл. 1190С. Элементный анализ. Найдено, %: С 60,58; Н 6,42; 14, F 5,09. чисЛено, %: С 60,62; Н 6,69) 14,88; Н 5,05. lR(KBr),CM-t-1720, 1670, 1610, Примерз. Получение соединения общей формулы(I К К перемешиваемой смеси (поддерж ваемой при температуре ) безводного пиперазина (1/72 г) и ацетонитрила (80 мл ) добавляют по ка лйм горячий раствор 1-этил-7-этилт -б-фтор-1,4-ДИТИДРО-4-ОКСО-1,8-наф тиридин-3-,карбоновой кислоты (1,48 в 100 мл ацетонитрила. Смесь нагре вают с обратным холодильником в те чение 1 ч при одновременном переме шивании. После удаления д астворите ля при пониженном давлении образую щийся твердый продукт извлекают, промывают водой и перекристаллизов вают из смеси этанола с хлороформо в .результате получают 1,7 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидpo-4 oкco-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислот ы,т.пл.220-224 , Цементный анализ. . Найдено, %: С &6,32; Н 5,34; N 17,68; F 5,98. Вычислено, %: С 56,24; Н 5,35; N 17,49, Г 5,93. Инфракрасный спектр JR(KBr), см 1710, 1635. . П р и м е р 6. Йрлучение сложно го этилового эфира соединения обще формулы( I ). Раствор этил-1-этил-7-этансуль фонил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-1,8-нафтиридин-3-карбоксилата (1,7 г} и безводного пиперазина (1,72 г) в 80 мл ацетонитрила нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь подвергают обработке аналогично пр меру 2 и получают 1,32 г этил-1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин- 3-карбоксилата, т.пл. 150-151С. Элементный анализ. Найдено, %: С 58,48; Н 6,29, N 15,98; F 5,53 Вычислено, %: С 58,6i; Н 6,08; N 16,08; F 5,45. Инфракрасный спектр 3R(KBrX см 1710, 1680, 1610. П р и м е р 7. Получение соедй-. нения общей формулы (I ). aj К перемешанной смеси (поддерживаемой при ) безводного пиперазина (1,72 г) и ацетонитрила (90 мл) добавляют по каплям горячий раствор 1-этил-6-фтор-1,4-дигид ро-7-метансульфонилокси-4-оксо-1,8нафтиридин-3-карбоновой кислоты (1,15 г) в 110 мл ацетонитрила.Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч с одновременным перемешиванием. После отгонки растворителя при пониженном давлении полученный твердь1й осадок извлекают. промывают водой и перекристаллизовывают из смеси этанола с хлороформом, в результате получают 1,24 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 220-224 С. Элементный анализ, Найдено, %: С 56,13; Н 5,29; N 17,52; Г 5,98. C..O,J5 17„4 3 Вычислено, %: С 56,24; Н 5,35, N 17,49, F 5,93. :3R(KBr), см ;1710, 1635. б) 1-Этил-6-фтор-1,, 4-дигидро-7- (пс1рс(-толуолсульфонилокси)-4-оксо-1,, 8-нафтиридин-З-карбоновую к-ислоту (2;03 г) обрабатывают безводным пиперазином (1,72 г) в 200 мп ацетонитрила аналогично примеру 74 и получают 1,31 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро -4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 220-224с. Элементный анализ. Найдено, %: С 56,27; Н 5,38; N 17,47-, Т- 5,88. С,5Н,-,МдО,,1-Вычислено, %: С 56,24} Н 5,35; . Н 17,49; F 5,93. JR(KBr), см-:1710, 1635. П р и м е р 8. Получение соедйнеиия общей формулы (I).. Смесь Д-этил-6-фтор-1,4-дигидро-7-метокси-4-оксо-1,8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (1,33 г) и безводного пиперазина (2,0 г) в 150 мл ацетонитрила нагревают с обратным холодильником в течение 1,5 ч. После отгонки растворителя при пониженном давлении образующийся твердый продукт извлекают, промывают водой и очищают путем перекристаллизации из смеси этанола с хлороформом, в результате,получают 1,0 г . 1-этил-6-фтор-1,44дигидро-7-(1-пиперазинил)-4-оксо-1,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты, т.пл. 220-224°С. Элементный анализ. Найдено, %: С 5б,13, -Н 5,2, N 17,56; F 5,93. Лб 40з1 Вычислено, %: С 56,24; Н 5,35; N 17,49; F 5,93. 3R(KBr), см-.1710, 1635. Пример9. Получение сложного этилового эфира соединения общей формулы(1). Безводный пиперазин (4,3 г) доавляют к раствору ЭТИЛ-7-ХЛОР-1этил-6-фтор-1,4-дигидро 4-оксо1,8-нафтиридин-З-карбоксилата (2,98 г) в смеси этанола (50 мл) с .; лороформом (50 мл), Смесь перемеивают в течение ночи при комнатной емпературе, затем выпаривают досуа при пониженном давлении. Остаочный продукт выпаривания-перекрисаллизовывают из этилацетата, в результате получают 2,85 г этил-Г-эти -б-фтор-1, 4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7- (1 -пип разинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоксил та, т.пл. 150-15l c. Элементный анализ. Найдено, %: С 58,58; Н 6,24; N 15,92; F 5,43. бычислено,-%: С 58,61, Н 6,08; N 16,08; F 5,45. ,JR(KBr), CM.