Способ количественного определения активации лимфоидных клеток Советский патент 1986 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и касается способов выявления и объективной регистрации состояния активации лимфоцитов, может быть использовано при диагностике заболеваний, сопровождающихся изменениями иммунологической реактивности организма.

Цель иаоб ретения - повышение чув ствительности сйособа.

Способ осуществляют следующим об- - разом,

I 1 мл-гвп рийизй ованной крови наносят на f А смеси фиколла и ве- рогр,&. (Р-1,077), Пробирки цент- ;; Е ЭФУ гйруют при 1000 об/мин 30 мин, BpwrpoiwTbi оседают нэ дно пробирки, лимфЬциты остаются в интерфаэе. Лимфоциты собирают, дважды отмывают и подсчитывают (из 1 мл крови с нормальным содержанием лимфоцитов обычД

но удается получить около 10 кле12379792

ток, которые ресуспендируют в 1 мл раствора Хэнкса). Полученную таким образом биопробу помещают в кювету из нелюминесцирующего стекла с дном

5 из оптического кварца, располагае- . мую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемую при 38°G, После эталонных измерений определяют величину свечения кюветы (фон) и

О кюветы с биопробой. Пробу лимфоцитов в объеме 0,7-1,0 мл (10 мм фо- цитов) помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения по описанному выше способу,

5 Затем добавляют 0,7 мл раствора тимостимулина или другого индуктора и через 5-10 мин вновь регистрируют свечение стимулированных лимфоцитов,

20 Хем Илюминесденция иммунокомпе- тентных клеток через 5 мин после воздействия стимулятора представлена в таблице,

Лимфоциты человека, Левамизол 0,1 мкг/м.п

и-

0,15 мг/мл I,0 мг/мл

9 10

0,1 мкг/мл 6 1,0 мг/мл 6

1,О мг/мл 6

Формула изобретения

Способ количественного определе- ния активации лимфоидных клеток путем: добавления к суспензии лимфоцитов иммуностимулятора с последующим -учетом полученных результатов, о тВНИИПИ Заказ 3283/45 Тираж 778 Подписное Произв-полигр, пр-тие, г. Ужгород, ул., Проектная, 4

251

82

9 10

123 27 27 204 74

36 33

41

личающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, определяют хемолюминесценцию в течение 5-10 мин после введения иммуностимулятора и оценивают акти- вапию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу времени.

Изобретение позволяет повысить чувствительность определения активации лимфоцитов. Для этого предварительно полученную биопробу помещают в кювету из нелюминесцирукяцего стекла с дном из оптического кварца, располагаемую непосредственно над фотокатодом ФЭУ, термостатируемуго при 38 С. Определяют величину свечения, кюветы и кюветы с биопробой. Пробу лимфоцитов помещают в кювету и через 2-3 мин регистрируют интенсивность свечения. Добавляют раствор тимостимулина или другой индуктор, через 5-10 мин после введения иммуностимулятора определяют хемо- люминесценцию и оценивают активацию лимфоцитов по количеству импульсов в единицу-времени. I табл. С 9 ю 00 г ;о