Способ получения производных цефалоспорина или их солей и его вариант Советский патент 1984 года по МПК C07D501/06 A61K31/546 C07D501/36 

2.Спйсоб по П.1, о т л и ч а ющ и и с я тем, что реакцию проводят в присутствии основания.

3.Способ получения производных цефалоспорина общей формулы

A-CHCONH

J- NjSS -CH2-S-Het NH CO

CODE

R

де A - 4-оксифенил или 2-тиенил} R - радикал общей формулы

1

С

им Г Т

ч

де R - 3-пиридиламиногруппа,

незамещенная или замещенная аминосульфонилом, 12фурилметиламиногруппа, 2-имидазолилметиламино-. группа, незамещенная или замещенная метилом, 2-тиенилметиламиноРруппа, незамещенная или згилещенная аминосульфонилом, или 3-пиридилметиламиногруппа;

4-метил-5, б-диокс«1-1,2, 4т

триазин-3-ил, 1-винилтетразол-5-ил или группа формулы

1 И

(Щ)

где R - гидроксил, амкно, димвтиламино, ацетиламинО, аминокарбонил, аминокар

бониламино, аминосульфонил, аминосульфониламино, оксисульфониламино, метилсульфонил или группа карбоновой или сульфокислоты п - 1 или 2, или группа

(СН2) этил;

Е - водород или защитная группа, например сложноэфирная,

или их солей, если Е - водород; отличающийся тем, что производное цефалоспорановой кислоты общей формулы

9

A-jHcoim

- СНг-5-Het

соои

в которой А и Het имеют указанные значения, .

или его соль подвергают взаимодойствию с производным пиримидина общей формулы

В

В

fi ®«Js C

I fl илит г

N-yirliyHB

RI

RI

где R имеет указанные значения;

В - группа-NCO или реакционноспособное производное группы NHCOOH, в среде растворителя с последунмцим, в случае необходимости, снятием защитной группы и выделением целевого продукта в свободном виде .или в виде соли.

4. Способ по п.3, отличающий с я тем, что реакцию проводя в присутствии основания..

1. Способ получения производных цефалоспорина общей формулы Н -pHCONH 4 А Д-Нх г СНг-Б-Ве со ОООЕ NH где А - 4-оксифенил или 2-тиенил; R - радикал обшей формулы .он Пг а или н-ув Rt RI где R - 3-пиридиламиногруппа, незамещенная или замещенная аминосульфонилом, 2-фурилметиламинОгруппа, 2 имидазолилметиламиногруппа, незамещенная или замещенная метилом, 2-тиенилметиламиногруппа, незамещенная или замещенная аминосульфонилом, или -пиридилметиламиногруппа; Het - 4-метил-5,6-диоксо-1,2,4триазин-3-ил, 1-винилтетразол-5-ил или группа формулы N-X II (I V I )X2 где Rj - гидроксил, амино, диметиламино, ацетиламино, аминокарбонил, аминокарбониламино, аминосульфонгил, аминосульфониламино, оксисульфониламино, метилсульфонил или группа карбоновой или сульфокислоты; п - 1 или 2, или группа СП (CH2)j,R 2 - этил; Е - водород ,или защитная группа например сложноэфирная, или их солей, если Е - водород, отличающийся тем, что производное 7-аминоцефалоспоранрвой кислоты общей формулы ЯоН. I S J Nj CHrS-Het СП О СООЕ ф в которой Het и Е имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с уреидоVI карбоновой кислотой общей формулы к-ад-со-йн-сн-соон А где А и R имеют указанные значения, или с ее солью, или реакционноспособным производным в среде растворителя с последующим, в случае необходимости, снятием защитной группы и выделением целевого продукта в. свободном виде или в виде соли.

