Способ определения бергаптена Советский патент 1986 года по МПК G01N21/78 

1

Изобретение относится к фармацевтической химии, а именно к способам определения бергаптена-5-метокси-6 7-фурокумарина, и может быть применено для качественного и количествен- ног.о анализа этого соединения в различных объектах для фармадевтичес- ких исследований.

Целью изобретения является повышение чувствительности и селективности способа.

Пример 1. Качественное определение бергаптена.

К 1-2 мг субстанции бергаптена или порошка мелкоизмельчецных таблеток прибавляют 6,5 мл 96%-ного зти лового спирта и встряхивают до растворения препарата. Прибавляют 0,2 мл 4%-ного раствора хлорамина Б в этаноле и 0,5 мл концентрированной соляной кислоты, перемепшвают и через

5мин прибавляют 2,8 шт 25%-ного раствора гидроокиси аммония. В ультрафиолетовом свете со светофильтром УФС-3 или УФС-6 наблюдают яркую зеленую флуоресценцию.

Время определения 6-7 мин.Данные о .флуоресценции бергаптенаи родственных соединений представлены в табл.1.

П р и м е р 2. Количественное определение бергаптена в субстанции.

0,01 г (точная навеска) субстанции бергаптена помещают в мерную колбу на 100 мл и растворяют в 80-90 мл 96%-ного этилового спирта, доводят до метки объем полученного раствора. К 0,5 мл данного раствора (аликвот- ная часть) прибавляют в пробирке

6мл 96%-ного этилового спирта,О,2 мл 4%-ного раствора.хлорамина Б в этаноле и 0,5 г-ш концентрированной соляной кислоты, перемешивают. Через

5 мин прибавляют 2,8 мл 25%-ного раствора гидроокиси аммония и перемешивают. Нагревают пробирку с раствором на кипящей водяной бане до 100 С и быстро охлаждают. Измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора по отношению к стандартному с содержаниембергаптена 1мкг/мл.По клибровочному графику определяют содержание бергаптенав пробе.Результаты определения представлены в табл. 2,;

П р и м е р 3. Количественное определение бергаптена в таблетках Псоберана по 0,01 г.

0,118 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мг и растворяют в

80-90 мл 96%-ного этилового спирта, довести до метки объем полученного раствора. 1 мл полученного раствора наносят на приготовленную хроматог5 рафическую пластину с тонким закрепленным слоем силикагеля марки LC З/АОи, чехословацкого производства и хроматографируют восходящим методом Е системе растворителей гексан10 этилацетат (3:1). Зону бергаптена, отмеченную в УФ-свете по величине Rf (равной 0,58) или по отношению к стандарту, .количественно переносят в пробирку и злюйруют 6,5 мл 96%

15 этилового спирта. Жидкость после элю- ирования сливают с осадка, а к полученному раствору прибавляют 0,2 мл 4% раствора хлорамина Б в этаноле и 0,5 мл концентрированной соляной кис20 лоты, перемешив.ают. Через 5 мин прибавляют 2,8 мл 25% раствора гидроокиси аммония, перемешивают.

Нагревают пробирку с раствором до и быстро охлаждают. Измеряют интенсив- ность флуоресценции полученного раствора по отношению к стандартному с содержанием бергаптена 4 мкг/мл. По калибровочному графику определяют содержание бергаптена в исследуемом образце. Содержание бергаптена в 1 таблетке колеблется от 0,0035 до 0,0045 г, что составляет около 40% от суммы двух фурокумаринов, содержащихся в таблетке.Результаты определения бер- гаптена втаблетках Псоберана по 0,01г представлены в табл.3.

Подобной реакции не дают и не ме- шают определению близкие по структуре соединения:кумарин, ксантотоксин, виснадин, неодикумарин, фепромарон, синкумар,зоокумарин,что было доказано на образцахданных соединений.Данные о флуоресценцииродственных бергаптену соединений пред,ставленыв табл. 1 . Чувствительность способна

0,005 мкг/мл, что в 400 раз выше ра- нее известного (2 мкг/мл).

Т а б л и ц а 1

Слабая голубаяНет

Яркая зеленаяНет

ВНИИПИ Заказ 2559/49

Тираж 778 Подписное

UlilLfUiU - - -f---- r-i

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Тираж 778 Подписное

- -f---- r-i

Изобретение относится к области фармацевтической химии, a именно к способу определения лекарственного препарата - бергаптена. Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа.Анализ ведут обработкой раствора анализируемой пробы в спирта раствором хлорамина Б в этаноле, концентрированной соляной кислотой и гидроокисью аммония с последующим нагреванием на кипящей водяной бане и измерением флуоресценции полученного раствора. Чувствительность способа 0,005 мкг/мл. 3 табл.