Изобретение относится к усовершенствованному способу получения производных глицерофосфолипидов,которые находят применение в медицинской промьшшенности.
Цель изобретения - упрощение процесса, повышение выхода.
Пример 1. А). 1-0-Трифенил- метил-2-олеил-Зп-глицеро-3-фосфо- холин.
1,26 г олеиновой кислоты вводят во взаимодействие с 0,794 г карбонил диимидазола в 25 мл тетрагидрофурана в течение 45 мин при комнатной температуре, затем удаляют растворитель в вакууме. После этого остаток, который содержит образовавшийся имидазо- лид жирной кислоты, смешивают с раст вором 1,1 г неочищенного продукта 1-0-трифенштметил-8п-глицеро-3-фосфо холина (согласно примеру 1) в 28 мл диметилсульфоксида. После добавки катализатора, который получают раст- ворением 148 мг металлического натрия в 11,5 мл диметилсульфоксида, реакционную смесь отстаивают, периодически встряхивая, в течение 20 мин при 20°С. Наконец, добавляют в смесь 64 мл 0,1 н, водной уксусной кислоты,- дззаждь экстрагируют смесью хлороформа с метанолом 2:1 (по объему) и промывают объединенные органические фазы смесью метанола с водой 1:1 (по объему). После выпаривания растворителя в вакууме неочи™ щенный продукт растворяют в хлороформе и наносят на колонку с силика- гелем. Чистое соединение (1,1 г) элюируется хлороформ-метанольными градиентами тонкослойная хроматография на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный NHj, в соотношении 65:35:5 по объемам) показьшает единое пятно, ,4,
Б). 2-Олеош1-Зп-глицеро-3-фосфо- холин.
Раствор 500 мг 1-0-трифенилме- тш1-2-олеоил-8п-глицеро-3-фосфохо- лина в 30 мл метиленхлорида смеши- вают с 0,5 мл 20%-ного раствора три- фторида бора в метаноле и после этого перемешршают в течение 30 мин при . Затем добавляют 15 мл метанола в 9 мл воды, встряхивают и отделяют органическую фазу. Растворитель удаляют путем отгонки в высоком вакууме при комнатной температуре.
JQ
|5 20 25 ЗО -
0 5
5
0
5
в). 1-Пальмитоил-2-олеоил-5п-гли- церо-3-фосфохолин.
Остаток, который содержит полученный 2-олеош1-8п-глицеро-3-фосфо- холин, растворяют в 30 мл безводного хлороформа. Затем в этот раствор добавляют 820 мг пальмитинового ангидрида и 200 мг диметиламинопиридина. Реа.кционную смесь перемешивают в течение 6 ч при 20°С. После этого добавляют 15 мл метанола и встряхивают сначала с 0,1 н. НС1, а затем с Hj,0. После удаления органического растворителя в вакузт е вещество очищают путем хроматографии на силикагеле с помощью хлороформ-метанольных грз- диентов. Очищенное соединение (400мг- 80,4% теории) при тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный NHj в соотношении 65:35:5 по объемам) дает единое пятно, ,4.
Элементный анализ .P (760.0,91).
Рассчитано: С 66,37 Н 10,84,- N 1,84; Р, 4,08.
Найдено: С 66,1; Н 11,1j N 1,9; Р 4,0.
5МР: 0,9. (6Н, CHj)-, 1,3 (СИ-j), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН), 3,16 (9Н, (f, N-CHj), 3,3-4,4 (8Н, СН, глйцерол, холин), 5,1 (1Н, СН-гли- церол), 5,34 (2Н, олефин).
Пример 2. 1-Стеароил-2- -олеоил-8п-глицеро-3-фосфохолин. .
Раствор 2-олеоил-8п-глицеро-3-фос- фохолина (получен из 700 мг 1-0-три- фенилметш1-2-олеоил-8п-глицеро-3-фос- фохолйна согласно примеру 1, стадии А и Б) вводят во взаимодействие с 1,2 г ангидрида стеари ювой кислоты по указанной в примере 1 (стадия В) методике работы, хроматографическр очищают и анализируют. Получают 550 мг (выход 76% в расчете на 1-0-трифенш1- метил-Зп-глицеро-З-фосфохолин) 1-сте- ароил-2-олеоил-5п-глицеро-3-фосфохо- лина, который в тонкослойной хрома- тограмме на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный водный раствор NHg в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно, ,4.
