Питательная среда для культивирования продуцента галактозооксидазы FUZаRIUм DRамINеаRUм ИМВ-F 1060 Советский патент 1987 года по МПК C12N1/14 C12N9/04 C12N1/14 C12R1/77 

11337

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к составам питательной среды для культивирования продуцента галактозооксидазы, которая применяется в качестве ан;1литического препарата для определения В-галакто зы в различном биологическом материале ,

Цель изобретения - увеличение вы- хода фермента и удешевление cpeдьf.

Сущность изобретения заключается в том, что в предлагаемой среде наряду с обязательными компонентами с источниками минеральных солей в качестве источника углерода использ:утот кукурузную муку, в качестве источника витаминов в частично азота используют белково-витаминный концентрат (БВК), а помимо известного набора также дополнительно вносят сульфат марганца.

Содержание кукурузной муки в среде менее 2,0%. приводит к снижению галактозооксидазной активности в культуральной жидкости (см,таблицу), а более 4,0% - к удорожаншо питательной среды без достаточного повышения активности. Содержание БВК в среде менее 0,2% и более 0,4% обусловливает снижение биосинтеза галактозооксидазы, Содержание-в среде мочевины и солей ., Na3HP04 12HjO, MgS04 7HjO, ,,0, MnSO менее 0,8; 0,4; 0,6; o ,02; o,G01 и 0,001 % соответственно приводит к снижению галактозооксидазной активности в культуральной жидкости, а увеличение содержания перечисленных компонентов соответственно, более 1,3; 0,8; 0,9; 0,04; 0,005; 0,004% - к удорожанию питательной среды, практически не влияя на величину галактозооксидазной активности в культуральной жи,ц- кости.

Составы предлагаемой и известной сред приведены в та.бл,1 ,

Выход галактозооксидазы в культуральной жидкости при культивировании на предлагаемой среде штамма Fusari

5

0

5

0

5

0

45

50

um graminearum №-IB-F 1060 увеличивается в среднем на 30% по сравнению с прототипом и составляет 24 32 ед,/мл, себестоимость среды уменьшается на 98,4%, см, i абл . 2 .

Изобретение позволяет сократить затраты на получение условного 1 кг препарата галактозооксидазы за счет снижения стоимости питательной среды и увеличения выхода галактозооксида- зы в культуральной жидкости.

Формула изобретения

Питательная среда для культивирования продуцента галактозооксидазы Fusariuns graminearum ШВ-F 1060, содержащая органические источники углерода, азота и витаминов, мочевину, фосфат калия однозамещенный, фосфат натрия двузамещенный, сульфат магния, сульфат меди и воду, отличающаяся тем, что, с целью увеличения вькода фермента и удешевления среды, она дополнительно содержит сульфат марганца, а в качестве органических источников углерода, источников витаминов и азота используют кукурузную муку и белково-витаминный концентрат соответственно при следующем соотношении компонентов, мае,%:

Кукурузная

мука2,0-4,0

Мочевина0,8-1 ,3

Белково- витаминный

концентрат0,2-0,4

Фосфат калия

однозамещенный0,4-0,8

Фосфат натрия

двузамещенный 0,6-0,9

Сульфат

магния0,01-0,04

Сульфат меди 0,001-0,005

Сульфат

марганца0,001-0,004

ВодаОстальное

Компонент

Кукурузная мука

Мочевина

БВК

Дрожжевый экс1ракт

12 HjO

MnSO,

Таблица 2

Питательная Выход галактозооксидазы Стоимость среда в культуральной жидкости

ед./мл ° руб. %

Известная25,0 100 0,93 100 .

Предлагаемая

124,0 96 0,0107 1,15

232,5 130 0,0152 1,63

330,0 120 0,0196 2,10

Составитель В.Соина Редактор М.ТовтинТехред М.Ходанич КорректорН .Король

Заказ 4097/23Тираж 499Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

Таблица 1

Содержание компонентов, мас.%, в составах

Цредлагаемом

Известном

3

4,0 1,3 0,4

0,8

0.9

0,04

0,005

0,004

1

3,0

1,1 0,3

0,55

0,8

0,02

0,0025

0,002

1,0

0,3

0,9

0,8

0,02

0,0025

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно касается состава питательной среды для культивирования продуцента галактозооксида- зы, используемой в качестве аналитического препарата для определения D-галактозы в различном биологическом материале. С целью увеличения выхода фермента и удешевления среды в питательную среду вводят в качестве органического источника углерода кукурузную муку, в качестве источника азота и витаминов белково-витамин- ный концентрат (БВК) и дополнительно сульфат марганца при следующем соотношении компонентов, мас.%: кукурузная мука 2,0-4,0; мочевина 0,8 - 1,3; БВК 0,2-0,4; фосфат калия одно- замещенный 0,4-0,8; фосфат натрия двузамещенный 0,6-0,9; сульфат магния 0,01-0,04; сульфат меди 0,001 - 0,005; сульфат марганца 0,001 - 0,004; вода остальное. Введение кукурузной муки и БВК увеличивает выход галактозооксидазы в культуральной жид.кости на 30% и снижает себестоимость среды на 98,4%. 2 табл. ю С СдЭ СО