Способ получения аминопроизводных пиридазина или их солей с кислотами Советский патент 1985 года по МПК C07D409/14 A61K31/501 A61K31/5355 A61P25/24 C07D413/12 C07D413/14 

Изобретение относится к способу по.пучения новых химических биологически активных соединений, конкретно к способу получения новых аминопроизводных пиридазина или их солей с кислотами, оказывающих действие на центральную нервную систему.

Целью изобретения является получение новых аминопроизводных ряда пиридазина, обладающих улучшенной серотониномиметической активностью, холиномиметической активностью и повьппенной способностью тормозить активность моноаминоксидазы.

Пример 1. 3-Морфолиноэтиламино-4-метил-б-(2-тиенил)-пирида ЗИН дихлорги;фат (СМ 30387) .

л) 7.-Окси-2-мет Ш-3-(2-теноил)-пропановая кислота.

Нейтрализуют 70,4 г пировиноградной кислоты 20%-ным раств-ором гидроокиси калия, перемешивая и охлаждая, затем добавляют 101 г 2-ацетилтио(1)ена. Потом добавляют раствор 56 г гидроокиси калия в 1600,. мл метанола.при пер-емешивании, после этого оставляют смесь в холодильнике в течение 4 дней.

Подкисляют раствор при помощи Юн. серной кислоты до рН 3-4. Фильт руют осадок сульфата калия и выпаривают метанол на водяной бане в вакууме. Подкисляют остающийся раствор при помощи Юн. серной кислоты и добавляют воду, чтобы растворить сульфат калия. Производят экстракцию простым эфиром и промывают эфирную фазу два раза при помощи 100 мл воды Экстрагируют органический раствор водным раствором бикарбоната калия. Отделяют водную фазу, которую экстрагируют небольшим количеством простого эфира, затем подкисляют Юн. серной кислотой.

Полученную кислоту кристаллизуют, обезвоживают и промывают небольшим количеством изопропилового эфира. Используют для следующей стадии.

б) 4-Метил-6-(2-ткенил)-3-пиридазон.

Растворяют 20 г полученной кислот в 200 мл бутанола, затем добавляют 7 г гидразингидрата,

Вьщерживают смесь при температуре кипения реакционной смеси, медленно отгоняя обр1азовавшуюся азеотропную смесь бутанол - вода. Когда образо1вание воды прекращается, отгоняют

приблизительно 160 мл бутанола и оставляют смесь кристаллизоваться приохлаждении.

Обезвоживают кристаллы и перекриталлизовывают из уксусной кислоты. Получают, целевой продукт: вес 14,5 т. пл. .

в) 3-Хлор-4-метил-6-(2-тиенш1)-пиридазин.

Нагревают на водяной бане в течение 3 ч смесь из 14 г полученного пиридазона и 90 мл хлорокиси фосфора. Вьшивают смесь на наслоенный лед и подщелачивают 20%-ным раствором натрия.

Обезвоживают твердое вещество и перекрйсталлизовывают из метанола. Вес полученного продукта 10,5 г, т. пл. 146®С.

д) СМ 30387..

Нагревают при температуре кипения реакционной смеси в течение 3 дней смесь из Ю,11 г полученного хлорпиридазина ,9 г 2-морфолинозтиламина в 150 мп бутанола.

Вьшивают раствор в воду и подщелачивают раствором натрия. Экстрагируют простым эфиром, сущат над сульфатом натрия и концентрируют досуха в вакууме.

Остаток кристаллизуется, и его перекрйсталлизовывают из этштацетата. Бес полученного продукта 9 г, Т. пл. .

Дихлоргидрат.

К раствору из 8,9 г указанного основания в 50. мп изопропанола добавляют 3,5 мл водного раствора концентрированной соляной кислоты. Обезвоживают образованное твердое вещество и перекристаллизовьшают его из абсолютного этанола. Вес полученного продукта 10,6 rj т. пл. 234С. .

П р и м ер 2, 3-Морфолиноэтиламино-4-метИл-6-(3-тиенш1)-пиридазин, дихлоргидрат (СМ 30388).

