Способ получения лейкопитарного бета @ -гликопротеида Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение SU1280546A1

Изобретение относится к медицинской биохимии, а именно к препаратив- :ности технологической биохимии,, и касаетсяполучения биологически активного белкового продукта - лейкоци- тарного бета -гликопротеида, необходимого для получения моноспецифических антисывороток, и определения это

го белка, а также для тестирования его биологической активности.

Целью изобретения является увеличение чистоты целевого продукта.

Способ поясняется следующими примерами .

Пример 1. 500 мл женского но лока смешивают с 500 мл влажной двуокиси алюминия, инкубируют 20 мин на магнитной мешалке, после чего трижды .отмывают двуокись алюминия 1 л дистиллированной воды, постоянно отделя сорбент при помопда центрифугирования К отмытой двуокиси алюминия добавляю 400 мл (50% насыщения) насьщенного раствора сернокислого аммония, оставляют на 24 ч при 4°С, центрифугируют при 80002 в течение 30 мин, надоса- док удаляют, а осадок растворяют в 40 мл дистиллированной воды и диали- эуют против дистиллированной воды при .

Полученную после диализа фракцию смешивают с 20 мл влажного SP-сефа- декса С-50 (приготовленного путем предварительного замачивания дистиллированной водой), инкубируют в тече ние 20 мин при постоянном помешивании, центрифугируют, надосадок удаляют, а сефадекс с сорбированными бел- Kaj4H трижды отмывают 1 л дистиллированной воды, удаляя воду при помощи центрифугирования. К отмытому сефа- дексу добавляют 20 мл 8%-ного раствора хлористого натрия, инкубируют при перемешивании 20 мин, осадок отделяют центрифугированием, а надоса- дочную жидкость диализуют против дистиллированной воды и лиофилизируют, Таким образом получают препарат лейкоцитарного бета,-гликопротеида с чистотой выхода 80%, выход белка составляет 30%.

5

0

0

5

0

35

0

45

50

Пример2.- 500 мл женского молока смешивают с 500 мл влажной двуокиси алюминия, дальнейшую обработку проводят как описано в примере 1. К отмытой двуокиси алюминия добавляют 400 мл насьш1енного раствора гидрофосфата натрия, в дальнейшем проводят обработку, как в примере 1, к полученному надосадку добавляют 480 мл (60%) насьш;енного раствора сернокислого аммония, обработка в дальнейшем проводится как в примере 1. Элюацию сефадекса проводят 12%-ным раствором хлористого натрия с дальнейшей обра-, боткой, как в примере 1. Таким образом, получают препарат лейкоцитарного бета., -гликопротеида с чистотой выхода препарата 75%, выходом белка 35%.

Применение адсорбционной хроматографии с двуокисью алюминия в качестве сорбента приводит к меньшему количеству примесей тл большей чистоте препарата по сравнению с аналогом ( и 80% соответственно). Выбранные параметры представлены таблицей.

Таким образом, приведенная таблица свидетельствует, что выбранные параметры являюfcя оптимальными, повышают чистоту и выход препарата по сравнению с прототипом.

Формула изобретения

Способ получения лейкоцитарного бет -гликопротеида путем фракционирования женского молока, отличающийся тем, что, с целью увеличения чистоты целевого продукта, фракционирование осуществляют путем . адсорбционной хроматографии на двуокиси алюминия, элюции насыщенным раствором двузамещенного гидрофосфата натрия, центрифугирования, осаждения надосадка сернокислым аммонием при 50-60% насыщения с последующей ионообменной хроматографией растворённого осадка на катионитном сильно основном сефадексе зернистости и элюцией 8-1 2%-ным раствором поваренной соли.

