Способ получения производных 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида Советский патент 1985 года по МПК C07D498/04 A61K31/5365 A61K31/5415 A61P29/00 C07D213/02 C07D239/24 C07D261/06 C07D513/04 

I

Изобретение относится к способу получения HOBbix химических биологически активных соединений, а именно к способу получения производньпс 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида, обладающих противовоспалительной и анальгетической активностью и способностью тормозить простогландин-синтетазу.

Целью изобретения является получение новых производных ряда бензтизиндиоксида, облгадающих высокой противовоспалительной активностью при низкой токсичности.

Пример 1. Получение 5-этил-3-(2-пиридил)-2Н,5Н-1,3-оксазин- 5,6-сЗ-С1,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

При нагревают с обратным холодильникон в атмосфере азота в течение 30 мин .4,4 г (0,015 моль) 2-ЭТИЛ-4-ОКСИ-2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-З-карбоксилатэтила и 3,5 г (0,016 моль) 2-феноксикарбониламйнопиридина в 40 мл простого диметилового эфира диэтиленгликоля. Смесь охлаждают при тейпературе окружающей среды и выливают в 150 мл воды. Образовавшийся осадок отфильтровывают и промывают водой. Путем перекристаллизации в ацетоне получают 3,0 г (54%) 5-этил-З-(2-пиридил) -2Н,5Н-1 ,3-оксазинС5,6-с 1,2 б зотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида

Температура плавления 268-270 С.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), см: 1185, 1355, 1415 1635, 1705, 1795.

1Н ЯМР, cr DMSO/dfe3: 1,08 (t, ЗН)-, 3,75 (q, 2Н)-, 7,43 (е; 2Н); 7,86 (е, 5Н); 8,4 (d, 1Н).

Пример 2. Получение 5-метил-3-(2-пиридил)-2Н,5Н-1,З-оксазин 5, 1,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Вариант А. Нагревают до плавлени в силиконовой ванне при 210°С в ат мocфepe азота 14,1 г (0,05 моль) 2метил-4-окси-2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-З-карбоксилатэтила и 11,8 г (0,055 моль) 2-феноксикарбониламинопиридина. Поддерживают состояние плавления в течение 10 ми отгоняя фенол при пониженном давлении (25 мм рт.ст.). Осадок растворяют в ацетоне и выкристаллизовывают 12,1 г (68%) 5-метилгЗ-(2-пи959102

ридйл)-2Н,5Н-1,3-оксазин С5,6-с - : . ,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6диоксида.

Температура плавления 259-261 С.

5 Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), см-Ч 1185, 1355, 1410, 1640, 1710, 1790.

1Н ЯМР, crCDMSO/dj : 3,02 (S,

10 ЗН)-, 7,52 (е , 2Н) ; 7,92 (е , 5Н); 8,52 (d, 1Н).

Вариант В. Нагревают до 200°С в течение 15 мин в атмосфере азота 2,7 г (0,01 моль) 2-метил-4-окси15 -2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-З-карбоксилатметила и 2,1 г (0,011 моль) 2-трет-бутрксикарбониламинопиридина в 30 мл 1-метилнафталина, охлаждают и осаждают, используя петролейный эфир. Путем перекристаллизации из ацетона получают 1,9 г (55%) 5-метил-3-(2-пиридил)-2Н,5Н,1,3-оксазин 5,,23бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

25 Температура плавления 257-259 0. Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), см-ч : 1185, 1355, 1410, 1640, 1710, 1790.

30 1Н ЯМР, cTLDMSO/dJ: 3,0 (S, ЗН) ; 7,52 (е , 2Н); 7,92 (ej 5Н)-, 8,52 (d, 1Н).

Пример 3. Получение 5-метил-3-(2-пиридил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин (5, 6-с -0 ,2 бензотиазин-2(ЗН)ТИОН-4-ОН-6,6-диоксида.