Рассчитано: С 67,05-, Н 11,00; N 1,78; Р 3,93.
C,4H«,NOjP
Найде 1о: С 66,90; Н 11,20; N 1,70; Р 3,80.
ЯМР: 0,9 (611, СНз), 1,3 (СН.;), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СНj), 3,15 (9Н,;, N-CU), 3,3-4,4 (8Н, глице- рол, холин), 5,1 (1Н, СН-гл1щерол), 5,35 (2Н, олефин).
Пример 3. А). 1-0-Трифенил- метил-2-линолеоил-8п-глицеро-3-фосфоХОЛИН.
60 мг 1-0-трифенилметил-8п-глице- ро-3-фосфохолина ацилируют с помощью линолеоилимидазолида, который получен из 690 мг линолевой кислоты и 440 мг карбонилдиимидазола по указанной в примере 1 (стадия А) методике. После хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле чис- тое соединение (690 мг, выход - 75% от теории) в тонкослойной хромато- грамме на силикагеле показьшает еди- ное пятноi ,3 (растворитель - хлороформ :.метанол : 25%-ный водный раствор NH-J в соотношении 65:35:5 (по объемам).
Б) , 2-Линолеоил-8п-глицеро-3-фос- фохолин.
Раствор 1 г 1-0-трифенилметил-2- -линолеоил-Sn-глицеро-3-фосфохолина в 60 мл метиленхлорида для отщепления 1-0-трифенилметильного остатка, как указано в примере 1 (стадия Б), обрабатывают 20%-ным раствором три- фторида бора в метаноле.
В). 1-Стеарош1-2-линолеоил-8й-гли- церо-3-фосфохолин.
Полученный (стадия Б) 2-линолеоил- -Sn-глицеро-З-фосфохолин вводят во взаимодействие с 1,6 г ангидрида стеариновой кислоты по указанной в примере 1 (стадия В) методике и хромато- графически очищают. Получают 820 мг (выход 80% в расчете на 1-0-трифенил- метил -2-линолеоил-8п-глицеро-3-фосфр- .холин) чистого продукта, который в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - хлороформtметанол : 25%-ный водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показьюает одно пятноj ,7.
Рассчитано: С 67,23; Н 10,77, N 1,78J Р 3,94.
C. (786, Т31)
Найдено: С 66,80; Н 10,70 N 1,90; Р 4,0. .
ЯМР: 0,9 (6Н, CHj), 1,3 (СН), ,3 (альфа- и бета-СН-), 2,75 (12Н С - СН - С f), 3,16 (19Н, d, NT-gHi), 3,3-4,4(8Н, CHi, глицерол
Q 5 0
5
п
0
0
холнн), 5,1 (1Н, СН, СН-глицерол), 5,35 (14Н, олефин). .
Пример 4. А). 1-0-Трифенил- метил-2-ацетил-8п-глицеро-3-фосфохо- лин.
320 мг 1-0-трифенилметил-8п-гли- церо-3-фосфохолина вводят во взаимодействие с 0,7 мг ацетангндрида в 4мл безводного пиридина в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают затем в ледяную воду, дважды экстрагируют смесью хлороформа с метанолом (2:1 по объему) . Объединенные органические фазы дважды промьшают смесью хлороформа с метанолом и водой (3:48:47 по объемам) , сушат над бикарбонатом натрия и выпаривают. Неочищенный продукт очищают с помощью хроматографии под умеренным (средним) давлением на силикагеле с помощью хлороформ-мета- нольных градиентов. Чистый- продукт (180 мг, выход 51%) в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол : 25%- ньш водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показьшает единое пятно; ,6.
Я 1Р- Н спектр, f м.д. (CDClj-CDjOD 2:1 по объему): 2,13 ( - СО, син- глет, ЗН)-, 3,16 (НзС-Nt синглет,9Н), 3,3-4,4 (глицерол и холин - СН), 5,23 (глицерол - С-Н, 1Н), 7,33 (ароматические, 15Н).
Б). 2-Ацетш1-8п-глицеро-3-фосфо- холин.
