Способ количественного определения сапонина в воде Советский патент 1984 года по МПК G01N31/08 

о ел

00 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения сапонина в водных растворах. Известен способ количественного определения сапонина в водных раство pax путем подки;сления анализируемой пробы соляной кислотой, кипячения, отделения горячего осадка фильтрованием, экстракции горячим метиловым спиртом н кипячения в присутствии концентрированной серной кислоты с последующим фотометрированием полученного раствора при длине волны 500 нм lj . Недостатком данного способа является малая селективность при определ нии содержания сапонина в концентрациях ниже 20 мг/л. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ кол чественного определения сапонина в сточных водах путем подкисления анал зируемой пробы соляной кислотой, кип чения, экстракции продуктов гидролиз ледяной уксусной кислотой цри 95-98 и кипячения в присутствии концентрир ванной серной кислоты с последуюЕцим фотометрированием раствора при длине волны 400 нм 2j, Недостатками известного способа являются большая продолжительность (более 6 ч) и малая селективность пр определении сапонина в концентрациях ниже 20 мг/л. Цель изобретения - сокращение про должительности и повышение селективности сггособа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количестве ного определения сапонину в воде пут подкисления анализируемой пробы соляной кислотой, кипячения и экстракции продуктов гидролиза органическим раст ворителем, в качестве органического растворителя используют хлороформ и полученный экстракт подвергают хромат графированию в тонком слое в системе метанол-вода при объемном соотношении (25-50):1 с последующим проявлением хроматограммы хлороформенным раствором треххлористой сурьмы. Пример 1, Определение сапонина в природной воде при содержании его вьппе 2,0 мг/л. Отбирают 100 мл воды, содержащей сапонин, помещают в колбу для гидролиза , прибавляют 20 мл концентрированной соляной кислоты и кипятят пробу с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения экстрагируют образовавшийся сапонин хлороформом (дважды пррциями по 15 мл). После отделения хлороформенный экстракт упаривают в фарфоровой чашке до объема менее 0,5 мл и наносят на пластинку силуфол размером 8x12 см с-помощью капилляра или микропипетки. После нанесения пластинку помещают в хроматографическую камеру с подвижным растворителем (метанол-вода 25:1). Когда подвижный растворитель дойдет до верхнего края пластинки, ее извлекают из камеры, высушивают до удаления паров растворителя и проявляют насыщенным раствором треххлористой сурьмы в хлороформе с последуЮ11(им экспонированием при 100-1 в течение 10 мин. В присутствии сапонина на пластинках появляется пятно серо-сиреневого цвета с величиной Rf 0,6. Пятно фотометрируют на денситометре ( Я 540 нм). Количественное определение выполняют по калибровочному графику. Пример 2. Определение сапоHifHa в природной воде при содержании его менее 2,0 мг/л. 1 л водь, содержащей сапонин, упаривают на кипящей водяной бане до объема 100 мл. Остаток помещают в колбу для гидролиза, прибавляют 20 мл концентрированной соляной кислвты и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. Затем пробу подвергают экстракции и хроматографическому анализу аналогично примеру 1. Чувствительность определения сапонина составляет 0,2 мг/л, что дает возможность производить анализ на уровне гигиенического норматива. Пример 3. Определение сапонина в производственных сточных водах предприятий сахарной промьшшенности. Так как сапонин в промстоках может находиться в значительных количествах, нет необходимости использовать объем пробы в 100 мл. Следует отметить, что при гидролизе больших концентраций сапонина в малых объемах воды образовавшаяся олеанолова кислота выпадает в осадок. Отбирают 10 MJJ сточной воды, помеают в пробирку с притертой пробкой, рибавляют 2 мл концентрированной соляной кислоты и выдерживают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. После охлаждения осадок образовав шегося продукта гидролиза отфильтровывают, промывают на фильтре дистиллированной водой и после выс,тпивания при 40-50 С осадок вместе с фильтром помещают в колбу с притертой пробкой и экстрагируют хлороформом (дважды по 10 мл). Образовавшаяся олеановая кислота переходит в растворитель. После концентрирования экстракта остаток наносят на силуфольную пластин ку и осуществляют хроматографирование в системе метанол-вода (50:1) и проявление насьпценным раствором треххлористой сурьмы в хлороформе в указанных выше условиях. Величина Rf пятна сапонина составляет 0,6. Пя но фотометрируют на денситометре ( А ЗАО им) . Количественное определение вьшолняют по калибровочному графику. Построение калибровочных графиков Для определения сапонина в природ ной воде. Готовят ряд стандартных растворов сапонина на дистиллированной воде с концентрацией 0,2; 0,5; 0,75 и 1,0 мг в пробе. 100 мл каждого раствора помещают в колбу и гидролизуют в среде 2н.соляной кислоты в те чение 1 ч. После охлаждения гидролизат экстрагируют хлороформом (дважды по 15 мл). Затем хлороформенный экстракт упаривают в фарфоровой чашк до небольшого объема и остаток наносят на силуфольную пластинку. После операции хроматографирования в систе ме метанол-вода(25:1) пластинку извлекают из камеры, высушивают на во духе до удаления паров растворителя и проявляют насыщенным раствором тре