Поддерживают с обратным холодильником температуру 140°С в течение 36 ч 8,1 г (0,02 моль) 2,4и -бис(2-метоксифенил)-2,4-дитиади- , фосфетана и 3,6 г (0,01 моль) 5-метил-3-(2-пиридил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин t5, 6-с} 1,23бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида в 80 мл ксилола. Хроматографию осуществляют на колонке с гелем двуокиси кремния, взятой в качестве стационарной фазы, промывая сначала ксилолом, а затем хлороформом. Из хлороформного раствора извлекают 1,4 г (38%) 5-метил-3-(2-пиридш1)-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,6-с 1,2 бензотиазин-2-(ЗН)-тиОН-4-ОН-6,6-диоксида.

После перекристаллизации из ацетона полученное производное имеет температуру плавления 269-27I C.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (KBr), CM : 1190, 1320, 1355, 1400, 1640, 1712.

1Н ЯМР, cf OMSO/d : 3,05 (S, 3H); 7,54 (; 2H); 7,92 (ei 5H); 8,48 (d, 1H).

Пример 4. Получение 5-метил-3- 3-(5-метилизоксазолил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5, 2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Нагревают до в течение 15 мин в атмосфере азота 2,8 г (0,01 моль)2-метил-4-окси-2Н,1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-З-этилкар.боксилата и 2,4 г (0,011 моль) З-феноксикарбониламин-5-метилизоксазола в 40 мл 1-метилнафталина. Осуществляют охлаждение и осаждение в осадок, используя петррлейный эфир.

Перекристаллизацию проводят в ацетоне и получают 2,2 г (61%) 5-метил-3- 3-(5-метилизоксазолил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,6-с ,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Температура плавления 268-269 С.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), CM-l : 1185, 1360, 1400, 1640, 1715, 1788.

1Н ЯМР, «rCDMSO/d j: 2,5 (S, ЗН) 3,08 (S, ЗН); 6,44 (S, 1H)i 7,98 (е , 4Н).

Пример 5. Получение 5-метил-3-(2-пиримидинил)-2Н, 5Н-1,3оксазин Ц5,6-сЗ 1,2 бeнзoтиaзин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Нагревают с обратным холодильником до 160°С в течение 30 мин в атмосфере азота 2,8 г (0,01 моль) 2-метил-4-окси-2Н-1,2-бвнзотиазин-1,1-диоксид-З-карбоксилатэтила и 2,4 г (0,011 моль) 2-феноксикарбониламинопиримидина в 30 мл простого диметилового эфира диэтиленгликоля. Смесь охлаждают при температуре окружающей среды и выливают в 100 м воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают в воде, перемевшвают с ацетоном при кипении и снова отфильтровывают. Получают 1,8 г (50%) 5-метил-3-(2-пиримидинил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Температура плавления 282-284 С.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), 1180, 1355/ 1400, 1632, 1710, 1787.

959104

1Н ЯМР, DMSO/d J: 3,05 (S, ЗН); 7,93 (е; 5Н) 8,85 (d, 2Н).

Пример 6. Получение 5-мегил-3- 2-(4-метилпиридил)-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Нагревают до плавления в силиконовой ванне при в атмосфере азота 2,7 г (0,01 моль) 2-метил-410 -ОКСИ-2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-3-метилкарбоксилата и 2,3 г (0,011 моль) 2-трет-бутоксикарбониламин-4-метилпиридина. Поддерживают плавление в течение 5 мин. Растворяют остаток в ацетоне и выкристаллизовывают 2,3 г (62%) 5-метил-3- 2-(4-метилпиридил)}-2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,6-с 1,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)т -дион-6,6-диоксида.

Температура плавления 259-26l C.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), см-Ь: 1195, 1360, 1415, 1640, 1720, 1795.

1Н ЯМР, cTLDMSO/d/ : 2,42 (S, ЗН); 3,1 (S, ЗН)-, 7,4 (е; 2Н) ; 7,98 (е-, 4Н)-; 8,4 (d, Ш).