в). 1-Пальмитош1-2-ацетил-8п-гли- церо-3-фосфохолин.
От 1- 0-трифенил-метил-2-ацетил- -Sn-глицеро-3-фосфО Холина по указанной в примере 1 (стадия Б) методике отщепляют ИО -трифенилметильную группу и вводят образовавшийся 2-ацетил- .-8п-глицеро-3-фосфохолин во взаимодействие с ангидридом пальмитиновой кислоты по указанной в примере 1 (стадия Б) методике с получением 1-пальмитоил-2-ацетил-5п-глицеро-3- -фосфохолина.
Пример 5. А). 1-О-Трифенил- метил-2-метоксиацетш1-8п-глицеро-3- -фосфохолин.
316 мг 1-0-трифенилметил-8п-гли- церо-3-фосфохолина вводят во взаимо-г действие с метоксиацетил1с 5идазолидом, который получен из 90 мг метоксиук- сусной кислоты и 17-8 мг карбонилди-i имидазола по указанной в примере- 1
51
(стадия A) методике,, и обрабатывает. Получают 250 мг (выход 69%) чистого |-0-трифенилметил-2-метоксиацетил- -Sn-глицеро-З-фосфохолина, который в. тонкослойной хроматограмме (растворитель - хлороформ : метанол-: : 25%-ный водный раствор аммиака в соотношении 65s35:5 по объемам) показывает, единое пятно f Oj25.
Б). 2-Метоксиацетил-8п глицеро- 3-фосфохолин,
В). 1-Стеароил-2-метоксиацетш1- -Sn-глицеро-З-фосфохолин.
От 1-0-трифенилметил-2-метокси- ацетил-8п-глицеро-3-фосфохолина по указанной в примере 1 (стадия Б) методике отщепляют 1-0-трифенилметш1ь- ную группу, образовавшийся при этом 2-метоксиацетш1-8п-глицеро-3-фосфо- холин вводят, как в примере 2, во взаимодействие с ангидридом стеариновой кислоты с получением 1-стеаро- ил-2-метоксиацетил-5п-глицеро-3-фос фохолина и хроматографически очищают Выход 166 мг (64% от теории) , Кл 0,35 (растворитель - согласно примеру 1).
Рассчитано: С 58,47,- Н 9,80, N 2,35i Р 5,20.
C-;gH5gNOgP (595, 750).
Навде-но, С.58,10; Н 10,00, N 2,40; Р 5,10,
ЯМР: 0,9 (ЗН, CHj), 1,3 (СН), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН,), 3,16 (9Н, , N-CHj), 3,52 (ЗН сСсНзО), 3,3-4,4 (BHs СН ,2 глицерол, холин) , 5,,1 (1Н, СН-глицерол), 5,25 (2Н, , 0-СЩ -О) .
Пример 6, А). 1-0-Трифени.п метил-2-(2 -этилгeкcaнoшI)-Sn-гли- цepo-3-фocфoxoлин.
Раствор 250 мг 1-0-трифенилметил- -Sn-глицеро-З-фосфЬхолина вводят во взармодействие с 2-этилгексаноилими™ дазолидом, который получен из 144 мг 2-этилгексановой кислоты и 178 мг карбонилдиимидазола по указанному в примере 1 (стадия А) способу, и об- рабатьшаюТо Получают 200 мг (выход 69%) чистого 1-0-трифенилметил-2-(2 -этилгексаиоил)-5п-глидеро-3-фосфо- холина, который в тонкослойной хроматограмме (растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный водный раствор аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показывает единое пятно ,24,
0051
5
0
6
0
5
0
5
0
5
Б). 2-(2-Этилгексаноил)-8п-глице- ро-3-фосфохолин,
В). 1.Олеоил-2-(2 -этилгексаноил)- -Sn-глицеро-З-фосфохолин.
От 1-0-трифени,пметил-2-(.П- гекс.анош1)-8п-глидеро-3-фосфохолина по указанному в примере 5 (стадия Б) способу отщепляют 1-0-трифенилметиль- ную группу, образовавшийся при этом 2-{2 -этилгексаноил)-8п-глицеро-3- -фосфохолин вводят, как в примере 1 (стадия в), во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением 1-олеоил-2-(2 -этилгексаноил)- -8п-глицеро-3-фосфохолина и хроматографически очищают, выход 177 мг (82% теории)J ,4 (растворитель - согласно примеру 1).