Аналогично примеру 1, но заменяя 2-ацетилтиофен на 3-ацетилтиофен, получают последовательно 2-окси-2-метил-6-(3-теноил)-пропановую кислоту; 4-метил-6-(3-тиенил)-3-пиридазон, т. пл. (уксусная кислота)i 3-хлор-4-метил-6-(3-тиенил) -пиридазин, т. пл. (диоксан); СМ 30388; основание т.пл,56°С (этилацетат - петролейный

эфир), дихлоргидрат - т. пл. 152 С (абсолютный спирт).

Пример 3. 3-Морфолиноэтиламино-4-метил-6-циклогексш1Пиридазин, дихлоргидрат (СМ 30390).

Аналогично примеру 1, но заменяя 2-ацетилтиофен циклогексилметилкетоном, получают последовательно 2-окси-2-метил-6-диклогексилпропановую кислоту; 4-метил-6-циклогексйл-3-пиридазон, т. пл. 173С (изопропанол - иэопропиловый эфир)j 3-хл ор-4-метил-6-циклог ексилпиридазин хроматографируется на двуокиси кремния, проводят элюирование этилацетатом - гексаном (25J75 по объему)} СМ 30390: основание - желтое масло.

Вычислено, %: С 54,10; Н 8,01; N 14,85.

Найдено, %: С 53,99; Н 7,97; N 14,83.

Дихлоргидрат т. пл. (изопропанол - эфир).

Полученные продукты подвергали фармакологическим испытаниям с целью определения их действия на центральную нервную систему.

1. Антидепрессивная активность.

Антагонизм птозу, вызванному резерпином.

Этот опыт описан Gouret и реали:3ован у мьшш самки CDI Charles Riker весом 20+1 г. Резерпин вызывает птоз через 1 ч после введения внутривенно некоторые антидепрессивные средства противодействуют этому птозу.

Исследуемые вещества вводили внутрибрюшинно. Резерпин вводили одновременно внутривенно при дозе 2 мг/кг. Через 1 ч после введения резерпина отмечали число животных, не имеющих птоза.

Этот опыт осуществлен на партийх за 10 мьшей, результаты вьфажены в процентном количестве животных, не имеющих птоза, и представляют рреднюю величину по меньшей мере .двух опытов.

Потенциализация судорог., головы, вызванных 5-окситриптофано.м.

5-Окситриптофан, предшественник 5-окситриптамина, вызывает у мыши типичное поведение, отличающееся резкими рывками ушей (судороги головы) . Молекулы, которые активизиру jDT центральную серотонинэргическую

передачу, повьппают число судорог головы, тогда как трициклические антидепрессивные средства являются инертными.

Вначале вводили исследуемое вещество внутрибрюшинно,затем через 1 ч одну дозу (200 мг/кг) суспензии 5-окситроптофана в дистиллированной воде. Каждое животное (мьш1ь-самку CDI Charles Riker весом 22-24 г ) немедленно помещали в стеклянньш цилиндрический стакан. Считали в те чение 20 мин число судорог головы.

Действие каждой дозы испытываемого вещества на партии из 10 животных сравнивали с контрольной партией, которая получала только эксципиент.

Результаты вьфажапи в процентах ао отношению к среднему числу, полученному у контрольных мьшей.

Измерение активности моноаминооксидазы (МАО) в пробирке.

Тормозящая активность моноаминоосидазы вьфажается по методу, описанному Кап и др., при использовании в качестве источника энзима организма крысы.

После препарирования ткани гомогенизировали в 16 об. (вес на объем буферного раствора ледяного фосфата (0,1 М, рН 7,40). Фракции по О,1 мл инкубировали в течение 10 мин в присутствии 5-окситриптамина, меченого углеродом 14 (конечная концентрация 480 juM), и изменякицихся концентраций испытываемого вещества-, конечный объем инкубации составлял 0,5 МП. Кислые метаболиты экстрагировали в 7 МП смеси толуола и этилацетата 1:1 (по объему), затем считали в результате жидкой сцинтилляции. Определяли графически концентрацию испытываемого вещества, которая тормозит 50% (ICyj ) контрольной активности.