1

Изобретение относится к способам получения новых производных цефалоспорина, облсщающих антибиотической активностью, в частности к способу, получения производных цефалоспорина общей формулы

А-СНСОШ

«

ш

-OHf-S-Het

уо 500Е (1)

ЯП

где А - 4-оксифенил или 2-тиенилг К - ргщикал формулы

(

R,

R 3-пиридиламиногруппа, незамещенная или замещенная гиюносульфонилом, 2-фурилметиламиногруппа, 2-имидазолилметиламиногруппа, незамещенная или замещенная метилом, 2-тиенилметиламиногруппа, незамещенная или замещенная аминосульфонилом, или 3-пиридилметиламиногруппа;5

et - 4-метил-5,6-диоксо-1,2,4триазин-3-ил, 1-винилтетразол-5-ил или группа формулы

к-я «

««

Л И II

V .

Чга,1,, . 15

где R2 - гидроксил, амино, диметйламино, ацетиламино, аминокарбонил, аминокарбониламино, аминосульфонил, аминосульфониламино, оксисульфониламино, метилсульфонил или группа карбоновой или сульфокислоты; п - 1 или 2, или группа

CH2)f,R 2 означает этил; Б - водород или защитная групп

например сложнозфирная, или их солей, если Е - водород, а также к его варианту.

Известен способ получения обладающих активностью антибиотика 7-ациламидопроизводных цефалоспо рина, зaкJпoчaющийcя в том, что соответствующее 7-аминопроизводное цефалоспорииа подвергают соответствующему ацилированию ij.

Целью изобретения является получение новых производных цефалоспорииа, обладающих высокой антибиотичес кой активностью.

Поставленная цель достигается способом получения производных цефалоспорина общей формулы I, заключающимся в том, что производное 7-аминоцефалоспорановой кислоты общей формулы

Hj

Т J

СНг-S-Hel (Ш,

&

где Het и Е имеют указанные значени подвергают взаимодействию с уреидокарбоновой кислотой общей формулы

.

л-ян-со нн-сн-соон А ШО,

где А и R имеют указанные значения, или с ее солью, или реакциониоспособным производным в среде растворителя с последующим, в случае реобходимости, снятием защитной группы и выделением, целевого продукта в свободном виде или в виде соли.

Реакцию можно проводить в присутствии основания.

Поставленная цель достигается также вариантом способа получения производных цефалоспорина общей фомулы I, заключающимся в том, что производное цефалоспориновой кислоты общей формулы

У1улы

а- всо1ш

J-Sv OHj-SШ2

Het

1Г СООЙ 1 М),

в которой А и Het имеют указанные значения,

.или его соль, подвергают взаимодействию с производным пиримидина общей формулы

хроматографии на силикагелевОЙ колонке (метиленхлорид:метанол 4:1). Выход эфира 3,46 г (65,5%).,

Полученный таким образом продукт суспендируют в малом количестве метиленхлорида и при охлаждении льдом в течение 30 мин размешивают с 2 мл анизола и 10 мл трифторуксусной кислоты, причем образуется раствор. Затем добавляют двг1жды 50 мл толуола и сгущают досуха в вакууме. Разбавляют эфиром и отсасывают. .

Для получения натриевой соли продукт растворяют в мгшом количестве диметилформс1мида, добавляют рассчитанное количество этилгексаноата натрия в метаноле и разбав.ляют эфиром. Осажденный продукт от-Н-СНгО- ОгННгИ IJj но - Э Ц1-к-сНг -TV 8 Н 5Ho-fJr -mcsf .П p и M e p 6. Натриевая соль 7-{о-о(. (2-(5-аминосульфонил)-2 -тиенилметиламино)-4-окси-5-пиримидинил)-уреидо -П-оксифенилацетамидо 3- (1-(2-аминоэтил)-тетразол-5-ил)чиометил }-цеф-3-ем-4-карбоновой кислоты.

Получение проводят аналогично примеру 1;исходя из указанной уреидокарбоновой кислоты и эявимолекусасывсцот, тщательно промывают эфиром и сушат в вакууме.

Выход натриевой соли (в пересчете на используемое производное цефалоспорина) 2,71 г (61.%). ИК-спектр: 1760, 1655, 1615, 1550 CMbv

Спектр ЯМР (ДМСО + ) сигналы при ч./мпн.: 3,55(т,2Н), 3,75 (т,2Н), .,6(ih,2+2+2H), 4,90(d, 0 IH), 5,45(8,IH), 5,65(d,lH), 6,75 (d,2H), 7,0(d,lH), 7,25(d,2H), 7,40{d,lH), 8,15(s,lH).