-ITIO, 1680, 1610, П р и м е р lO. Получение соединения общей формулы (1 . Смесь-7-хлор-1-этил-6-фтор-1,4.-дигидро-4-OKCO-l, 8-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (2,7 г) и бе водного пиперазина (3,4 г) в толуо ле (100 мл) нагревают при 120°С в течение 30 мин при, одновременном пе ремешивании. Смесь выпаривают досух при пониженном давлении. К остаточному продукту выпаривания добавляют 10%-«ую уксусную кислоту, и смесь фильтруют с целью удаления нераство римого материала. Фильтрат подщелачивают 28%-ным раствором аммиака, затем нагревают в паровой бане в те чение нескольких минут и охлаждают Образующийся твердый продукт извлекают, промывают водой и перекристал лизовывают из смеси этанола с хлороформом, в результате получают 2,86 г 1-этил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1,8-.нафтиридин-3-карбоновой кислоты, т.пл 220-224 с. Элементный анализ; Найдено, %: С 56,28, Н 5,32; N 17,57; F 6,04. Вычислено, %: С 56,24; Н 5,35; N 17,49; F 5,93.. 3R(KBr), см-;1710, 1635. Пример 11 и 12. Аналогично примеру 2 получают следующие соеди нения (см. табл.1). О F.N JL OOOR2 Ri . ...в следующей сравнительной метод ке 2 описывается получение соединения не входящего в объем изобретения приготовление которого не описывалось ранее, с той целью, чтобы дат оценку фармакологического действия новых 1,8-нафтиридиновых соединений, соответствующих изобретению. Сравнительная методика 2. Получение сравнительного соединения фо мулы 9 К раствору 37%-ного формалина (12 мл) и муравьиной кислоты (18 млi добавляют 6,0 г 1--этил-6-фтор-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1,8-нафтиридин-З-карбоновой. кислоты и смесь нагревают при 120-125°С е течение 4 ч при одновременном п рёмешивании. Затем смесь выпаривают досуха при пониженном давлении, остаточный продукт выпаривания доводят до величины рН 8 путем добавления водного 7%-ного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом. Экстракт высушивают, растворитель выпаривают. Кристаллический остаточный продукт перекристаллиэовывают из смеси дихлорметана с этанолом,..в результате получают 5,0 г 1-ЭТИЛ-6-ФТОР-1,4-ДИГИДРО-7-(4-метил-1-пиперазинил)-4-оксо-1,8-нафтиридИН-3-карбоновой кислоты, т.пл. 228230 С. Элементный анализ. Найдено, %: С 57,53; Н 5,74; N 16,76; F 5,.64. Вычислено, %: С 57,47, Н 5,73, N 17,76; Р 5,68. JR(KBr), см :1710, 1630. Фармакологические активности преддагаемых соединений общей формулы (I) и их солей по сравнению с известными ан- тибактериальными агентами показагад в примерах A-G приведенных ниже. Испытывают следующие соединенияs Соединение 1 - 1-этил-б{-фтор-1,4-диГидрО-4-оксо-7- (1-пиперазинил J-1,8-нафтири{1ИН-3-карбоновая кислотаI v.sO COCfH соединение 1-1-этил-6-фтор-1,4-диГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-1,«-нафтиридин-метансульфонатО FNy..A.COOH: лЛ-ДчД -снззозн соединение 2 - 6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(1-пиперазинил)-1-винил-1,8-нафтиридин-З-карбоновая кислота Соединение 3 - гидрохлорид б-хлор-1-этил-1,4-ДИГИДРО-4-ОКСО-7-(1-пиперазинил)-,8-нафтиридин-З-карбоновой кислоты lischericliia coliP-5101 Pseiidonionas acruginosa № 12 Эффективность In vivo при общей инфекции у мышеи при пероральном вве дении приведена в табл.3. Из результатов табл.3 следует, что соединения 1 и l демонстрируют активную терапевтическую эффективность при общей инфекции грам- положительными и грам-отрицательиыми бак териями. Терапевтическая эффективность соединения 2 против грам-положительных бактерий ниже чем у соединений 1 и 1, но в случае грам-отрицательных ба.ктерий его терапевтическая эффективность выше. Таким образом, сое динение 2 особенно полезно для лечения общей инфекции, вызываемой Pseudomonas aeruginosa. Соединения 1,1и 2 демонстрируют лучшую терапевтическую эффективность при общей инфекции грам-положительными бактериями, особенно Pseu domonae aeruginosa, чем соединения А и С,соединения; Е и F, которые пред ставляют собой промышленные синтетические антибактериальные вещества, и соединения G, Ни F, которые представляют собой промышленные антибиотики . Соединения 1 и l обладают большей терапевтической эффективностью, чем соединения D, против грам-положи тельных бактерий in vivo. Соединения 1, 2 намного лучше, чем соеди нения D по терапевтической эффектив ности in vivo против грам-отрицатель ных бактерий, включая Pseudomonas aeruginosa Этиловый эфир соединения (. 1 1 удобен в качестве промежуточного продукта для синтеза соединений 1 и 1 . Он также демонстрирует высокую антибактериальаую активность in vivo против грам-положительных и грам-отрицательных бактерий. Пример С.