Способ получения производных гуанидина или их солей (его варианты) Советский патент 1987 года по МПК C07D231/38 A61K31/4192 A61P1/04 

Изобретение относится к способам получения новых производных гуаниди на или его солей, которые являются антагонистами гистамина Н-2-рецепто ра и могут найти применение в медицине ,

Целью изобретения является синтез новых производных гуанидина или его солей, обладающих улучи1енными свойствами.

Пример 1. Смесь хлористоводродного (4-нитрофенил)-изо- уреидо |-пиразол-1 -ил валерамида (0,16 г), триэтиламина (0,06 мл), 2,2,2-трифторэтиламина (0,2 г) и ацетонитрила (5 мл) нагревают с обратным холодильником в течение ночи Растворитель выпаривают, и остаток очищают жидкостной хроматографией среднего давления на силикагеле, используя в качестве элюанта сначала смесь СНС1, (МеОН) водного аммиака (уд,вес О,ИВ) 9:1:0,1 объем/объем/ объем, а затем МеОН, получая 0,09 г (70%) 5-{з- 2-(2,2,2-трифторэтил)- -гуанидино -пиразол-1-ил -валерами- да, т.пл. 130°С при перекристаллизации из Et ОАс (этилапетат).

Исходный материал можно получить следующим образом.

Пасту гидрида натрия (6,16 г, 61% вес/вес суспензии в жидком парафине) добавляют порционно в течение 30 мин к раствору 3-нитропиразола (17,4- г) в безводном ДМФ (150 мл) при внешнем охлаждении льдом, чтобы поддерживать температуру 20-30 С Смесь перемешивают 45 мин, к почти прозрачному раствору добавляют 5- -бромвалеронитрил (25 г) в течение 30 мин при 25-30°С и смесь перемешивают 4 ч. Добавляют воду (450 мл) и EtOAc (450 мл), верхний слой отделяют, высушивают (MgSO ) и выпаривают под вакуумом до масла, которое представляет собой смесь 5-(3-нит- ропиразол-1-ил)-валеронитрила и 5- -(5-нитропиразол-1-ил)-валеронитри- ла. Масло разделяют на две порции по 15 г, которые фракционируют на клонке силикагеля (диаметр 3,5 см, длина 100 см), элюируя при давлении 2 атм смесью EtOAc/60-80° петролей- ный зфир (3:7 объем/объем). Сначала элюируют 1:5 изомер, а затем 1:3 изомер, 5- (3-11итропиразол-1-ил)-ва- л еронитрил имеет т.пл, 32-33 С,

Раствор 5-(3-нитропиразол-1-ил)- -валеронитрила (0,2 г) в концентри

рованной серной кислоте (1 мл) выдерживают при в течение 19 ч. Смесь разбавляют водой (4 мл), подщелачивают до рН 10 с помощью 10,8 н, раствора гидрата окиси натрия и экстрагируют EtOAc ( мл). Экстракты высушивают (MpSO) и выпаривают под вакуумом до белого твердого вещества, которое перекрис- таллизовывают из этанола, чтобы получить 5-(3 нитропиразол-1-ил)-ва- лерамид, т.пл, 129-131 С,

Смесь 5-(З-нитропиразол-1-ил)- -валерамида (3,6 г) и 3%-ного (вес/ 5 /вес) палладия на угле (0,54 г) перемешивают в изопропаноле (20 мл) в атмосфере водорода. Температуру поддерживают ниже 40°С при внешнем охлаждении льдом. Через 4 ч водород 0 больше не поглощ.ается,

Смесь отфильтровывают, и фильтрат выпаривают под вакуумом, чтобы получить 5-(3-аминопиразол-1-ил)-валер- амид в виде масла, которое крйстал- 5 лизуется.

Смесь хлористоводородного 5-(3- -аминопиразил-1-ил)-валерамида, полученного в EtOF. с эфирным НС1 с последующим выпариванием (0,22 г), 4-нитрофенилцианата (0,16 г) и ацетонитрила (2 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляют еще 0,08 г 4-нитрофенилцианата, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляют еще 0,15 г 4- -нитрофенилцианата и 5 мл ацетонитрила, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение нбчи. Смесь отфильтровывают. Задержанное твердое веп(ество промьшают ацетонит- рилом и высушивают на воздухе, чтобы получить 0,16 г (42%) хлористоводородного 5-{3- 2-(4-нитрофенил)- -изоуреидо -пиразол-1-ил -валерами- да, который используют без дальнейшей очистки,

ЯМР в d DMCO: 7,39 (дублет 1Н);

о

0

5

0

5

0

5,66 (дублет, 1Н); 4,03 (квартет, 2Н); 3,94 (триплет, 2Н); 2,08 (триплет, 2Н); 1,6 (мультиплет, 4Н),

Соль малеиновой кислоты получена в ацетоне, т.пл. 183-184 С.