40 50-60

70

50-60 50-60 50-60

Редактор А.Долинич

.Заказ 7062/50Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

15 35 55 20 35 40

75 80 60 70 80 55

Составитель П.Бонарцев

Техред В.Кадар Корректор Е.Рошко

Похожие патенты SU1280546A1

название год авторы номер документа
Способ получения лейкоцитарного альфа @ -гликопротеида 1984
  • Шевченко Ольга Павловна
  • Дмитриев Андрей Алексеевич
  • Петрунин Дмитрий Дмитриевич
SU1247379A1
Способ получения плацентарного лактогена 1981
  • Шевченко Ольга Павловна
  • Петрунин Дмитрий Дмитриевич
  • Цагараева Тамара Михайловна
  • Огольцова Наталья Ивановна
SU983127A1
Способ получения трофобластического бета @ -гликопротеина 1990
  • Калинин Юрий Анатолиевич
  • Терентьев Александр Александрович
  • Татаринов Юрий Семенович
SU1836957A1
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО БЕТА-1-ГЛИКОПРОТЕИНА 2008
  • Раев Михаил Борисович
RU2367449C1
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО БЕТА-1-ГЛИКОПРОТЕИНА 2007
  • Раев Михаил Борисович
  • Шмагель Константин Владимирович
  • Раев Александр Борисович
  • Черешнев Валерий Александрович
  • Демаков Виталий Алексеевич
  • Бахметьев Борис Аркадьевич
RU2325171C1
Способ получения @ -глобулина,ассоциированного с болезнью Крона 1985
  • Чехонин Владимир Павлович
  • Халиф Игорь Львович
  • Киркин Борис Васильевич
  • Овчинников Александр Владимирович
SU1318915A1
Способ получения конъюгированного энтеротоксина ЕSснеRIснIа coLI 1989
  • Гнатенко Григорий Вакулович
  • Сухарев Юрий Станиславович
SU1750690A1
Способ выделения кислой фосфатазы 1988
  • Евсеев Леонид Петрович
  • Евдокимов Валерий Васильевич
  • Светличкин Вячеслав Владимирович
  • Соколов Альберт Валерианович
  • Ледян Клавдия Макеевна
SU1576564A1
Способ выделения лейцинаминопептидазы 1983
  • Хохлов Александр Петрович
  • Баскаева Тамара Сафаровна
  • Савченко Юрий Николаевич
  • Хрусталева Наталия Андреевна
SU1114699A1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО ГРАНУЛОЦИТАРНОГО КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩЕГО ФАКТОРА ЧЕЛОВЕКА 2001
  • Романов В.П.
  • Назарикова Н.И.
  • Жданов В.В.
  • Афиногенова Г.Н.
  • Гладченко Т.Н.
  • Пустошилова Н.М.
  • Масычева В.И.
  • Синичкина С.А.
  • Сандахчиев Л.С.
  • Гольдберг Е.Д.
  • Дыгай А.М.
  • Поженько Н.С.
RU2201962C2

Реферат патента 1986 года Способ получения лейкопитарного бета @ -гликопротеида

Изобретение относится к медицинской биохимии, может быть применено при получении биологически активного белкового продукта - лейкоцитарного бета -гликопротеида для получения моноспецифических антисывороток, определения этого белка, а также для тестирования его биологической активности. Цель изобретения - увеличение чистоты целевого продукта путем фрак(56) № 7, ционирования женского молока. Для этого женское молоко смешивают с двуокисью алюминия, инкубируют 20 мин, трижды отмывают двуокись алюминия дистиллированной водой, всякий раз отделяя сорбент центрифугированием. К отмытой двуокиси алюминия добавляют 50-60%-ньй насьщенный раствор сер- но-кислого аммония, оставляя на сутки при 4°С, центрифугируют, надосадок, удаляют, а осадок диализуют против дистиллированной воды при 4°С. Затем фракцию смешивают с влажным SP-ce- фадексом G-50, инкубируют, центрифугируют, надосадок удаляют, а сефа- декс с сорбированными белками трижды отмывают в литре дистиллированной воды, всякий раз удаляя воду центрифугированием. Далее к отмытому сефадек- су добавляют 8-12%-ный раствор NaCl, инкубируют, осадок отделяют центрифугированием. Надосадочную жидкость диализуют против дистиллированной воды и лиофилизуют. Таким образом получают препарат лейкоцитарного бета, -гликопротеида. 1 табл. (Л to 00 о СП 4 о

Формула изобретения SU 1 280 546 A1

SU 1 280 546 A1

Авторы

Петрунин Дмитрий Дмитриевич

Шевченко Ольга Павловна

Петрунина Юлия Александровна

Дмитриев Андрей Алексеевич

Туменова Сакинат Курманбиевна

Даты

1986-12-30Публикация

1984-11-30Подача