Рассчитано: С 63,03; Н 10,27; N 2,16; Р 4,78.
(647, 876)
Найдено: С 62,90; Н 10,40; N 2,00; Р 4,80.
ЯМР: 0,9 (9Н, СНэ), 1,3 (СН,), 1,6-2,5 (альфа- или бета-СН ), 3,16 (9Н, Г, N-CHg), 3,3-4,4 (8Н, СН,, глицерол, холин), 5,11 (1Н, СН-глицерол) , 5,34 (2Н, олефин).
Пример 7. А). 1-0-Трифенил- метил-2-(1 - )-додеканош1-5п-гли- церо-3-фосфохолин.
100 мг (1 - )-додеканоБой кислоты, 1р Ci (ммоль) и 90 мг карбонилдиимидазола вводят во взаимодействие в течение 45 мин в 30 мл безводного тетрагидрофурана при 20°С. Раствор полученного ацилимидазолида добавляют к 127 мг 1-0-трифенилметил-Sn-гли- церо-З-фосфохолина. После удаления растворителя в вакууме остаток раст- BopjnoT в 1 мл- диметилсульфоксида и осуществляют реакдию путем добавки каталитически действующего кислото- связующего средства, которое получают растворением 23 г металлического натрия в 18 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь, периодически встряхивая, выдерживают в течение 10 мин при 20°С, после этого нейтрализуют путем добавления 10 мл водной уксусной кис- ЛОТ111. Затем экстрагируют дважды по 15 мл смесью хлороформа с метанолом (2:1 по объему). Объединенные органические фазы промывают последовательно по 6 мл раствором хлороформ : : метаной : водный КНз (3:48:47 по объемам) и.хлороформом с метанолом и
10
20
7
водой (3:48: 7 по объемам). После удаления растворителя в вакууме и выпаривания в присутствии бензола получают неочищенный продукт, который путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле очищают с помощью хлороформ-мета- нольных градиентов, при этом элюиру- ется 110 мг чистого вещества (выход 82%) при соотношении хлороформ : метанол 6:4 (по объему).
Чистое вещество в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - хлороформ с метанолом и 25%- ным водным раствором аммиака в соотношении 65:35:5 по объемам) показы- вае-в единое пятно; R 0,25. Радио- активность составляет Gi (ммоль).
ЯМР- Н-спектр: м.д. (CDClj - CDjOD 2:1 по объему), 0,90 (ацил-СНj, ЗН), 1,26 (СН,, синглет, 16Н), 1,66 (HjC-C-CO, мультиплет, 2Н), 3,16 (HjC - Nt синглет, 9Н), 3,3-4,4 (гли- церол и холин-СН,2 8Н), 5,23 (гли- 25 церол-СН, мультиплет, 1Н), 7,33 (про- матически-, 15Н).
Б). 2-(l - )-Додеканоил-5п-гли- церо-3-фосфохолин.
В). 1-Олеиол-2-(1- )-додекано- ил-Зп-глицеро-З-фосфохолин,
От 1-0-трифенилметил-2-3 (l - С)- -додеканоил-Зп-глицерол-З-фосфохолина по указанному в примере 1, (стадия Б) способу отщепляют 1-0-трифенилметиль- ную группу, образующийся при этом 2-( 1 - С)-додеканойл-5п-глицеро-3- -фосфохолин, как и в примере 1 (стадия В), вводят во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением 1-олеоил-2-(1 - С)-додекано- ил-Зп-глицеро-З-фосфохолина и хррма- тографически очищают/Выход 102 мг (89% теории)J ,4 (растворитель - согласно примеру 1).
C gR +NOgP (703, 983) - радиоактивно маркированный материал.
ЯМР: 0,9 (6Н, CHj), 1,3 (СН), 1,6- 2,3 (альфа- и бета-ОТ), 3,16 (9Н, -f, N-СНз), 3,3-4,4 (8Н, СН, глицерол.
холин), 5,1 (1Н, СН-глицерол), 5,34 (2Н, олефин).
