Изобретение отнсзсится к мепинии- ской микробиологии II биотехнологии и может найти применение при решении вопросов научно-исследовательского характера, а также для получения высокоактивного препарата гемолизина
Целью изобретения является получение штамма Vibrio cholerae chole- rae № 461/67-34, способного стабиль- но и в больших количествах продуцировать гемолизин..
В природе не известны штаммы классического холерного вибриона, обладающие постоянной гемолитической ак- тивностью.
Штамм Vibriocholerae cholerae № 461/67-34 при длительных (в течение i года) цассажах сначала в щелочном бульоне Мартена, затем - на пЬлужидком агаре с 0-холерной сы- вороткой.
Штамм V.cholerae cholerae 461/67- 34 депонирован в Коллекции Всесоюзного научно-исследовательского противо чумного института Микроб под № 6. Штамм V.cholerae cholerae KM ff 61 характеризуется следующими признаками.
Культурально-морфологичеЬкие при- знаки.
В мазках из агаровых и бульонньпс культур, окрашенных по Граму, клетки имеют вид грамотрицательных полиморфных слегка изогнутых или прямых па лочек. Подвижные. При выращивании в 0,3%-ном щелочном агаре наблюдается помутнение столбика агара. На щелочном агаре вибрионы образуют через 1 ч роста при колонии правильной круглой формы, диаметром ,5 мм с влажной блестящей поверхностью, прозрачные в прохо . дящем свете, голубоватые - в отражен Ном. На щелочном бульоне помутнение с нежной пленкой.
Биохимические свойства. Штамм разлагает глюкозу в аэроб- Ных и анаэробных условиях, миннозу, .сахарозу, маннит, крахмал - с образо )йанием кислоты без газа, слабо продуцирует ацетилметшшарбинол, индол, .декарбоксилирует лизин, не расщепляет аргинин, арабинозу, не образует сероводород. Штамм устойчив к 50 ед/мл полимиксина.
5
0
5
O
л .
5
5
0
5
Фп ГОусТОЙЧИР)(1СТЬ .
Штамм лизнруется диагностическим фагом зльтор до разведения 0 . Фагамы холерным классическим диагнос- . тическим и фагами ХДФ-3,-4,-5 не ли- зируется..
Серологические свойства. Штамм не агглютинируется 0-холерной сывороткой и типоспеци фической сывороткой Инаба, РО-холерной сыво- , роткой агглютинируется до 1/16 титра. Агглютинируется сывороткой к вибрионам 41 серовара до 1/2 титра.
UlTaMM является О мутантом, классического холерного вибриона по питательным потребностям прототроф.
Энтеропатогенен для кроликов-сосунков в дозе 10® м.к. и выше. Обладает средней чувствительностью к ле- вомицитину (МИК-5 мкг/wi), налидиксо- вой кислоте (10 мкг/мл) и стрептомицину {МИК-40 мкг/мл). Стабильно вырабатывает гемолизин.в больших коли чёствах, активный в отношении эритроцитов барана, кролика, морской свинки, человека, не.активный в отношении куриных эритроцитов. Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Суточную агавовую .культуру штамма .V.cholerae cholerae KM № 6 в количестве 10 микробных кле гок на 1 мп засевают в 50 мл дрож жевого бульона, рН 7,1 После инкубирования при в течение 24 ч ставят пробу Грейга с неразведекиой культурой и с разведениями в том же бульоне 1:2, 1:10, 1:20, 1:50, 1:100, 1:150, 1:200, 1:25.0, 1:300.
Положительным считается результат при наличии полного лизис эритроцитов барана в пробирках с соответствующими разведениями культуральной жидкости.
В качестве контроля используют (см. таблицу) исходный негемрлитич- ный штамм V. cholerae cholerae 461/67 и гемолйтичный штамм V,cholerae eltor 9949. I
Формула изобретения
Штамм вибриона .Vibrio cholerae cholerae KM № 61 - продуцент гёмоли - зина.
V.cholerae cho- lerae KM 61
V.cholerae cho- lerae 461/67 (исходный штамм)
V.cholerae eltor 9949
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR - источник умеренного фага х1 серотипа 1х гетероиммунной категории | 1988 |
|
SU1551735A1 |
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR, используемый в качестве тест-культуры для идентификации гемолизина типа II подтипа @ холерных вибрионов | 1988 |
|
SU1602865A1 |
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRас еLтоR-продуцент умеренного фага П серотипа у1 гетероиммунной категории | 1986 |
|
SU1388423A1 |
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR 80 - источник умеренного фага ХП серотипа Х гетероиммунной категории | 1989 |
|
SU1631078A1 |
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае еLтоR источник умеренного фага XI серотипа XII гетероиммунной категории | 1989 |
|
SU1623205A1 |
| Рекомбинантная плазмида, экспрессирующая клонированный ген гемолизина Vibrio cholerae, и штамм Escherichia coli - суперпродуцент прогемолизина Vibrio cholerae | 2017 |
|
RU2671099C1 |
| Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае сноLеRае серовара Инаба,используемый в качестве продуцента холерного токсина | 1987 |
|
SU1460075A1 |
| СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ АТОКСИГЕННЫХ ШТАММОВ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ОТ ТОКСИГЕННЫХ | 2003 |
|
RU2257415C1 |
| АВИРУЛЕНТНЫЙ ТЕСТ-ШТАММ БАКТЕРИЙ Vibrio cholerae БИОВАРА eltor СЕРОВАРА Ogawa (ctxA-, tcpA-, toxR-, zot-), ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ, ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ И УЧЕБНОМ ПРОЦЕССЕ | 2004 |
|
RU2254371C1 |
| СПОСОБ ВНУТРИВИДОВОЙ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ Vibrio cholerae О139 | 2004 |
|
RU2268942C1 |
0 мутант классического холерного вибриона V.cholerae cholerae KM 1 6Г выбран в качестве продуцента, так как он стабильно вьфа- батывает гемолизин в больших количествах (в пробе по Грейгу в разведении до 1:300).
Составитель 0. Тугаринов Редактор Л. Пашкова Техред М.Ходаним Корректоре. Шекиар
Заказ 1694
Тираж 502 4
ВНИИПИ Государствекиого комитета СССР
по делам изобретений и открытий 113035, .Москва, Ж-35, Рау пская наб., д, 4/5
Подписное
| Арутюнов Ю.И., Дрожевкина М.С., Черкасов Л.Р | |||
| и ГольДберг A.M | |||
| Характеристика холерных вибрионов, циркулирующих в VII пандемии на различных территориях ШЭИ, 1982, 3, с | |||
| Устройство для устранения мешающего действия зажигательной электрической системы двигателей внутреннего сгорания на радиоприем | 1922 |
|
SU52A1 |
| Урбанович Л.Я., Марамович А.С | |||
| и Ганин В.С./В кн | |||
| Эпидемиология и профилактика особо опасных инфекций в МНР и СССР | |||
| - Улан-Батор, 1982, Ч | |||
| Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
| Способ получения борнеола из пихтового или т.п. масел | 1921 |
|
SU114A1 |