Аналогично примеру 1 синтезируют натриевые соли цефалоспорина общей 5 .ФОРМУЛЫ I, где R - радикал формуои

лы; 1Г Л -приведенные в табл.1. К . KI

Таблица 1 I СН.СО СНгСН

лярного количества дифенилметилового эфира (1-(2-бу, токсикарбонил§1миноэтил) -тетразол-5-ил)-тиометил -цеф-3-ем-4-карбоновой кислоты, выход после отщепления защитных групп и получения натриевой соли 43,5%J

ИК-спектр: 1760, 1675, 1600 см-. Спектр ЯМР (ДМСО + CDiOD) сигна,лы при ч./млн: 3,15(m,2Hj, 3,55(m, 3,55(in,2H), 4,30(m,4H), 60 4,95(а,1Н), 5,35-5,90(in, 55 4Н), 6,65-7,0(m,4H), 7,25(d,2H), 7,40(d,lH), 55 8,15(s,lH). 3,0{m,2H), 3,55(m,2H), 4,25(m,4fi), 5,0(d,lH), 5,45(S,1H), 5,65(d,lH), 6,75(d,2H), 6,95(d,lH), 7,25{d,2H), 7,40(d,lH), 8,10(s,lH), 3,55(m,2H), 3,80(ra,2H), 4,2-4,6(ni,6H), 4,95(dd,lH), 5,55(dd,lH), 5,75(8,шир., IH), 7,0(m,4H), 7,,5.; (in,2H), 8,15(s,lH). 3,60(m,2H), 4,70(m,4H), 4,95(d,lH), 5,30-5,90 (m,4H), 6,75(d,2H), 7,30 (m,3H), 7,7(m,lHyjr j8,l (s,lH), 8,5(m,2H). 2Н), 4,35(m,6H), (d,lH), 5,55 (S,1H) 5,70(d,lH), 6,75(d,2H), 7,05(d,2H), 7,25(d,2H), 7,4(d,lH), 8,15(s,lH). П p и M e p 7. Натриевая соль 7-{D-d- 3-(4-ОКСИ-2-(4-метил-2 -ими да 3 олилме тилами но)-5-пиримидинил)-уреидоЛ-л-оксифенилацетамидо J-3- . -(1-(2-ацетиламиноэтнл)-тетразол-5 )-тиометил -цеф-3-ем-4-карбоновой кислоты. В раствор 830 мг (0,002 моль) D-c( (4-ОКСИ-2- (4 -метил-2 -имида эолилметиламино)-5-пиримидинил)уревдо -п-оксифенилуксусной кислоты в 20 мл сухого диметилформамида добавляют 0,2 г N-метилморфолина. Рас вор охлаждают до и при этой температуре добавляют по каплям раствор 0,22 г этилового эфира хлормуравьиной кислоты в 5 мл метиленхлррида. Полученную смеЬь выдерживают при этой температуре 45 мин. Затем при добавляют по каплям раствор 1,12 г (0,002 мол дафенилметилового эфира 7-амино-З-(1-(2 -ацетиламиноэтилтетразол-5Ч1л)-тиометил}-цеф-3-ем-4-карбоновой кислоты в 20 мл сухого метиленхлорида. Размешивают в течение одного часа при -10°С и затем медленно доводят до комнатной температуры. Рас вор сгущают досуха в вакууме и затем обрабатывают, как описано в при .