Штамм @ 692,используемый для выявления холерных умеренных фагов типа 123 Советский патент 1986 года по МПК C12Q1/04 C12N7/00 C12R1/63 C12R1/91 

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для идентификации и дифференциации умеренных гетероимунных фа-- гов.

Цель изобретения - создание нового индикаторного штамма холерного вибриона, обладающего специфической чувствительностью к новой группе умеренных фагов типа 123,

Культур ашьно-морфологические признаки.

Грамотрицательные палочки 1,5- 3 мкм в длину и 0,2-0,6 мкм в ширину, слегка изогнутые, с одним полярно расположенным жгутиком, активно подвижные, формируют диско- видные, прозрачные колонии диаметром 3-4 мм. На питательном бульоне через б ч образуют равномерную муть и нежную пленку на поверхност

Биохимические свойства.

На средах Гисса виброионы штамм 692 разлагают до кислоты без газа маннозу, сахарозу, глюкозу, маннит; не- разлагают арабинозу, лактозу, инозит; окисляют и ферментируют глюкозу по Хью-Лейфсо- ну, образуют оксидазу, протеазу, амилазу, Е-декарбоксилазы лизина и орнитина, не образуют -дигидро- лазы лизина, не растут в присутствии 7 10%-ной NaCl.

Антигенные свойства.

Видовой холерной О агглютини- рзтощей сывороткой и типовыми сыворотками Огава и Инаба вибрионы штамма 692 агглютинируются до титра, TiiBo относятся к холерным вибрионам серовара Гикошима.

Вибрионы штамма 692 гемолизпо- ложительны по Грейгу, агглютинирую эритроциты морской свинки, растут на средах с 50 ед.полимиксина, не чувствительны к диагностическим холерным фагам, классическому и эль- тор.

Фаги типа 123 способны формировать негативные колонии на газоне штамма 692 в слое мягкого агара по Грациа и не формируют их на газоне штамма V. cholerae Р-1 (145) и V.eltorME-T других тест-культВНИИПИ Заказ 961/29 .Тираж 490 Подписное Филиал ГШП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

5

0

5

0

5

0

5

0

pax индикаторной системы,используемой для идентификации умеренных фагов холерных вибрионов пяти гетероим- мунных категорий с целью фаготи- пирования штаммов возбудителя холеры по эпидемиологическим показаниям.

Кроме того, штамм 692 отличается наличием гемолитической активности и способностью расти на средах с 50 ед, полимиксина.

Размножают штамм 692 на бульоне и агаре Мартена с рН 7,6. Хранят в лиофнлизированном состоянии.

Пример. Использование штамма 692.

Для диагностики новой группы умеренных фагов в культуре лизоген- ных штаммов холерных вибрионов штамм 692 используют параллельно двумя методами: Грациа и каплей. В первом случае 0,2 мл 3-часовой бульонной культуры штамма 692 вносят в 0,7%-ный расплавленный (45 С) агар Мартена одновременно с 1,0 мл филь- трата суточной бульонной культуры и исследуемого штамма. Смесь выливают на агаровую пластинку в чашке Петри. Во втором случае индикаторный штамм вносят в первый слой агара, а на его застывшую поверхность наносят пипеткой или петлей каплю исследуемого фильтрата.

Результат учитывают через 15- 18 ч инкубирования при 37°С.

При содержании единичных корпускул фага Б фильтрате исследуемого штамма он обнаруживается в виде изолированных негативных колоний на первой чашке, нри высокой концентрации фага он выявляется на второй чашке в виде сливного или полусливного литического пятна.

Наличие фага на газоне штамма 692 и отсутствие его на газонах штаммов Р-1 и МЕ-7 подтверждает его принад.аежность к новой группе.

Использование штамма 692 в качестве новой тест-культуры индикаторной системы повысит эффективность метода прямого фаготигпфования холерных вибрионов в эпидемиологических исследованиях при холере.

Штамм Vibrio cholerae eltor 692, КМ-11 (коллекция музея живых культур института Микроб), используемый для выявления холерных умеренных фагов типа 123. to а о 00