Способ получения @ -циклоцитидин- @ -монофосфата и его производных Советский патент 1993 года по МПК C07H19/10 

Предлагается усовершенствованный способ получения 0,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата, 3 -О-ацетил0 2 -циклоцитидин-5 -монофосфата и 0,2 -циклоцитидин-5 -0-метилмрнофосфата. обладающих высокой биологической актийностыо, кото рые могут найти применение для лечения вирусных инфекций, злокачественных новообразований и лейкозов, а также могут служить полупродуктами в синтезе новых лекарственн1з1х веществ.

Известен способ получения 0,2 -циклоцитидин-б -монофосфата, в котором цитидин-5 -монофосфат обрабатывают п-толуолсульфохлбрйдом в диоксине в присутствии щелочи. Из образу|бщейся смеси Семи продуктов колоночной хроматографией на угле и последующей рехроматографией на ионообменной смоле выделяют 0,2 -цйклоциТидин-5 -монофосфат с выходом 33%.

Известен также способ получения 0,2 -циклоцитидин-5 -монофЬсфата, заключающийся в том, что на цйтидин-5-монофосфат действуют при нагревании смесью хлорокиси фосфора, воды{или спирта)и этилацетата и после двух колоночныххроматографий на активированном угле и анионообменной смоле выделяют О ,2 циклоцитидин-5 -монофосфат с выходом 68,8%.

Описан также способ получения О ,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата фосфорилированием 0,2 -циклоЦитидина или его 3 -0-ацетата хлорокисьЮ фосфора в триметилфосфате. Выход продукта составляет 28 и 76% соответственно.

Недостатками данных способов являются низкий выход целевого продукта сложность его выделения.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому эффeкty из описанных способов получения 0,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата и его производных является способ, заключающийся в той, что цитидин-5 -монофосфат обрабатывают хлорангидридом ацетилсалициловой кислоты (ХААСК) в ацетонитриле, образующуюся при этом смесь 0,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата и его 3 -0-ацетата разделяют с помощью ионообменной хроматографии и выделяют продукты с выходом 60 и 25% соответственно. Обработкой О ,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата диазометаном получают метиловый зфир 0,2 -циклоцитидии-5 -монофосфата с выходом 86% на данной стадии, что составляет 51,6% в расчете на исходный цитидин-5-монофосфат.

Указанный способ поясняется следумэщей схемой:

NH

9.

но

но . гАсО

t)

О . меО-Р-0но

Основным недостатком-известно го способа являetcя больЩая продолжительность протекаМия реакции, что обусловлено гетерогенным характером системы. Даже в небольших количествах реакция цитидин-5 -монрфосфата с ХААСК протекает 3-4 дня Это обстоятельство делает невозможным исг|оль:зованиём данного способа для наработок 0,2 -циклЬцитидин-5 -монофосфата и его производных в количествах, исчисляемых в граммах, необходимых для проведения углубленных биологических испытаний. Кроме того, в качестве исходного соединения в cпbcoбe-пpotoтипe используется цитидин-5 -монофосфат, который является .дорогостоящим и труднодоступным продуктом (в СССР не произ:водится). Так как при взаимодейстЁии цитидйн-5 -монофосфата с ХААСК образуются два продукта, то возникает необходимость их хроматографического разделения, в процессе которого происходит частичное, дезацетилирование 5 3 -О ацетата О ,2 -циклоцйтидин-5 -монофосфата, что сильно затрудняет разделение смеси и понижает его выход до 25%.

При получении метилового эфира О ,2 -циклоциТйдин-5 -монофосфата из 0,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата используется диазометан, являющийся исключительно ядовитым и мутагенным соединением.

Целью прёд/1агаемого изобретения является сокращение процесса и повышение его технологичности.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения 0,2 -циклоцитидин-5-монофосфата и его производных общей формулы:

NH NA.