Пример 8. А). 1-0-Трифенил- метил-2-(9,10-дибромстеарош1)-5п-гли- церо-3-фосфохолин.
300 мг 1-0-трифенилметил-5п-глице- ро-3-фосфохолина по указанному в примере 4 (стадия А) способу вводят во взаимодействие с 1,3 г ангидрида
UOO
15
30
35
40
45
50
10
20
25
OOSn8
9,10-дибромстеариновой кислоты в при-, сутствии 300 мг 4-N-N-ДИМетиламинепиридина в 20 мл хлороформа в течение 5ч при 20 С и обрабатывают. Получают 460 мг (выход 82% )чистого 1-0- -трифенилметил-2(9,10 -дибромстеа- роил-Зп-глицеро-З-фосфохолина , который в тонкослойной хроматографии (растворитель - хлороформ : метанол : : 25%-ный водньш аммиак в соотношении 65:35:5 по объемам) показьшает единое пятно; ,3.
Б). 2-(9,10 -Дибромстеароил)-5п- 15 -глицеро-3-фосфохолин.
В). 1-Стеароил-2-(9 ,10 -дибром- стеароил)-8п-глицеро-3-фосфохолин. От 1-0-трифенилметил-2-(9,10- -дибpoмcтeapoшI)-Sn-глицepo-3-фoc- фoxoлинa по указанному в примере 1 (стадия Б) способу отщепляют 1-0-три- фенилметильную группу, образовавшийся при этом 2-(9,10 -дибрбмстеаро- ил)-Sn-глицеро-3-фосфохолин, как указано в примере 2, вводят во взаимодействие с ангидридом стеариновой кислоты с получением 1-стеарош1-2- -(9,10 -дибромстеароил)-5п-глицеро- -3-фосфохолина и хроматографически очищают. Выход 353 мг (75% от теории); ,4 (растворитель - по примеру 1).
Рассчитано: С 55,75; Н 9,14; Вг 16,86; N 1,48; Р 3,27, С44Н g BrjNOgP (947-, 969). Найдено: С 55,50- Н 9,20; Вг 17,10; N 1,30; Р 3,10.
ЯМР: 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (GHj), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН), 3,16 (9Н, N-CHj), 3,3-4,4 (8Н, СНi, глицерол, холин), 5,1 (ЗН, СН-глицерол, СН-Вг).
Пример 9. А). 1-0-Трифенил- метш1-2-арахидоноил Зп-глицеро-3-фос- фохолин.
550 мг 1-0-трифенилметил-5п-гли- церо-3-фосфохолина (согласно примеру 1) указанным в примере 8 способом вводят во взаимодействие с 1,50 г ангидрида арахидоновой кислоты в атмосфере аргона, после добавки 15 мл метанола промывают с помощью 9 мл смеси хлороформ : метанол : вода (3:48:47 по объемам),-нижнюю фазу выпаривают в вакууме, доводят досуха . и очищают путем хроматографии под средним (умеренным) давлением.
Получают 750 мг (выход 80%) чистого 1-0-трифенилметш1-2-арахидоноил- -Sn-глицеро-З-фосфохолина, который
30
35
40
45
50
1400511
В тонкослойной хроматограмме (раст- роритель - хлороформ : метанол : 25% иый водный аммиак в соотношении 65: :35;5 по объемам) показывает единое Пятно i R|.0,, 3,
Б). 2 Аракидоноил-8п-глицеро-3-фО СФОХ оЛИН,
В). 1, Стеарош1 2-арахидоноил-5п- глицеро-3-фосфохолин.
От 1-0-трифенилметил-2-арахидоно ич-Sп-глидеро-З-фосфохолина указан- йнм в примере 1 (стадия Б) способом фтщешшгот 1-0-трифенш1метильну1о груп ib/, образовавшийся при этом 2-ара- хидоноил-5п-глицеро-3-фосфохолин, как и в примере 2, вводят во взаимо действие с ангидридом стеариновой кислоты. Получеиньш 1-стероШ1-2-ара идоноил-3п тлидеро-3-фосфохолин |:роматографически очищают. Выход 433 мг (82% от теории); ,38 (растворитель - по примеру 1).
