Способ определения характеристик антисыворотки Советский патент 1987 года по МПК G01N33/532 

113377762

Иг обретение относится к иммуно-компоненты спектра электронного палогии и может быть использовано длярамагнитного резонанса и калибровочопределения качественных характерис-ной кривой. Далее строя графическую

тик антисывороток: константы сродства jзависимость в координатах B-1/f/F

и количества мест связывания против В 1/f, где В - концентрация

Целью изобретения является ускоре-сыязанного антигена; F - концентрация

ние способа за счет исключения стадиисвободного антигена; f - фактор пвзаимодействия антисыворотки с 50%кратного разведения, равный 1/п, 1/п ,

связыванием и разведений меченого 101/п и ТсД

антитела и усовершенствования рас- Далее определяют константу сродстчета характеристик антисывороток„ва антисывороток по тангенсу угла

наклона этой зависимости к оси абсПример Для определения ка-цисс, а количество мест связывания - чественных характеристик антисыворот- 5по значению точек пересечения этой ки к норадреналину - медиатору симпа-зависимости оси абсцисс тической нервной системы - используют аналог норадреналина - спин-мече-Формула изобретения ный норадреналин, меченый нитроксильным радикалом, обладающим парамагнит- Ю Способ определения характеристик ными свойствами Фиксированное коли-антисыворотки, включающий взаимодей- чество спин-меченого норадреналинаствие фиксированного количества мече- готовят путем растворения его нав-зс-кого антигена с пробами специфической ки 9,25 млг в 25 мл воды Для пост-аитисыворотки П -кратного разведения роения кривой разведения осуществляют и определение в каждом измерении двухкратное титрование раствора анти-концентрации связанного антигена, сыворотки фосфатным буфером рН7,4отличающийся тем, что, таким образом, чтобы в каждой пробес целью ускорения способа, а каждом было по 0,45 МП раствора. Затем визмерении дополнительно измеряют кон- каждую пробирку с антисывороткой до- 30центрацию свободного антигена, затем ливают по 0,05 мл раствора спин-мече-строят графическую зависимость в ного норадреналина, окончательнаякоординатах B-l/f/F против В 1/f, концентрация которого в каждой про-где В - концентрация связанного антибирке составляет 10 М„ Инкубациюгена; F - концентрация свободного реакционной смеси проводят в течение 35антигена; f - фактор п -кратного 12 ч при комнатной температуре, послеразведения антисыворотки, равный чего в каждой пробирке производят /п 1/п , 1/п ,,, и определяют кон- измерение концентрации связанногостанту сродства по тангенсу угла, спин-меченого норадреналина (В) инаклона этой зависимости к оси абс- концентрации свободного спин-меченого 40цис, а количество мест связывания - норадреналина (F) на радиоспектромет-по значению точки пересечения этой ре РЭ-1306 по амплитуде высокопольнойзависимости оси абсцисс.

Изобретение относится к иммунологии, предназначено для определения качественных характеристик антисывороток (константы средства и количества мест связывания), Цель изобретения - ускорение способа путем исключения стадии взаимодействия антисыворотки с 50% связыванием и разведений меченого антитела и усовершенствования расчета характеристик антисывороток. Определяют качественные характеристики антисыворотки к норадрена- лину - медиатору симпатической нервной системы, используя аналог норадренали- на - спин-меченый норадреналин (нитроксильным радикалом с парамагнитными свойствами). Для построения кривой разведения двукратно титруют р-р антисыворотки фосфатным буфером рН 7,4 так, чтобы в каждой пробе было по 45 мл р-ра. Затем в каждую пробирку с антисывороткой доливают по 0,05 МП р-ра спин-меченого норадрена- лина в концентрации 10 М, Инкубируют смесь 12 ч при 18-20°С, затем измеряют концентрацию связанного спин- меченого норадреналина (В) и свободного спин-меченого норадреналина (F) на радиоспектрометре по амплитуде высокопольной компоненты спектра электронного парамагнитного резонанса и калибровочной кривой. Строят графическую зависимость в координатах B 1/f/F против В 1/f, где В - концентрация связанного антигена; F - концентрация свободного антигена; f - фактор п-кратного разведения