мере 1. Отщепление защитной эфирной группы проводят также аналогично примеру 1. Выход натриевой соли 900 мг (54%). ИК-спектр: 1760, 1650, 1610, ,1550 см. Спектр ЯМР (ДМСО + ) сигнаПЫ при ч./млн: l,85(s,3H), 2,l(s, ЗН), 3,6(m,2+2H), 4,2-4,5(m,2-i-2-l-2H) 5,05(d,lH), 5,45(s,lH), 5,65(d,lH), 6,75(m,2+lH), 7,25(d,2H), 8,10(s,lH 11 -ЯНСНГ; I сВгСЯ нисотш Пример 8. 7-{D-4)C-f3-(2-(5аминосульфЬнил-2-тиенилметиламино)4-ОКСИ-5-ПИРИМИДИНИЛ)-уреидо -n-ок-. сифенилацетамидо} -3- fl -оксисульфонилметилтетразол-5-ил)-тиoмeтилJ -цеф-З-ем-4-карбоновая кислота. Путем взаимодействия 495 мг (0,001 моль) уреидокарбоновой кислоту, используемой в примере 1, с N-метилморфолином и этиловым эфиром хлормуравьиной кислоты аналогично примеру 7 получают активированный ангидрид. К суспензии 410 мг (0,001 моль) 7-амино-З- (1-оксисульфонилметилтетразол-5-ил)-тиометилJцеф-З-ем-4-карбоновой кислоты в 20 мл безводного ацетонитрила добавляют 600 мг N,0-5ЙС-триметилсилилацетамида, получая при этом раствор. Этот раствор охлаждают до и при комнатной температуре добавляют каплями к раствору активированного ангидрида. Затем смесь размешивают в течение 1 ч при -10°С и в течение 1 ч при 10°С. Затем добавляют 2 мл метанола и отфильтровывают нерастворимое вещество, после чего растворитель удаляют в вакууме. Остаток вводят в 40 мл вода и добавляют до значения рН 7,0. При этом значении рН два раза встряхивают с уксусным эфиром. При охлаждении льдом водную фазу разбавленной соляной кислотой доводят до рН 2,9. Осажденный продукт отсасывают,промывают водой и сушат в вакууме.Выход 445мг (57%). ИК-спектр: 1760, 1660, 1600 см. Спектр ЯМР (ДМСО + CD,OD) сигналы при ч./млн: 3,60(т,2Н), 4,254,45(т,4Н), 5,0(in,3H), 5,55(s,lH), 5,70(d,lH), 6,75(d,2H), 7,0(d,lH), 7,25(d,2H), 7,45(d,lH), 8,15(s,lH). Амёшогично приведенным примерам I синтезируют цефалоспорины общей формулы I, сведенные в табл.2. (d,lH), 6,3(m,2H), 6,75(d,2H), 7,25(d,2H), 7,45(s,lH), 8,l(s,lH). 3,55(m,2H), 3,8(m,2H), 4,2-4,5(m,6H), 4,95(d, IH), 5,40(s,lH), 5,6 (d,lH), 6,75(d,2H), 7,25(m,3H), 7,65(m,lH), 8,l(s,lH), 8,45(n,2H). у 1 -1ШСН2Лен ,-.