Рассчитано: С 69,85; Н 11,32; N 1,61; Р 3,,55„
C. (872, 311) I Найдено: С 68,60; н 11,50j М 1,50; Р .
ЯМР: 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (СН), ,6-2,3 (альфа- и бета-СН-г,), 2,8 6Н, С-СН,-С ), 3,i6 (9Н, S, -СНр, 3,3-4,4 (8Н, CHj, глицерол, олин), 5,1 (1Hj, СН-глицерол), 5,35 (jBH, олефин),
Пример 10. А). 1-0-Трифе- Инлмет1ш-2-тетракозайоил 5п-глицеро- 13-фо сфохолин.
j 316 мг 1-0-трифенилметил-Зп-гли- Церо-З-фосфохолина указанным в при- Яере 1 (стадия-А) способом вводят во взаимодействие с тетракозаноилимидаз Лидом, который получен из 1,7 г тет ракозановой кислоты и 356 мг карбо- нилимидазола, и обрабатывают. Получа ют 850 мг (вьпсод 62%) чистого 1-0- -трифенш1метил-2-тетракозаноил-8п- -глицеро-3-фосфохолина, который в тонкослойной хроматограмме (растворитель - раствор хлороформа с мета- нюлом и 25%-ным водным аммиаком, взя тых в соотношении 65:35:5 по объе- ) показывает единое пятно Е ,3,
Б). 2-Тетракозаноил-8п-глицеро- -3-фосфохолин.
в). 1-Олеоил-2-тетракозаноил-5п- -глицеро-З-фосфохолин.
От 1 0-трифенилметш1-2-тетрако- заноил-Зп-глицеро-З-фосфохолина указанным в примере 1 (стадия Б) спосо
10
0
5
0
5
В
0 5 0
5
0
GOM отщепляют 1-0-трифенилметш1ьную группу, образовавшийся при этом 2- -тетракозаноил-8п-глидеро-3-фосфохолин, как и в примере 1 (стадия В), вводят во взаимодействие с ангидридом олеиновой кислоты с получением 1-олеоил-2-тетракозаноил-5п-глицеро- -3-фосфохолина и хроматографически очищают. Выход 610 мг (70% теории), ,42 (растворитель - по примеру 1 ).
Рассчитано: С 68,85 Н 11,32; N 1,61; Р 3,55.
CsoHggNOgP (872, 311)
Найдено; С 68,70- Н 11,40$ N 1,70; Р 3,70.
ЯМР: 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (СН), 1,3 (СН), 1,6-2,3 (альфа- и бета- GH.,), 3,16 (9Н, S, N-CHj), 3,3-4,4 (8Н, глицерол, холин), 5,1 (СН-гли- дерол), 5,36 (2Н, олефин),
Пример 11. А). 1-0-Трифе- нилметш1-2-олеош1-8п-глицеро-3-фос- фо-(К-трифенш1-метил)-этаноламин.
386 мг олеиновой кислоты и 255 мг карбонилдиимидазола в 10 мл тетра- гндрофурана перемешивают в течение 45 мин при комнатной температуре в отсутствие влаги. После введения 480 мг 1-0-трифенилметш1-8п-глидеро- -3 фосфо-(К-трифенилметш1)-этанолами- на в раствор олеоилимидазолида добавляют 3,1 мл раствора 41 мг металлического натрия в диметршсульфоксиде. Оставляют реагировать в течение 20 мин при комнатной температуре и нейтрализуют затем 17,8 мл 0,1 н. водной ук- сусной кислотой. Помещают в ледяную воду, трижды экстрагируют дйэтиловым эфиром, объединенные органические фазы дважды промывают водой, сушат над , затем удаляют растворитель в вакузп е. После очистки путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов петролейньш эфир - хлороформ получают 633 мг чистого целевого соединения. Тонкослойная хроматография продукта на сипикагеле (растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 9:1 по объему) показьшает единое пятно, ,6.
ЯМР- Н-спектр: сГм.д.. (CDCl,): 0,88 (-CHj), 1,26 (), 1,8-2,3 (-СН,-СН2-С С-, СНг-С 0), 3,1- 4,3 (глицерол и этаноламин С-Н), 5,1 (глицерол-Сг-С-Н, олеоил НС1СН), 7,25 (трифеншр етил, С-Н).
В). 2-Олеаил-8п-глицеро- 3-фосфо- (К-трифенилметш1)-этаноламин.
