Способ получения биомассы базидиомицетов Советский патент 1984 года по МПК C12N1/00 C12R1/645 

Изобретение относится к микробиологической промьпшенности и касается культивирования базидиомицетов, которые могут быть использованы в каче стве основного материала для медицин ских препаратов. Известен способ получения биомассы базидиомицетов, в частности Schizophyfium или Zenntinus путем культи вирования мицелия в питательной сред в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях 1J . Однако известный способ не обеспе чивает высокого выхоДа целевого .продукта. Цель изобретения - повьшение выхода целевого продукта. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения биомассы базидиомицетов путем культивирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углеро да в аэробных глубинных условиях, мицелий базидиомицетов, принадлежащи к виду CorioJus, предварительно гомо генизируют до получения однородного пшамма и ползгченный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу. Кроме того, мицелий гомогенизирую до образования комков размером 50 1000 мкм. Гомогенат вносят в питательную среду.в количестве 0,05-0,15 г/л. Способ осуществляют следующим образом. Посевная культура состоит из нитевидного мицелия (зернистый или в форме комков (гранул), образуя нргомогенную смесь). Для гомогенизации посевной куль-: туры гранулы разделяют. Получают шлам, в котором мицелий диспергирован равномерно. Мицелий гомогенизируют до тех пор, пока размер комков находится в пределах 50 - 1000 мк. Гомогенизацию посевной культуры проводят с помощью известных средств, например гомогенизатора, гомосмесителя, дисперсионного смесителя, соковыжималки или винтового смесителя. Время, необходимое для образования шпамма посевной культуры с помощью гомогенизирующих средств, составляет от 30 с до 10 мин.сли для измельчения комков мицелия до 2-3 ;Или 10-50 мк приложены чрезмерные Iусилия,сказывается неблагоприят ный эффект на развитие грибков при последующей культивации. Количество мицелия, применяемого для заряжения среды, для культивирования обычно составляет 0,01-0,2 г/л предпочтительно 0,05-0,15 г/л среды. Среда, применяемая для культивирования базидиомицетов, является водной средой и к ней не предъявляют никаких специальных требований, условия культ1|ва1д1и в отношении температуры, скорость аэрации и скорость перемешивания обычные. Пример 1. 120 л среды (рН 6,5) следующего состава, г/л воды: . Декстроза50 Дрожжевой экстракт 7,5 загружают в бродильньй чан емкостью 200 л и подвергают стерилизаци под давлением при ПОс по обычному методу. Затем мицелий Coriolus ver sicotor (Fr) Que2,культивированный в сосуде емкостью 30 л, гомогенизируют в гомосмесителе до тех пор, пока гранулы станут неразличимыми невооруженным глазом. Гомогенизированным мицелием заражают среду в бродильном чане емкостью 200 л и затем культивируют в течение 150 ч при 25с, скорости аэрирования 0,5 об./об. в мин, и скорости перемешивания 250 об/мин. Мицелий отделяют, промьгаают водой, этиловым спиртом и высушивают при . Полученные результаты показаны в табл. 1. Таблица 1

Продолжение табл. 1

- 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ БАЗВДИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде,в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевогопродукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Coridlus, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу. , . 2.Способ по П.1, отличающийся тем, что мицелии гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм. 3.Способ по п.2, отличают щ и и с я тем, что, гомогенат вносят, (Л в питательную среду в количестве с 0,05-0,15 г/л среды.

Таким образом, при одинаковом выходе мицелия для осуществления предлагаемого способа необходимо всего 1/10 ч. посевной культуры, используемой по известному способу. Культивацию осуществляют с применением посев ной культуры, гомогенизированной согласно предлагаемому спосрбу и с негомогенизированной культурой. Срав нивают время, требуемое для получени выхода мицелия 11 г/л. Посевную культуру, аналогичную примеру 1, гомогенизируют по примеру 1. Зараженную среду подвергают культивации. Для сравнения посевную куль туру не гомогенизируют. Результаты показали, что в случае применения гомогенизированной посевной культуры время, требуемое для достижения выхода мицелия 11 г/л значительно коро че при меньшем количестве посевной культуры. Пример З.В ферментер емкостью 200 л помещают 120 л культу- . ральной среды (рН 6,5)имеющей еле-, дующий состав, г/л воды: Декстроза50 Дрожжевой экстракт 7,5 Среду стерилизуют обычным образом под давлением при 120 С. Затем мицелий Coriolus versicolor (Fr) Quel, предварительно выращенный в банкообразных ферментерах емкостью 30 л, гомогенизируют Гомогенизатором-смеси до тех пор, пока гранулы мицелия станут неразличимыми для невооруженного глаза. Такой гомогенизированный мицелий просеивают в фермен тер емкостью 200 л при соответствующих количествах инокулята,выращивают в течение 150 ч при 25 С,скорос ти аэрации 60 л/мин и скорости перемешивания 250 об/мин. Разросшийся ми целий отделяют от полученной культуры, промывают водой, этанолом и ацетоном в указанном порядке, а затем сушат при . Результаты приведены в табл 2. Т а б л и ц а 2. Сравнительные данные по выходу мицелия в зависимости от концентрации посевного материала Примечание. Комки мицелия счезали во всех опытах. Пример 4. Мицалий базидиомицетов гомогенизируют в течение 7 мин о тех пор, пока размер комков мицеия не достигнет 100-1000 мкм, и инокулируют в питательную среду. Культивируют при , скорости эрации 0,5 об./об. питательной среды мин и скорости перемешивания 250 об/мин в течение 150 ч. Выросий мицелий вьщеляют из среды, проывают водой, этиловым спиртом и ацеоном и затем сушат при 80 С. Результаты представлены в табл. 3. 5 . Сравнительные данные по гомогенизированного и 1090261ft выходу биомассы при использовании негомогенизированногс мицелия Т a б л и ц a 3