Пример 7. Получение 5-метил-3- 2-(6-метилпиридил) -2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,6-с l ,23бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Нагревают до плавления в силиконовой ванне при в атмосфере

азота 2,8 г (0,01 моль) 2-метил-4-ОКСИ-2Н-1,2-бензотиазин-1,1-диоксид-3-этилкарбоксилата и 2,3 г (0,011 моль) 2-трет-бутоксикарбонш1 амин-6-метилпиридина. Поддерживают

плавление в течение 5 мин. Растворяет остаток в ацетоне и выкристаллизовывают из раствора 1,5 г (41%) 3-метил-3- 2-(6-метилпиридил) -2Н, 5Н-1,3-оксазин 5,6-с j р ,2 бензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксида.

Температура плавления 248-250 С.

Данные спектроскопического анализа.

ИК (КВг), см : 1190, 1360, 1410, 1715, 1790.

1Н ЯМР, crLDMSO/d,.l: 2,43 (S, ЗН) ; 3,0 (S, ЗН); 7,4 (е, 2Н);, 7,97 (е ,5Н).

Противовоспалительную активность (торможение отека, вызьтаемого коррагенином) новых производных 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида исследуют следующим образом.

Метод Винтера. Используют самцов крыс вида Sprague-DawJPey НС-СЕУ весом 90-110 Соединения вводят через рот в виде 5%-ной суспензии в гуммиарабике, используя пищеводный зонд, за 1 ч до этого осуществляют субподошвенн инъекцию в правую лапку животного 0,1 мл 1%-ной суспензии коррагенин в физиологической сьшоротке (NaC 0,9%). Подопытные животные получаю 5%-ный гуммиарабик, при этом общий использованный объем во всех случа составляет 10 мл/кг. Измеряют объем каждой лапки непосредственно перед осуществлением инъекции коррагенина, затем через 3 или 5 ч после инъекции с помощью ртутного плетизмографа. Рассчитывают для каждого животн го показатель воспаления по истечении 3 ч (1) и 5 ч (Ij-) после введения коррагенина, используя для этого следующие формулы: 1з 100; 0 I, х 100, где V. - объем лапки непосредственно перед введением кор рагенина, V, - объем лапки по истечении 3 ч после введения коррагенина, V - объем лапки по истечении 5ч после введения коррагенина. Рассчитывают показатель воспале ния, средний для подопытных жнвотньк, по истечении 3 ч (It) и 5 ч (it). Процент торможения отека (противовоспалительная активность) рас считывают для каждого животного по формулам: д - It, - IJ (It; - 100) Д (Its - 15) .ллр S - (ity - 100) где АЗ - противовоспалительная активность, %, в конце трет его 4acaj АС - противовоспалительная активность, %, в конце пято го часа. 10 Противовоспалительная активность пропорциональна логарифму введенной дозы. По кривой, полученной в координатах логарифм дозы - % эффекта, определяют дозу, которая снижает на 25% объем отека. Приравнивают эту дозу к DE-50, т. к. максимальный достигнутый эффект снижения отека равен 50%. В табл. 1 представлена противовоспалительная активность производных 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида. Анальгетическую активность новых производных 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида в отношении болей, вызываемых ацетилхолином, исследовали следующим образом. Метод Кольера. Используют самцов мышей вида Swiss, имеющих вес 20 25 г. Мышей помещают в индивидуальные клетки. Каждому животному вводит внутрибрюшинно раствор ацетилхолинбромида с концентрацией 0,32 мг/мл в количестве 0,2 мл на 20 г веса мыши. Таким образом, доза введенного ацетилхолинбромида составляет 3,2 г/кг. В течение 5 мин регистрируют количество конторсий, которые наблюдают у каждой мыши. По истечеНИИ 5 мин вводят предлагаемые соединения, используя в качестве эксципиента 5%-ный гуммиарабик. По истечении АО и 120 мин после введения предлагаемых соединений, повторяют инъекцию ацетилхолина и регистрируют количество конторсий, наблюдаемых у мышей в течение 5 мин. Рассчитывают для каждого животного процент торможения числа конторсии по истечении 40 и 120 мин, используя следующие формулы: NO - N40 X 100-, A.,., 110 где Ы„ - число конторсий перед введением предлагаемых соединений , - число конторсий через 40 мин после введения предлагаемых соединений , N,,0 - Число конторсий через 120 мин после введенич предлагаемых соединений. Процент торможения конторсий прямо пропорционален логарифму введенной дозы. По кривой, построенной в координатах логарифм дозы - % эффек та, рассчитывают дозу, которая снижает число конторсий до половины первоначального значения (DE-50). В табл. 2 предста:влена анальгети ческая активность предлагаемых соединений. Торможение простагландин-синтета зы семенного пузырька быка новыми соединениями исследуют следующим образом. , Метод Яшимото. Определение актив ности простагландин- синтетазы (1.14.