Раствор А06 мг 1-0-трифенилме гнл- -2-олеоил-8п-глицеро-3-фосфо-(Ы-трн фенилметил)-этаноламина в смеси из 30 мл метиленхлорида и 1 мл 20%-ного раствора трифторида бора в метаноле перемешивают в течение 30 мин при 0°С. Затем добавляют 30 мл метиленхлорида, трижды промывают водой и высушивают органическзто фазу над Na2S04.
В). 1-Пальмитоил-2-олеоил-Зп-гли- цepo-3-фocфo-(N-тpифeнилмeтил)-этa- ноламин.
К раствору полученного 2-олеош1- -5п-глицеро-3-фосфо-(Ы-трифенилметил -этаноламина добавляют 1,3 г ангидрида пальмитиновой кислоты и 230 мг диме- тиламинопиридина. Реакционную смесь перемешивают в течение 6 ч при . Затем растворитель удаляют в вакууме После хроматографии остатка на сили- кагеле с помощью градиентов петро- лейный эфир - хлороформ получают 361 мг чистого ацилированного продукта. Соединение при тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 9:1 по объему) показьшает единое пятно; R.,,0,6.
ЯМР- н-спектр: .д. (ССС1з),0,88 (-СНэ), 1,22 (), 1,55 (-СН-Ч-СО 1,8-2,3 (-CHi-CH,j-C, ), 3,1- 4,3 (глидерол и этаноламин С-Н), 5,1 (глицерол С-Н, олеош1-СН СН), 7,25 (трифенилметил С-Н).
Г), 1.Пальмитоил-2-олеоил-Зп-гли- церо-3-фосфоэтаноламин.
N
N
-
,
10
АОи311 2
по объема м) показьшает единое пятно, ,,5. Выход 127 мг (83% теории).
Рассчитано: С 65,24; Н 10,67, t,95; Р 4,31.
CjjIbr OgP (718, 01 1)
Найдено: С 65,00; Н 10,80; 2,00; Р 4,20.
ЯМР: 0,9 (6Н, СН), 1,3 (СП,,), . 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН,), 3,. ,3 (8Н, СН, глицерол, зтаноламин), 5,1 (1Н, СН-глидерол), 5,,38 (2Н, олефик).
Пример 12„ А). 1-0-Трифенил- метил-2-линолеоил 5п-глицеро-3-фосфо- 15 - (М-Грифенилметил)--этанолам11н.
464 мг линолеьой кислоты и 365 мг карбонилдии цтазола в 15 мл тетрагид- рофурана вводят во взаимодействие в течение 45 мин при 20 С. Раствор образовавшегося ацилимидазолина добавляют к 530 мг 1-0-трифенш1метил-5п- -глицеро-З-фосфо-(Н-трифенилметил)- -зтаноламина. После удаления растворителя в вакууме остаток растворяют 25 в 15 мл д1-1метилсульфоксида, реакщ-ис вызывают, добавляя каталитически действующее связывающее кислоту средство, которое получают путем растворения 49 мг металлического натрия в 3,7 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь, периодическ15 встряхивая, выдерживают в течение 20 мин при 20 С, нейтрализуют с помощью 10,4 мл водного 0,1 Н..раствора уксусной кислоты. Затем зкстрагируют дважды по 20 мл смесью хлороформа с метанолом (2:1 по объему). Объединенные органические фазы последовательно промьшгиот
20
30
35
Изобретение касается получения производных глицеРОФОСФОЛИПИДОВ (ГФП), в частности соединений общей формулы Rj-C(0)-CHKM, где К (0)R3J М CH.jOP(0)0-OCH CHjN+ (R,)i, где R, Н или CHj; R 1 - прямой или Cj-C изоалкил, С ,j-C 514 злкенил (с одной или полиненасыщенными связями); CHjOCHj , СН з(СН -2.)i СНВг - СНВг - (СИ i)-, i Rj прямой Cjj-С ,7 алкил, мононенасыщенный С -С ,,,-алкенил, которые как активные вещества применяют в медицине. Цель изобретения - повьше- ние выхода ГФП и упрощение процесса. Синтез ГФП ведут ацилированием три- фенилметильного производного 8п-гли- церо-3-фосфолипида с помощью R2C(0)OH и кapбoнилдиliмиДaзoлa или ангидрида соответствующей кислоты. Затем проводят обработку полученного ацилпроизводного BF в смеси метанола и при , отщепление трифенилметильной группы, адилирова- ние ангидридом R з кислоты в присутствии , N,Ы-диметилиламинопир1зди- на. В случае, когда получают соединение с трифенилметильной группой, последнюю отщепляют обработкой CFjCOOH при 0°С. Способ позволяет получать чистые промежуточные продукты с высокими выходами (82% и выше) и лучшим выходом целевого ГФП 