V Q

О

Й О-Р-О , НО

OR

где (la); R-Ac, Ri-H (16); R-H, Ri-Me(lB), R-H,Ri-Me(lB). заключающийся в том, что цитидин последовательно обрабатыеают смесью хлорокиси фосфора и триметилфосфата при Температуре 0-(4)°G и хлорангйдридом ацетилсалициловой киелот 1 в присутствии ацётонйтрила. образующееся при этом ацетильное произврдное О ,2 -циклоцйтидин-5 -дихлорфосфата переводят в целе вой продукт la кипячением в воде, в целевой продукт 16 - обработкой ледяйой водой или в целевой продукт 1 в -К рбработкой абсолютным метиловым спиртом с последующим выделением Целевых продуктов известными методами. Выходы О .2 -цик лоцитидин-5 -монофосфата. 3 -0-ацетил0,2 -циклоциТидин-5 -монофосфата и метилового эфира 0,2 циклоцитидин-5 монрфосфата в расчете на цитидин составляют 49,2,57.1 и 46.7% соотйетственио. Данный способ поясняется обобщейной схемой уравнений реакций: « ,/ Существенными отличиями описываемото способа являются использование иного исходного сырья - цитидииа последующая его обработка, описанная выше, с получением нового промежуточного продукта - ацетильного производного 0,2 -циклоцитидин-5 -дихлорфосфата, из которого получают целевые продукты путем перечисленных выше индивидуальных обработок. П р им ер 1. ПолучениеО |2 -циклоци тидин-5-монофосфата, GMecb 2,0 г (8,2 ммоль) цитидина, 1,6 мл (17,4 ммоль) хлорокиси фосфора и 6,5 мл (55,7 ммоль) триметилового эфира фосфорной кислоты перемешивают при в течение 1 ч, добавляют 3,9 г (19.6 ммоль) хлорангидрида ацетилсалициловой киелоты, 2 мл ацетонитрила, перемешивают раствор при температуре 1,5 ч /и добавляют его при перемешивйнии в 300;мл сухого эфира. Эфир декантируют, осййОк перемешивают со. свежей порцией эфира (100 Мл) и эфирснОва декантируют; Остаток обрабатывают 20 г смеси лед/вода и поСле таяния льда нагревают раствор на водяной бане при в течение 1 ч. Раствор охлаждают до комнатной температуры и хроматографируют на колонке (250 CMJ с анионообменной смолой Дауэкс 1x2 (ОАс). элюируя продукты водой (400 мл) со скоростью 2-3 мл/мин. Фракции, содержащие продукт, собирают и упаривают досуха. Остаток переосаждают из водного (3 мл) раствора смесью спирт:эфио 1:1 (400 мл). Получают 1.38 г (49,2%) О .2 -Циклоцитидин-5 -монофосфата в виде дигидрата, т.пл. 233-235°С. УФ. : 233(9000). 263(10200), Прим е р2. Получение 3 -О-ацетил-0,2 -циклоцитидин-5 -монофосфата. Смесь 3 г (12,3 ммоль) цитидина, 2,4 мл (26,1 ммоль) хлорокиси фосфора и 10,5 м (90,0 ммоль) триметилового эфира фосфорной кислоты перемешивают при 0-4°С в течение 1 ч, добавляют 5.2 г (26,2 ммоль) хлорангидрида ацетилсалициловой кислоты, 3 мл ацетонитрила; перемешивают раствор при температуре 20-25°С в течение 1,5 ч и добавляют его при перемешивании в 450 мл сухого эфира. Эфир декантируют, осадок перемешивают со свежей порцией эфира (100 мл) и эфир еще;раз декантируют. Остаток обрабатывают смесью лед/вОда (30 г) и после таяния льда раствор сразу же хроматографируют на колонке (250 см j с анионообменной смрлой Дауэкс 1x2 (ОАс), элюируя продукты водой (400 мл) со скоростью 2-3 мл/мин. Фракции, содержащие продукт, собирают и упаривают досуха. Остаток переосаждают из воднОго (5 мл).раствора со смесью спиргэфир 1:1 (500 мл). Получают 2,7 г (57,1%) 3 -О-ацетил-0,2 циклоцитидйн-5 -монофосфата в виде дигидрата, т.пл. 225-227°С. УФ. .; 233 (9500), 263 (10800). Все физико-химические характеристики получаемых соединений соответствуют литературным данным. Примерз. Получение метилового эфира О ;2-циклоцитидин-5-монофосфата. Смесь 3 г (12,3ммоль) цитидина, 2,4 мл (26,1 ммоль) хлорокиси фосфора и 10,5 мл (90,0 Ммоль) триметилового эфира фосфорной кислоты перемешивают при в течение 1.5 ч,-добавляют 5,2 г (26,2 ммоль) хлорангидрида ацетилсалициловой кислоты, 3 мл ацетонитрила, перемешивают раствор при температуре 20-25°С в течение 1,5 ч и добавляют его при перемешивании в 450 мл сухого эфира. Эфир декантируют, осадок перемешивают со свежей порцией эфира (100 мл) и эфир еще раз декантируют. Остаток обрабатывают 7.5 мл абсолютного метилового спирта и выдерживают егО приО-4°С Бтё 1ение 1,5 ч. Раствор разбавляют 22,5 мл