Питательная среда для выделения НаеморнILUS INFLUeNZae Советский патент 1987 года по МПК C12Q1/04 C12Q1/04 C12R1/21 

11

Изобретение относится к микробиологии и касается питательных ср.ед для выделения Haemophilus influenzae.

Цель изобретения - повьшение вы- севаемости Н. influenzae.

Использование среды иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.В1л дистиллированной воды вносят 10,2 г агар-агара для набухания. Затем смесь 11агревают до полного расплавления агара, далее ее охлаждают до 40 - 50 С и последовательно вносят следующие ингредиен- ть1,г: казеиново-дрожжевойгидролизат 40,8, глюкоза 0,6, нитрат железа 0,04, 2-3-индолиндиона 0,03.. Устанавливают рН среды 7,410,2, фильтруют и разливают во флаконы, автоклавируют при 115°С в течение 30 мин. Среду оклаждают до 40 - 50°С, разливают в чашки Петри -(20 - 25 мл) или в пробирки -{5 мл для скошенного агара).

Пример 2. Готовят среду по примеру 1, но ингредиенты используют в следующих соотношениях, г: агар- агар 10,8, казеиново-дрожжевой гидро- лизат 41,8, глюкоза 0,62, нитра-т железа 0,043, 2-3 индолиндион 0,035.

Пример 3. Готовят среду по примеру 1, но ингредиенты используют в следующих соотношениях, г: агар- агар 11,0, казеиново-дрожжевой гидро- лизат 44,0, глюкоза 0,65, нитрат железа 0,045, 2-3-индолиндиона 0,04.

„

Чашки перед посевом подсушивают

в течение 15-20 мин при 37 С. Выращивание ведут в термостате при 36 - в условиях повьш1енного содержания углекислого газа.

Перед посевом культуры смывают физраствором и готовят ряд разведений. Посевная доза (0,1 мм) содержит 1000 микробных клеток (м. кл.) и в 0,05 мл взвеси 100 м. кл.

Результаты приведены в таблице.

На предлагаемой среде при посеве

112

смеси культур Н. . influenzae стрептококка и стафилококка возможна их дифференциация .

Бактерии Н. influenzae формируют на среде выпуклые с ровными краями, гладкие, нежные, чуть сероватого цве та колонии, диаметром 0,5 мм. Колонии стрептококка мелкие, непрозрачные с плотным центром. Колонии стафилококка крупные до 2 мм в диаметре, гладкие, с ровным краем, пигмент хорошо выражен.

Предлагаемая среда сухая, для приготовления ее используется непищевое сырье и реактивы отечественного производства.

При использовании сухого варианта среды навеску в 52-56 г всыпают в колбу с 1000 мл дистиллированной воды, оставляют на 5 мин для набухания затем кипятят на медленном огне 2 - 3 мин, фильтруют и далее проводят в соответствии с примером 1.

Формула изобретения

Питательная среда для выделения Haemophilus influenzae, содержащая казеиново-дрожжевой гидролизат, агар агар, стимулятор роста и воду дистиллированную, отличающая ся тем,.что, с целью повьшения высевае- мости Haemophilus influenzae, она дополнительно содержит глюкозу и нитрат железа, в качестве сти1чулятора роста она содержит 2-3 индолиндион при следующем количественном соотношении ингредиентов, г/л: Казеиново-дрожжевой гидролизат40,8-44,0

Глюкоза0,6-0,65

Нитрат железа 0,04-0,045 Агар-агар10,2-11,0

2-3 Индолиндион 0,03-0,04 Вода дистиллированная1 л

Примечание. В таблице приводятся средние данные

из 5 параллельных опытов при коэффициенте вариации, не превьшающем 20%,

Составитель.А. Завадская Редактор М. Недолуженко Техред М.Ходанич Корректоре. Шекмар

Заказ 3926/24

Тираж 499Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. /5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается питательной среды дпя выделения Н. in- fluenzae. Цель изобретения - повыше- «ие высеваемостн Н. influenzae. В I л дистиллированной воды вносят 10,2 - 11,0 г агар-агара, смесь нагревают до полного расплавления, после охлаждения до 40 - 50°С последовательно вносят 40,8 - .44,0 г казеи- ново-дрожжевого гидролизата 0,6 - 0,65 г глюкозы, 0,04-0,045 г нитрата железа и 0,03 - 0,04 г 2 - 3 индо- линдиона. Устанавливают рН 7,410,2, стерилизуют при 115 с 30 мин. Среда позволяет получить изолированньш колонии при посеве 100 м.кл., в некоторой степени ингибирует рост стафилококка. 1 табл. с S (Л со. со со