Проверка метода определения сапонина з прирс дл --;:хлористой сурьмы Б хг.орогрор.-ге с последующим экспонироЕЯН1-гг;-т ари 1 10 С s течение 10 мин. Орсрап чп ь-ё пятка фотометриругот на дскгТ1то::;тре ( Д 540 им) . fleKcnToriT.-.:-:N-fl форму пика, высота котор-cL-o опрс-дсл.яетсч количеством вепгсствп г скрш-екном пятне. Калиброво чный гр;фт;к представляет собой зависимость п, пика от количества сапонина к пробе. В производстве :ньх сточньгх водах. Готовят стандартный .раствор сапонина .с концемтраипей г/л. Отбирают 0,5; 1,0; 2,0 li 3,С t-гл этого раствора f О S 10- п - т 1 О соответственV и, 3, I , ., 5 но), доводят ;JG ;::; дистнллировакно чодс ; .одпергЭО г -щролизу в кислой срс,;:; ; вге последуч1 Примеру J. ющим oпepalu я ::-::: Окрашенные ртщют па денситометре ( А, 5-:i. л выполняют ч графика в построение ка. л сапои;;на координатах: KOFi-j.ri плогцадь пика на дс: Ч1:.;е. способа на Результаты сп;;,г .псыь в таблице, природных водах пре,Как видно из таб; отисситель- . ная погрешноЬть спр: i: с..японина . .Ы. СПО- в природных БО/Т. п; 9:, что позсобом составляс - 5J Г..Я КОНТЛОЛЯ в ол я е т и с п о л г, з о р. л г :-. за содарг-лЗнием ч т-о,, инения в водоемах. Время проведс;пг:т т,е, в 2 раза неты;: с проведение. p;;::.ii: способу, причем поп анализ ИРУ егктй пр-.бо V, :.Л }--с: т.1епают трппии оиредеопределению при 1.;.--и; 0 ;г/.г1 (нижляемого сяпоиШй ;:. ; онцентраняя граница ог р1 деляе ых ций О,2 мг/д),

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ САПОНИНА В ВОДЕ путем подкисления анализируемой пробы соляной кислотой, кипячения и экстракции продуктов гидролиза органическим растворителем, отличающийся тем, что, с целью сокращения продолжительности и повьипения селективности, в качестве органического растворителя используют хлороформ и полученный экстракт подвергают хроматографированию в тонком слое в системе метанолвода при объемном соотношении

р.Днепр

0,30 0,320,30 0,290,320,31 0,007

0,40 0,42 0,420,44 0,410,370,013

0,60 0,60 0,640,57 . 0,570,650,65 0,017

5,83 9,02 7Л8

р. Десна 0,33 0,28 0,32 0,31 0,32 0,27

0,300,009

0,39 0,42 0,43 0,37 0,37 0,41 0,010 0,62 0,61 0,59 0,56 0,60 0,65 0,013

Артезианская вода 0,23 0,19 0,22 0,18 0,20 0,010

0,42 0;38 0,39 0,37 0,36 0,013

Продолжение таблицы

6,93 6,42 5,57

13,88 9,02