-99.1) осуществляют, измеряя увеличение .адсорбции на 278 нм, воз никающей при образовании простаглан дина В из простагландина Е в щелочной среде. Температура инкубации со тавляет во всех случаях 37 + 0,10с Способ осуществляют следующим образом. К 1,5 мл раствора сопутствующег фактора (0,55 мг гидрохинона +0,5 м гемоглобина +7,7 мг глутатиона в 12 мл буфера трис-НС -, 0,2 М, рН 8, содержащего 10 мг энзима, прибавляют 0,5 мл раствора субстрата (0,6 м арахидоновой кислоты в 10 мл буфера) и 0,5 мл буфера и осуществляют инкубацию при 37С в течение 10 мин Прерывают ферментативную реакцию путем присоединения 1,5 мл 0,2 М лимонной кислоты и pGE, экстрагируют 2x5 мл этилацетата. Выпаривают органическую фазу в потоке азота при , а остаток растворяют в 2 мл метанола и 0,5 мл ЗМ гидроокиси калия. Наконец измеряют абсорбции на 278 нм по отношению к белому пигменту, к которому прибавляют 0,5 мл буфера вместо 0,5 мл раствора субстрата. Ферментативную активность выражают через повышение оптической плотности в течение 10 мин реакции. Торможение, вызванное действием фенилбутазона и, например, производного по примеру 2 на простагландин-синтетазу, определяют при контактировании энзима с соединениями в течение 5 мин. Применяют следу щий метод: к 1,5 мл раствора сопутствующего фактора, содержащего 10 мг энзима, прибавляют 0,5 мл раз личных растворов фенилбутазона или производного по примеру 2, и выдерживают полученную смесь при 37°С в течение 5 мин, после чего прибавляют 0,5 мл раствора субстрата и сохраняют инкубацию 10 мин дополнительно при указанной температуре. Последующие этапы аналогичны указанным вьше. Отношение между повышением оптической плотности в присутствии или при отсутствии ингибиторов представляет собой значение торможения . Концентрации, которые приводят к 50%-ному торможению, следующие: Clyo (М) Соединение 3-10ФенилбутазонСоединение по призеру Острую токсичность исследовали методом Литшфильда и Вилкоксона. Вводят соединение орально в виде суспензии в 5%-ном гуммиарабике. Введенньш объем составляет 25 мг/кг для мышей и 10 мг/кг для крыс. Полученные результаты при использовакии производных по примеру 2 представлены в табл. 3. Новые производные 6,6-оксази;нбензтиазиндиоксида по примеру 2 сравнивали по острой и кумулятивной токсичности с пироксикамом (N-(2-пирщ ;ил)-3,4-дигидрр-2-метил-4-ОКСО-2Н-1,2-бензтиазин-З-карбоксамидом), который является близким структурным аналогом предложенных соединений и в настоящее время наиболее распространен среди нестероидных противовоспалительных средств. . Данные представлены в табл. 4 и 5. Испытуемые соединения вводили орально. Из табл. 4 и 5 следует, что новые производные 6,6-оксазинбензтиазиндиоксида обладают меньшей токсичностью, чем пироксикам, при такой же противовоспалительной активности. Новые производные 6,6-оксазинензтиазиндиоксида могут быть испольованы а терапии человека и животых, в частности при лечении острых ли хронических заболеваний, при оторых необходимо сочетание противооспалительных и анальгетических редств, например при деформирующем артрите, остеоартрите, спондилите, острых мускульно-скелетных изменениях и острой подагре. В тера-пии человека рекомендуемая оза зависит от заболевания. В основном она составляет 100 мг в день. Производные 6,6-оксазинбензтиа зиндиоксида можно вводить в виде таблеток, желатинозных капсул или суппозиториев. Ниже указаны три галеновые форм производных 6,6-оксазинбензтиазин дИоксида, Желатинозные капсулы имеют следующий состав, г: . 5-Метш1-3-.(2-пиридил)-2Н,5Н-1,3-оксазин С5, Лбензотиазин-2,4-(ЗН)-дион-6,6-диоксид 0,020 Лактоза0,136 Тальк ,0,0016 Стеарат магния О,0016 Аэросил-2000,008 Таблетки имеют следующий состав 5-Метид-3-(2-пири.дил)-2Н,5Н-1,3-оксазин 5,,23бензотиазин-2,4(ЗН)дион-6,6-диоксид 0,020 Авицел рН 1б2 0,016 Лактоза .0,055 Приможель0,003 ПоливинилпирроСтеарат магния

