Способ определения компенсаторных возможностей организма Советский патент 1987 года по МПК G01N33/49 A61B10/00 

Изобретение относится к области биологии и медицины, а именно к цитологическим способам определения компенсаторных возможностей, и может быть использовано для прогнозирова- нйя пред- и послеоперационного периодов, для коррекции медикаментозной тактики, определения тяжести патологического процесса, дифференциальной ;диагностики онкологических заболева- НИИ внутренних органов.

Цель изобретения - повышение точности способа путем выявления компенс торных реакций клеток и при исследовании морфологических преобразователей (гипертрофии) сегментоядерных нейтро- филов, связанных с их гиперфункцией в результате компенсаторной реакции.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного берут кровь в объеме ,5-2 см в предварительно обработанную гепарином пробирку (8-10 ед/мл), Кровь отстаивают при комнатнрй температуре 30-40 мин. Затем выделяют лейкоциты, для чего стерильной пипеткой отсасывают плазму с лейкоцитами и смешивают с питательной средой следующего состава, %: среда инактиви рованная сыворотка крупного рогатого скота с лактальбумином (стандартная смесь) 20; аминопептид 10 и антибиотики. Подготовленная для инкубации в питательной среде клеточная суспензия должна состоять из одной части взвеси лейкоцитов в аутоплазме и двух частей питательной среды. Плотность клеток составляет при этом 1,5x10 - -2,0x10 в суспензии.

.

Флаконом для инкубации может служить , наприме р , чашка Петри диаметро 5 см,- куда предварительно помещают покровное стекло, а затем - суспензию клеток в объеме см , -

Культивируют без митогенов при в течение 24 ч. После культивирования стекла с монослоем клеток извлекают, высушивают при комнатной температуре, фиксируют и окрашивают любым красителем, применяемым для окраски мазков крови. Препарат монтируют на предметное стекло и наблюдают в микроскопе.

Из фагоцитов определяют диаметр гипертрофированных нейтрофилов и при диаметрб нейтрофилов от 15-22 мкм огфеделяют низкук) степень компенсаторных возможностей организма, а при диаметре нейтрофилов от 23-60 мкм определяют высокую степень компенсаторных возможностей организма.

Пример 1. Больной Л. В зоне роста культуры лейкоцитов крови обнаруживались гипертрофические нейтро филы, число которых составляло 80- 90%. Размеры их превьш1али контрольны образцы в 2-3 раза, т.е. диаметр име 180-200 ед. окуляр-микрометра. Гипертрофированные нейтрофилы имели правильную форму, четко контурированное ядро, состоящее из 3-4 сегментов. Послеоперационный период у данного больного протекал без осложнений. Показатель гипертрофии нейтрофилов (55-60 мкм) и клинические данные свидетельствуют о высокой компенса торной возможности организма больного.

Пример 2. Больной П. Оперирван. Анализ культуры лейкоцитов (до операции) показал отсутствие в зоне роста гипертрофированных нейтрофилов Размер клеток составил 15-22 мкм, чт свидетельствовало о низкой компенсатной возможности организма. Осложненный послеоперационный период закончился летальным исходом.

Предлагаемый.способ обеспечивает высокую точность, отличается простотой постановки, может быть использован как объективный показатель реактивности организма и функционального состояния неспецифического иммунитета и дает возможность судить о тяжести заболевания и эффективности проводимой терапии.

Формула изобретения

Способ определения компенсаторных возможностей организма, включающий забор крови, выделение лейкоцитов, их инкубацию в питательной среде и подсчет фагоцитов, отличающийся тем, что, с целью повьшзе- ния точности способа, лейкоциты инкубируют на покровных стеклах, а из фагоцитов определяют диаметр гипертрофированных нейтрофилов и при диаметре нейтрофилов от 15-22 мкм определяют низкую степень компенсаторных возможностей организма, а при диаметре нейтрофилов от 23-60 мкм определяют высокую степень компенсаторных возможностей .организма.

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к цитологическим способам определения компенсаторных возможностей организма, и может быть использовано для прогнозирования цред- и послеоперационного периодов. дифференциальной диагностики онкологических заболеваний внутренних органов. Цель изобретения - повышение точности способа. Из крови выделяют лейкоциты, смешивают их с питательной средой (1 часть взвеси лейкоцитов в аутоплазме и 2 части питательной среды). Плотность клеток составляет при этом 1,5x10 -2x10 в суспензии. Флаконом для инкубации может служить, например, чашка Петри диаметром 5 см, куда предварительно помещают покровное стекло, а затем суспензию клеток в объеме 3-4 см . Культивируют без митогенов при температуре в течение 24 ч. После культивирования стекла с монослоем клеток извлекают, высушивают при комнатной температуре, фиксируют и окрашивают, исследуют под микроскопом. Из фагоцитов определяют диаметр гипертрофированных нейт- рофилов и при диаметре нейтрофилов от 15-22 мкм определяют низкую степень, а при диаметре нейтрофилов от 23-60 мкм определяют высокую степень компенсаторных возможностей организма. § (Л ю со со 4