Приме р 2. Смесь 5-(3-амино- пиразол-1-ил)-валерамида (1,0 г), 1 -(4-метилфенил)-2-(2,2,2-трифтор- этил)-изомочевины (2,0 г) и ацетонитрила (10 мл) нагревают при 80°С в течение 3 дней. Смесь дважды обрабачъшают порциями по 0,5 г хлористоводородной 1 -(4-метилфенил)-2-(2,2, 2-трифторэтил)-изомочевины.и порци ями по 0,5 мл триэтиламина и нагревают при 100(, в течение 1 дня. Ра- створитель выпаривают, и смесь очищают жидкостной хроматографией среднего давления на силикагеле, -используя смесь сне 1з/МеОН/водный аммиак (уд. вес. 0,88) 19:1:0,1 объем/объем /объем в качестве элюанта, чтобы получить 0,28 г (17%) 5-{з- 2-(2,2,2- -трифторэтил)-гуанидиноj-пиразол-1 - -ил|-валерамида, который идентичен образцу, полученному в примере I.

Исходный материал можно получить следующим образом.

Смесь хлористоводородного 2,2,2- -трифторэтиламина (7,0 г), 4-метил- фенилпианата и ДЛФ (50 мл) перемеши- вают при комнатной температуре в течение 4 дней. ДМФ удаляют перегонкой при пониженном давлении. Остаток растирают с простым эфиром и фильтруют, чтобы получить 10,8 г твердо- го вещества. Порцию этого твердого вещества (9,5 г) обрабатывают избытком насыщенного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют эфиром. Экстракт высушивают (MgSO ) и выпарива- ют. Полученное твердое вещество растирают с легким петролейным эфиром (т. кип. 40-60 С) и фильтруют, чтобы получить 4,7 г 1-(4-мети.пфенш1)-2- -(2,2,2-трифторэтил)-изомочевины, т.пл. 83-85 С. 4,2 г этого вещества обрабатывают эфирным хлористым водородом. Смесь фильтруют, чтобы получить 4,2 г (39,5%) продукта в виде хлористоводородной соли, т.пл. 180- 182 С.

Биологические испытания.

Соединение, полученное в приме- pax 1 и 2, испытьгоали с применением теста с аминопиридином в сравнении с 2-гуанидино-4- 2-(2-циaнo-3-мeтил- гyaнидинo)-этилтиoмeтил -тиaзoлoм (соединение А). Соединение А позволет получить 50%-ное торможение при концентрации 0,057 мкм. Соответству- значение для соединения по примерам 1 и 2 равнялось 0,0036 мкм.

Соединение, полученное в примерах 1 и 2, вводили внутривенно двум анестезированным крысам и четырем нахо- дящимся в сознании мьшам в дозах, которые соответственно в десять и в сто раз превьппали дозу (мг/кг), которая позволяла получить примерно

o 5

0 5 О -

5

0

0

50%-ное торможение желудочной секреции у анестизированиой крысы. У всех животных, которым были введен ; эти дозы, не было обнаружено каких-либо токсических симптомов.

Тест с аминопирином выполнялся следующим образом.

Желудочную мукозу, взятую у новозеландского белого кролика, отделяли от нижележащей мьшгцы и промывали в буферном растворе 1, содержащем,г/л: NaCl 8,007; КС1 0,201; , 0,113; KgHPO 0,204; CaCl2-2H,0 0,132; MgCl 0,101 и глюкозу 1, доведенном до рН 7,4 с помощью NaOH. Эту ткань мелко нарезали, суспенди- |ровали в буферном растворе 1 и три раза промьгоали буферным раствором 1. Ткань затем суспендировали в дисперсионной среде - коллагеназа (Сигма хемикал компани, тип V, 100 мг) и бычий сывороточный альбумин (Майлз лабораториз лимитед, фракция V, 100 мг) в буферном растворе 1 (100 мл); 50 мл дисперсной среды на 10 г чистого веса ткани инкубировали при температуре и рН 7,4 (удерживаемого на этом уровне в результате непрерьгоного контроля) с перемешиванием в атмосфере кислорода. Через 30 мин ткани давали осесть, и всплывающую жидкость удаляли. До- .бавляли свежую дисперсионную среду (50 мл на 10 г чистого веса ткани) и продолжали инкубацию, в результате в которой через 40-60 мин ткань в основном диспергировалась в железы и целые клетки. Оставшиеся крупные кусочки ткани удаляли фильтрованием через нейлоновую, сетку. Смесь желез и клеток собирали центрифугированием при и суспендировали в буферном растворе 1, содержащем 1% бычьего сывороточного альбумина (Майлз