0,100

Суппозитории имеют следующий остав, г:

5-Метил-З-(2-пиридил)-2Н, 5H-1,3-oкcaзин 5 , б-с 1 , 2 бензотйазин-2,4-(3)-дион-6,6-диоксид0,050

Монолен1,950

2,000 Т а б л-и ц а

Т а б л и ц а 3

6192 8841

f 1434

1994 должение табл.1 , мк/кг,оральистечении вре, ч Таблица 2 0, мг/кг, орально стечении времени,

11

fl959102

т a( б л и ц a 4

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 6,6-ОКСАЗИНБЕНЗТИАЗИНДИОКСИДА формулы I .., где R - С -С -алкил как метил или ЭТИЛ , X - атом кислорода или серы Het - замещенный метилом 2-пиридил либо замещенный метилом 2-изоксазолил или 2 -пиримидинил, отличающийся тем, что соединение формулы II Het- lH-cf OHi где Het имеет указанные значения R - фенил или трет-бутил, подвергают термическому разложению в расплаве или в среде инертного неполярного растворителя, такого как диметиловый эфир, дизтиленгликоль или 1-метилнафталин, и образующееся соединение формулы III ,Het - N С О, где Het имеет указанные значения, непосредственно в реакционной среде подвергают взаимодействию с соединением формулы IV О) ;о СП со где R имеет указанные значения Rj - .-алкил, такой как метил или этил, причем термическое разложение и последующее взаимодействие с соединением формулы IV ведут при 160-2ТО С, и в случае необходимости соединение формулы I, где X - атом кислорода, подвергают взаимодействию с тиилирующим агентом , таким как 2,4-бис- . - ( 2-метоксифенил) -2,4-дитиафосфетан, в ксилоле при температуре кипения реакционной смеси для получения соединения формулы 1, где X - атом .серы.

(6 191,6

(2342,0-16368,7) 8840,9

(2378,9-32856,5) с 1434,2

(742,8-2769,3) 1994,4

(1015,0-3918,8) i КонтрольПо примеру 2 290,65 + 6 41ироксикам

141,4

(75,7-264,4)

118,0

(18,0-771,6)

226,6

(132,9-386,6)

50,2

(15,6-162,2)

Таблица 5 tf 0/6 0/60/60/6 3/60/60/60/6 сГ 0/6 0/6 о/б 0/6 0/6 о/б 0/6 6/6 . 3/6 5/6

37,5 290,65 + 7S,06

150,0

0/6 1/6 3/6 4/6