(терапевтическая эф фективность in vivdj. Терапевтическую эффективность соединений 1,2 и D испытывают на мышах против восходящей инфекции почек, вызываемой Pseud monas aeruginosa №12, по следующей методике. У самок (ddx) весом 22-30 под внутривенным пентабарбиталовым наркозом (50 мг/кг) небольшим надлоб ковым .надрезом, вскрывают мочевой пузырь и вводят 0,1 мл разбавленной в отношении 1:10.000 культуры Pseudoroonas aerugunosa 12, выращенной з 20 ч, с помощью 0,25 мл шприца и 0,25 мм иглы. Мышей ограничивают в питье на период от 1 дня до и на 1 день после, инфицирования, в течение 3 дней после инфицирования дваж ды в день обрабатывают препаратами. Для выявления бактерий на 5 день после заражения почки извлекают, готовят поперечные срезы, помещают в раствор агар Кинг А и инкубируют при в течение ночи. При этом в почках не обнаружено ни-каких бактерий из восходящей инфекции почек. Значение Е)рассчитывают с помощью усредненных анализов. Эффективность in vivo соединений при восходящей инфекции почек Pseudomonas aeruginosa № 12 на мышах приведена в табл.4. Из результатов табл.4 следует, что терапевтическая эффективность соединений 1 и 2 против восходящей инфекции почек, вызванной Pseudomonas aeruginosa, намного лучше чем у соединения D. Пример D (острая токсичность) . Раствор, содержащий каждый из соединений 1-4 и соединения В - F, в различных концентрациях перорально вводят мьш:ам-самцам ddT (в группы от 4 до 8 в каждую) в дозе 0,1 t-ui на каждые 10 г веса мыши. Количество погибших мышей рассчитывают через 7 ДН., и в соответствии с методом Беренс-Каербера рассчитывают значение средней летальной дозы (JJDgoMr/Kr). Полученные результаты представле ны в табл.5. Из результатов табл.5 видно, что соединения 1-4 имеют очень низкую токсичность, соединения В, полученное введением метильной группы в положение 4 в 1-пиперазинильной группы соединения(1) демонстрируют одинаковую или более высокую антибактериальную активность, чем соединения изобретения, как показано в табл.1 и 2, однако имеет очень высокую токсичность. , П р и м е р Е (подострая токсичность). Соединение 1 перорально вводят шести МЕЛшам-самкйм (TCL-ICR линии), имеющим средний вес в 20 г, в количестве 2 г/кг за один раз в один из 14 дней. В течение испыта- . тельного периода производят взвешивание каждой из мышей. На 15-й день проводят гематологическое исследование. Полле гематологического исследования мыши были умерщвлены, проводят взвешивание каждого из органов, а также гистопатологическое наблюдение . Получают следующие результаты. Не наблюдалась ненормальность в группе мышей, которой вводили соединение 1, на основе веса тела и органов , гематологического исследования и гистопатологического наблюдения по сравнению с контрольной группой мышей. Это демонстрирует высокую безопасность соединения 1. П р и м е р I- (уровень . п плазме Двум кобелям Бигл, весящим по 12 кг каждый, перорально вводят капсулы, содержащие один из соединений 1 и 2 в дозе по 25 мг/кг веса каждой соба ке с 200 мл молока, соответственно. Образцы крови берут из вены каждой собак через О ,5 ,1,2., 3 ,6, 8 и 10 ч после введения, и центрифугированием каждого образца отделяли плазму. Уровень препарата в крови определяют тонкослойной пластинчатой хроматографией с использованием Kscher chia coli Кр. в качестве индикатора Полученные при этом результаты показаны в табл.6. Из результатов табл.6 видно, что соединения 1 и 2 хорошо абсорбируютс организмом при пероральном введении и уровень препарата в плазме сохраняется на высоком уровне в течение довольно долгого времени. В частности, соединение 1 демонст рирует более высокий уровень в плазме, чем значения МИК (см. табл.2), против большинства бактерий во время от1 до 10 ч после введения. Соединение 2 демонстрирует тот же уровень в плазме за время по крайней мере за 2 ч и даже более высокий уровень через 10 ч после введения. Так, например, уровень соединения 1 в плазме (5,9 мг/мп) в 8 раз превышает значения МИК против Pseudomonas aeru inosa 12 и Staptylococcus aureus № 507704, и в 60 раз превышает значение МИК против Escherichia coli Р-5101. Соединения 1 и 2 демонстрируют довольно высокий уровень в плазме и образом, высокая антибактериал ная активность препарата наблюдается при низких дозах при лечении общей инфекции, вызываемой различными бактериями. Приме р С (выделение с мочой) Мочевыделения собак, использованных в примере F, собирают в течение 24 ч, и соединения 1 и 2 в моче определяют аналогично примеру F. Полученные результаты приведены в табл.7, .