К. Cffj О- . Н 13 -НО- --ВНSOjHHj14 -но-Ч н П p и M e p 15. Натриевая соль 7- {D-ci- 3- (2- (5 -аминосульфонил-2 -тиенилметиламино)-4-окси-5-пиримидинил)-уреидо J-П-оксифенилацетамидо 3- С(1-(2 -диметиламиноэтил)-тетразол-5-ил)-тиометил1-цеф-3-ем-4-карбоновой кислоты. Из 2,72 г (0,005 моль) D-oi-t3- 2- (5 -аминосульфонил-2 -тивнилмеаи амино)-4-ОКСИ-5-ПИРИМИДИЛ)-уреидо -П-оксифенилуксусной кислоты и 1,36 7-аминоцефалоспорановОй кислоты получают аналогично примеру 8 2,08 г (57%) 7-{о-оС- 3-(5-аминосульфонил- 2 -тиенилметилс1мино) -4-окси-5-пиримидинил)-уреидоJ-n-oкcифeнилaцeтaмидo}-3-aцeтoкcимeтилцeф-3-eм-4-карбоновой кислоты. 500 мг этого цёфалоспорина в 20 мл буферного раствора фосфорной кислоты с рН 6,3 совместно с 200 м 1-(2 -диметиламиноэтил)-5-меркапто тетразола нагревают до 70 С в течение 6 ч в атмосфере азота, причем значение рН держат между 6 и 6,5. Затем реакционную жидкость охлаждают, нерастворимле вещества отфильтровывают и два раза встр хивают с этиловым эфиром уксусной кислоты. Затем при охлаждении доПродолжение табл. 2 CH Ч 2,l(s,3H), 2,5{m,2H), 3,60(m,2H), 4,3(m,6H), 5,0(d,lH), 5,40(s,lH), GH COHRz 1600: 5,60(d,lH), 6,75(m/3H), . 7,25{a,2H), 8,05{s,lH) у l,0(t,3H), 2,05(s,3H), 3,55(in,2H), 4,3(m,6H), 4,90(d,lH), 5,40(s,lH), 5,65(d,lH), 6,7-6,9(m, CgHs 2-HH), 7,25(d,2H), 8,10(s,lH) Дг1760 3,5(m,2H), 4,3(rt,6H), 4,95(d,lH),5,45(s,lH), I1660 5,65(d,lH), 6,75(d,2H), CHfCHjpH 7,25(d,2H), 7,4(m,lH), 8,05(s,lH), 8,2(m,2H)., 3,65(in,2H), t,3-4,&(m,4H), 4,95(d,lH), 5,45(a,lH), 5,65(d,lH), 6,75{d,2H), 7,25(d,2H), 7,4(in,lH), CHjCONH. 8,05 (s,lH), 8,2(in,2H) бавляют соляную кислоту до рИ 2,8. Осажденный продукт отсасывают, прокывают водой и сушат Остаток переводят в натриевую соль. Выход 64%. ИК-спектр: 1760, 1660, 1600 см. Спектр ЯМР (ДМСО + ) сигналы при ч./млн: 2,35(s,6H), 2,80 (m,2H) , 3,60(in,2H), 4,30 (m,6H), 4,95(d,lH), (), 5,65(d,lH), 6,75(d,2H)., 7,05(), 7,30(d,2H), 7,45(d,lH), 8,15(s,lH). Пример. 16. Натриевая соль .- 3- (2-(5-аминосульфонил-2 тиенилметиламино)-4-окси-5-пиримидинил) -уреидоД -ft -оксифенилацетамидо -3- (1-метил-5,6-диоксо-1,3,4триазин-2-ил)-тиометил}-цеф-3-ем-4карбрновой кислоты. Синтез проводят аналогично примеру 15, исходя из указанного производного цефгшоспорина и 4-кютил2-меркапто-5,6-диоксо-1,3,4-триазина. Спектр ЯМР (ДМСО + CDjOD) сигналы при ч./мли.: 3,55(т,2Н +S,3H), 4,35(in,4H), 4,90(d,l), 5,50(s,lH), 5,65(d,lH), 6,75(d,2H), 7,05(d,lH), 7,25(d,2H),. 7,,lH), 8,15(s,lH). Аналогично примеру 15 получают соединения общей формулы I, указанные в табл.3.