2. Допаминэргическую активность исследовали путем анализа поведения при вращении у мыши после одностороннего повреждения организма.

Мьш1ам-самкам CDI Charles Riker весом 20-24 г предварительно наносили одностороннее повреждение путем стёреотоксической инъекции 6-оксидопамина при норме 8 мкг на 1 животное. Через неделю после этой операции вводили внутрибрюшинно исследуемые вещества группам из 7 мышей.

Через 1 ч после введения вещества определяли число вращенияв течение 2 мин. Самостоятельные боковые вращения при повреждении считали положительными, а боковые вращения от соприкосновения считали отрицательными.

Алгебраическую сумму вращений одной; группы обработанных животных сравнивали с алгебраической суммой вращений группы контрольных животньЕс, получивших только эксципиент (физиологический раствор хлористого натрия).

3. Холинэргическая активность.

Холинэргические рецепторы типа мускарина могут быть мечены в пробирке растертым хинуклидинил-бензилатом (QNB СН). Эту маркировку осуществляли по методу, описанному Yahamura и сотр. .

Мозг крысы, из которого извлечен мозжечок, гомогенизировали в 10 об, (вес на объем) 0,32 М сахарозы , затем центрифугировали при lOOOxg в течение 10 мин. Извлекали осадок и снова гомогенизировали остаток.

Кратные фракции 0,1 мл инкубировали при в течение 1 ч в 2 мл буферного фосфата (0,05 М, рН 7,4), содержащего изменяемые концентраци испытываемого продукта и 0,05 нМ QNB СН).

Затем образцы фильтровали на фильтрах Ватмана GF/B при небольшом вакууме, промывали буферным раствором инкубации. Радиоактивность,, абсорбированную фильтрами, считали в результате жидкой сцинтилляции.

Неспецифическую фиксацию определли в присутствии 100 М оксотреморина. Графически определяли ICj .

Результаты исследования действия предлагаемых аминопроизводных пиридазина на центральную нервную систему представлены в таблице.

В этой таблице представлены резултаты, полученные в аналогичных опытах с известным веществом, принадле жащим к химическому классу пиридазинов, обозначаем минаприном (DCI), соответствую1Цим формуле

и являющимся близким структурным аналогом предлагаемых соединений ряда аминопиридазина.

Из таблицы видно, что предлагаемые вещества при использовании в качестве антидепрессивных средств имеют лучшую серотониномиметическую активность (опыт с 5-НТР) и лучшую тормозящую активность моноаминоксидазы, чем минаприн} они являются более активными как холиномиметические агенты (связь с H-QNB), чем минаприн) кроме того, они в противоположность минаприну лишены всякой попаминомиметической активности. .

При этом предлагаемые вещества малотоксичны, следовательно, они могут использоваться в медицине для лечения депрессии и угнетенных состояний любого характера. Эти вещества могут вводиться через рот, прямую кишку или инъекцией. Фармацевтические композиции, которые их содержат, могут быть твердыми или ясидкими и иметь форму таблеток, таблеток в оболочке, гранул, свечек или препаратов для инъекций.

Дозировка может изменяться в широких интервалах в зависимости от способа введения и от типа и тяжести болезни. У взрослого при оральном применении она чаще всего составляет 0,010-0,500 г, в случае необходимости распределяется на несколько часте

Пример. Раленовый препарат.

Таблетки в оболочке, мг:

СМ 30388 . 100

Аэросил .

Стеарат

магния1,5

Крахмал

ТА РХ 1500 48

Способ получения аминопроизводных пиридазина формулы г RI-{ -NH-€H2-av f o, N-N где R - 2-тиенил, 3-тиенил или даклогексил; RZ - водород или С -алкил, или их сол.ей с кислотами, отличающийся тем, что хлорпроизводное формулы Ri4 -С1,. N-N где R и Rj имеют указанные значения подвергают взаимодействию с избытком амина формулы S . NH2-CH2-CH - Qo. в среде спирта при температуре кипения реакционной смеси и выделяют целевой продукт в свободном или в виде соли с кисло00 той. со 00 4ik сл