Пример Соединение
Пропиловый эфир соединения общей формулы (1
Бутиловый эфир соединения общей форму.лы (I)
:i:::::: :: :
Т.пл.,
-CjHy-CHgCHjCHj 133-135
-CjHj-СН2(СН2)2СН 119-120 Из результатов табл.7 следует, что выделения соединений 1 и 2 с мочой довольно хорошие, и составляют около 30-40% от препарата., введенногс перорально, за время 24 ч, уровень препаратов 1 и 2 (326-205 мг/мл) в моче превьдцает от 13 до 6000 раз значения МИК (0,1-25 мг/мл) различных бактерий, как показано в табл.2; соответственно, соединения 1 и 2 демонстрируют более высокую эффективность при низших дозах при лечении инфекции мочевых путей, вызываемой различными бактериями. Как следует из табл.1-7 предлагаемые соединения особенно соединения 1,1и 2, демонстрируют высокую терапевтическую эффективность при сильнькс заражениях грам-положительными и грам-отрицательными бактериями и после перорального введения они сохрайяют высокий уровень в плазме и моче на протяжении зна чительно длительного времени. Более того, они низкотоксичны. Соответсзгвеннсэ, эти соединения эффективны при-НИЗКИХ д6зах при лечении инфекции мочевых путей-и общей ин.фекции, вызываемых различными бактериями. В противоположность этому, известные соединения А и С уступают в антибактериальной активности in vitro и in vivo против грам-положительных и грам-отрицательных бактерий, как показано в табл.2 и 3. Налидиновая nalidixic acidJкиcлoта - соединение Е и пипемидиновая PipcmidicJ кислота - соединение F, которые представляют собой промышленно доступные синтетические антибактериальные препараты, и кариндацилЛИН Cajrindaciriin - соединение G, ампициллин ampleill in) - соедине-ние Н и сефалексин fCephalexinJ соединение Э, которые представляют собой промышленно доступные антибиотики, уступают соединением 1,1 и 2 в терапевтическом эффекте (см. табл.3 in vivo против грам-положительных бактерий и, в частности Pseudomanas aeruginosa) . Таблица 1
Продолжение табл,2
Способ получения производных 1,8-нафтиридина общей сооКг N К I где X представляет собой атом фтора или хлора; R - этил или винил; R - атом водорода или низший алкил, или их фармацевтически.пригодных солей, отличающийся тем, что соединения общей формулы . со I где У - атом галогена, низший алкоксил, низшая алкилтио-, низший алкилсульфинил, низший алкилсульфонкл, низсо шая алкилсульфонилокси- или арилсульфонилокси группа; X, R К имек т указанные значения, 00 4: подвергают взаимодействию с пипе- разином в присутствии инертного раствооителя при 20-150 С, с последующим выделением целевого продУ та в свободном состоянии или в , риде солей.
StaphylococcUs
Proteus Morganii
Enterobacter
cloacal
P-2540
1,56
Продолжение табл.2,
3,13 2QQ
200
Pseudomonas.aerugino«Значение ED«, рассчитывается в соответствий с методом .реренс-Каербер Arcli. Екр. Paih. Plarm 162,480(.19311 Црассчнтано для свободной карбоновой кислоты.
Продолжение табл.2
Та-бдицаЗ
25
Способ введения
Соединение
1
1
2
3
4
В
С
D
Е
F
G
Н
F
{Значения, рассчитаыые для карбоновой
КИСЛОТЫ,
26
1037841
Таблица
ED , мг/кг 2,4 Перорально 0,56
То же 11 16,1
таблица 5
.« -««-«i -- 1
Т EDjo мг/кг
Более 4000
4000 4000 2000 2000 210
200Q 2000
1516
5000 4000 5ОДО
3000
Таблица
