Способ окраски гистологических препаратов Советский патент 1985 года по МПК G01N1/30 

05

сд

;о to

Изобретение относится к гистологии и медицине, связано с микроскопической техникой и применяется при выявлении структурных компонентов органов и тканей различного генеза.

Цель изобретения - одновременное выявление структурных элементов различного генеза на одном препарате.

Способ осуществляется следуюш.им образом.

Берут исследуемый материал, помещают в 12%-ный раствор нейтрального формалина. Фиксируют 3 сут и более, т. е. срок хранения в фиксаторе не ограничен. Промывают в проточной воде комнатной температуры 1 - 5 ч. Споласкивают в дистиллированной воде. На замораживающем микротоме готовят срезы толщиной 15-50 мкм и помещают их в чащку со свежей дистиллированной водой. Когда все срезы подготовлены и собраны в чащке с дистиллированной водой, их помещают в бокс с 1,-ным водным раствором основного коричневого на 60- 70 мин. Затем срезы извлекают, промывают в дистиллированной воде мин, помещают на предметное стекло, расправляют, промокают бумажным фильтром и заключают в глицерин.

На окращенном препарате четко и чисто выявляются элементы разного генеза: нервы, клеточные и неклеточные элементы тканей, их структурно-функциональные отношения и связи.

Пример 1. При вскрытии кошки через 20 мин после воздействия электрическим током или магнитным полем берут образец (кожа, подкожные мыщцы и т. д.), фиксируют в 12%-ном нейтральном формалине 3 сут, промывают образцы в проточной воде 1-5 ч, споласкивают их в дистиллированной воде. Готовят на замораживающем микротоме срезы толщиной 15-50 мкм и переносят 50-70 срезов в чащку Петри с чистой дистиллированной водой, а затем в солонку с красящим раствором (1%-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.

Промывают срезы в дистиллированной воде 3-5 мин.

Помещают срез на предметное стекло, расплавляют его и промокают бумажным фильтром. Заключают в глицерин.

При микроскопическом изучении срезов установлены реактивные изменения нервных волокон, полнокровие сосудов и распад лаброцитов.

Заключение: используемые параметры воздействия превышают предельно допустимые дозы и вызывают структурные нару0 щения.

Пример 2. При патологоанатомическом вскрытии обнаружены признаки нарушения течения процесса регенерации. Кусочек органа с изменениями фиксируют в 12%-ном нейтральном формалине 3 сут. Промывают 5 образец в проточной воде I-5 ч, споласкивают в дистиллированной воде. Готовят на замораживающем микротоме срезы толщиной 15-30 мкм, переносят срезы в чащку Петри с чистой дистиллированной водой Q на время подготовки всего количества срезов, а затем в солонку с красящим раствором (1%-ный водный раствор основного коричневого) на 1 ч.

Промывают образец в дистиллированной

воде 3-5 мин, помещают срезы на предмет5 ное стекло, расправляют их, промокают бу

мажным фильтром и заключают в глицерин.

При микроскопическом изучении срезов установлены фрагментация нервных волокон, слабое развитие и фрагментация нервных волокон около раны.

0 Прокрашивание в 1 %-ном водном растворе основного коричневого менее 60 мин не позволяет выявить все структуры, более 70 мин - делает фотографию темной, и наглядность резко ухудшается.

Окрашенные предлагаемым способом срезы не нуждаются в дополнительной дифференцировке и поэтому промываются в дистиллированной воде в течение 3-5 мин для удаления остатков красителя.

Окрашивание в 1 %-ном водном растворе Q основного коричневого позволяет исключить применение реактивов, которые могут оказать разрущающее воздействие на какиелибо элементы исследуемых структур, что позволяет получить целостное представление об органе.

СПОСОБ ОКРАСКИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ с ,помощью . основного коричневого, отличающийся тем, что, с целью одновременного выявления структурных элементов различного генеза на одном препарате, ткань замораживают, готовят срезы и после нанесения красителя помещают в дистиллированную воду, а окраску проводят в 1Х-НОМ растворе основного коричневого в течение 60-70 мин..