лабораториз лмт., фракция V). И, наконец, клетки и железы промывали 3 раза буферным раствором 1 и суспендировали в буферном растворе 2 Lco- дepжaD eм бутан фирмы Иглз (MEM) (500 мп), апротинин (Сигма кемикал компани, 10 мл) и НЕРЕ S (2- -оксиэтил)-пиперазин-2-ил -этансуль- фокислоту (150 г, 20 мл),доведенном до рН 7,4 с помощью NaOH (150м.т1 на 10 г чистого веса ткани). Суспензию ткани перемешивали в атмосфере кислорода при 32°С в течение, по крайней мере, 1 ч перед использованием. Суспензию ткани инкубировали

5

вместе с испытуемым соединением и аминопирином (10 мкм), меченным атомом с в диметиламиногруппе (0,1 мк /мл), в течение 20 мин. Поглощение аминоп ирина затем стимулировали посредством добавления гистамина и ингибитора на основе диэстеразы ICi 63197 до получения конечных концентраций, соответственно равных 10 М и 5 10 М. Через 18 мин клетк и железы отделяли от инкубационной среды фильтрованием суспензии через фильтры из пористого стекла с микроволокнистой структурой. Клетки и железы быстро (10 с) промывали охлажденным в ледяной бане буферным раствором 1 в течение трех раз. Ами

нопирид, меченный атомом

сохранившийся в ткани, измеряли при помощи сцинтйлляционного счетчика и степень торможения, вызываемую поглощенным количеством испытуемого соединения, высчитывали в применени к контрольному образцу. Концентраци испытуемого соединения, позволяющую получить 50%-ное торможение, затем высчитывали графически, исходя из серии испытаний, вьтолненных при раличных концентрациях.

Ф

ормула изобретения

1. Способ получения производных гуанидина общей формулы

RIп

--м о

н :k-A4-K

HjN Н

где R - 2,2,2-трифторэтил;

А - тетраметилен,

или их солей, отличаю щи й- с я тем, что изомочевину общей формулы

Редактор Н.Егорова Заказ 1227/57

Составитель Н.Пивницкая Техред И.Попович

Корректор

Тираж 372Подписное

ВНИШИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Д-35, Раутская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

d

О

н

ISf

N-A-C-IS

Н

где R,

нитрофенил,

подвергают взаимодействию с амином общей формулы

R,NH,,в присутствии растворителя - ацето- нитрила при температуре кипения растворителя и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде соли.

2. Способ получения производных гуанидина общей формулы

RI.

Н

:1я о

C lSl-Clsi-A-C-/ - i -- гм-л-v;- : П Н

5

0

где

R,2,2,2-трифторэтил; А - тетраметилен,

или их солей, отличающий- тем, что изомочевину общей фор Я.

H O-L-Nr

с я

мулы

н

где R, имеет указанные значения; Rj - нитрофенил;

подвергают 35 формулы

взаимодействию с амином

о

HjN-Q-A-C-x

1SI

н

в присутствии растворителя - ацето- нитрила при 80-100°С и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде соли.

Корректор А.Зимокосов

Изобретение касается производных гуанидина, в частности 5-{3- 2- -(2,2,2-трифторэтил)-гуанидино -пиразол- 1-ил -валерамида (I), который является антагонистом гистамина Н- -2-рецептора и может быть использован в медицине. Для выявления физиологической активности получено новое производное указанного класса. Процесс ведут: а) из хлористоводородного (4-нитpoфeншт)-изoypeидo - -пиpaзoл-l -ил}-валерамида, триэтил- амина и 2,2,2-трифторэтиламина в среде ацетонитрила при кипении; б) из 5-(3-аминопиразол-1-ил)-валерамида и 1 -(4-метилфенил)-2-(2,2,2-трифторэтил )-изомочевины в среде ацетонитрила при 80-100 С. Выход 70 (а) и 17% (б). Соединение Т может быть выделено в виде фармацевтически приемлемых солей или в свободном виде, т.пл. I 130°С. Соль 1алеиновой кислоты и 1имеет т.пл. 183-184 с, а хлористоводородная соль 1 - т.пл. 180-182°С. В сравнении с аминопирином I обеспечивает 50%-ное торможение при концентрации 0,0036 мкм против 0,057 мкм. 2с.п. ф-лы. § СО