Таблица 3

Антибиотическая активность новых производных цефалоспорина.

Опыт in vitro.

Исследуемые соединения применяют в следующих концентрациях: 128; 64; 32; 16; 8; 4; 2; 1; 0,5; 0,25; 0,12 0,06 мкг/мл. Используется питательная среда следующего состава; Юг пептона 8 г мясного экстракта-оксоида, 3 г хлорида натрия, 2 г втор.-фосфата натрия и доЮО мл дистиллированной воды (рН среды 7,2-7,4). Возраст первичных культур составляет приблизительно 20 ч. Установление суспензии зародшоей осуществляют с помощью фотометра (диашетр пробирки составляет 14 мм, фильтр 546 нм) по помутнению,сравнительной суспензии сульфата бария, получаемой добавлением 3,0 мл 1.%-ного раствора хлорида бария к 97 мл 1%-иой серной кислоты. После установления тест-микробы раствором поваренной соли разбавляют дальше в соотношении 1:1500.

16 мг соответствующего соединения подают в мерную колбу емкЪстью 10 мл и растворителем дополняют до маркировки. Далее разбавляют.

дистиллированной водой или соот- , ветствующим растворителем. 0 В углубления в микротитровальных пластинках подают 0,2 мл питательной среды, 0,01 мл разбавленного соединения и 1 каплю (0,02 мл) суспензии зародышей и в течение 18 до 20 ч подвергают инкубации при З7с. Всегда проводят контроль с растворителем.

Тест-организмами являются: Staphy6ococcus aureus SG 511, Escherichia coEi ATCC 11775, Pseudomonas aejTuginosa Hamburgensis, Pseudomonas aeruginosa BC 19, Serratia marcescens АТСС 13880, Keebsieeea pneumoniae ATCC 10031, BC 6, Proteus, mirabi is BC 17, 5 Proteus rettgeri, Enterobacter cloacae ATCC 13047, E.coti R+TEM (носитель -лактамазы).

Натриевая соль 7 3-{D-ct- 3-(4окси-2-(з-пиридилметиламино)-50 пиримидинил)-уреидоТ-п-оксифёнилацетамидо -3- (1-(2-oкcиэтил)тeтpaзoл-5-ил)-тиoмeтилJ-цeф-3-eм4-кapбoнoвoй кислоты (соединение А).

Натриевая соль 7/5-{О-оЬ{3-(2-(5 5 аМИНОСулЬфОНИЛ-2 -ТМОНИПМРТИПЛМИ-тиенилметиламино)-4-окси-5-пиримидинил)-уреидо -п-оксифенилацетамидо }-3- Id (2 -окс этил) -тетразол-5-ил) -тиометил)3-цеф-З-ем-4-карбоновой кислоты (соединение Б) . , Натриевая соль 7,- О-о1- 3-(2-(5 -аминосульфонил-2 -тиеиилнетиламино) -4-окси-5- пиримидинил) -урёидо -п-оксифенилацетамидо 1-3-(1- ( нокарбонилэтил)-тетразол-5-ил) -тиометил1-цеф-3-ем-4-карбоновой . кислоты {соединение В).

8 4 4 8

0,12

1 1 1 0,5 0,06 0,12 0,25

ЦефуроВ

128 ксим

Острую токсичность определяют пероральным и подкожным применением соединений табл.5 на крысах повышаю димися дозами.

ЭДзд является дозой, после аппликации которой 50% животных в течение 8 дней умирают. Все соедине0,25

0,25 0,25 0,12 0,5 0,25 0,5 0,25

8

.128

Продолжение табл. 4

ния при оральной даче показывают ЭД 50 вьпие 4 г/кг, при подкожной даче выше 2 г/кг, т.е, они практически нетоксичны.

Активность соединений табл.5 также исследуют in vivo с помощью экспериментальных инфекций на ь«лНатриевая соль 7 -{D-oL-f 3-{2-(2урилметиламино)-4-окси-5-пиримидинил)-уреидоЗ-П-оксифенилацетамидо -З- (1-(2 -метилсульфонилэтил)тетразол-5-ил)-тиометил -цеф-З-ем -карбоновой кислоты (соединение Г). и торговый продукт цеф5Фоксим в качестве сравнения. В табл.4 указаны данные по минимальной концентрации торможения соединений (в мкг/мл) . Таблица 4 шах. В качестве патогенных бактерий используют E.co€l АТСС 11775. С помощью 0,2 мл суспензии бактерий (с 5% муцина) вызывают внутрибрюшинную инфекцию. Это соответствует приблизительно 1, бактерий Е.со{1/мыи1ь. Самки штамма NMRI подразделяют на группы из 10 животных кгмсдая, две группы остаются необработанными, самкам остгшьных групп подкожно дают различные дозы 10 соответствующего соединения для определения ЭДу, (доза, при которой 50% животных выживают) . ТераПИЮ осуществляют один раз через 60 мин после инъекции. 15 Период наблюдения в обоих случаях составляет 7 дней. Результаты этого опыта приведены в табл.5. Таблица 5 ЭДу мг/кг оединение 0,9 gQ 4 В0,7 ефуроксим 100 ...