НОЛ : водный NHj в соотношении
(по 8 мл) смесью хлороформ : мета- Раствор 190 мг 1-пальмитоил-2-оле- .Q ош1-3п-3-глицеро-(N-трифенилметил)- -этаноламина в 12 мл смеси из 6 мл
метиленхлорида и 6 мл трифторуксусной кислоты в отсутствие влаги оставляют стоять в течение 5 мин при 0°С, после чего нейтрализуют с помощью 23 мл 6%- ного водного раствора аммиака. Вод- кую фазу отделяют и экстрагируют смесью хлороформа с метанолом (2:1
.по объему). Объединенные органические фазы промывают водой. После удаления растворителя В вакууме неочи45
50
3:48:47 по объемам и хлороформ с метанолом и водой, взятые в соотношении 3:48:47 по объемам. После уда ления растворителя в вакууме и выпа ривания в присутствии бензола получают неочищенньй продукт, который после очистки путем хроматографии под средним (умеренным) давлением н окликагеле с помощью градиентов хло роформ - метанол дает 670 мг (выход 92%) чистого соединения. Чистое сое динение в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - ме танол : хлороформ в соотношении 8:3 по объему) показывает единое пятно
щенньм продукт очищают путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол. Соединение в случае тонкослойной хроматографии на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол : 25%-ный раствор аммиака в соотношении 30:25:6
НОЛ : водный NHj в соотношении
(по 8 мл) смесью хлороформ : мета- .Q
5
0
5
3:48:47 по объемам и хлороформ с метанолом и водой, взятые в соотношении 3:48:47 по объемам. После удаления растворителя в вакууме и выпаривания в присутствии бензола получают неочищенньй продукт, который после очистки путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на окликагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол дает 670 мг (выход- 92%) чистого соединения. Чистое соединение в тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - метанол : хлороформ в соотношении 8:3 по объему) показывает единое пятно;
,61.
Б). 2-Линолеоил-5п-глицеро-3-фос- фо-(N-1 рифенилметил)-этаноламин.
Из 435 мг 1-0-трифенилметил-8п- -глицepo-3-фocфo-(N-тpифeиилмeтил)- -этаноламина согласно указанному в примере 11 (стадия Б) способу отщеп- ляют 1-0-трифенш1метильную группу с 0,5 мл 20%-ного раствора трифтори да бора в метаноле.
В). 1-Олеоил-2-линолеоил-8п-глице рр-3-фосфо- (М-трифенилметил)-этанол- амин.
Г), 1-Олеоил-2-линолеоил-Зп-гли- ц ро-3-фосфоэтаноламин.
: 2-Линолеоил Зп-глицеро-3-фосфо- -|(К-трифенилметил)-этаноламин анало гично способу, изложенному в приме- p.11 (стадия В), путем взаимодей- сгвия с ангидридом олеиновой кислоты адилируется до 1-олеоил-2-динолеоил- - п-глицеро-3-фосфо-(Н-трифенилме- тш)-этаноламина и от него аналогично способу, указанному в примере 11 (стадия Д), от1депляют N-трифенияме- тйльную группу. Выход 265 мг (79% теории); Rr,0,5 (растворитель - по 1фим :эру 11),,
Рассчитано; С 66,37 Н 105,52 N 1,89i Р 4,17, : C4iH7 NOgP (742, 041) ; Найдено: С Н
N|1,70; Р 4,00,
I ЯМР: 0,9 (6Н, ОН 3)5 1.,3 (СН ) 116-2,3 (альфа- и бета-СН), ( .,-0) , 3,1-453 (8И, гдицерол, этаноламиц), 5,1 (1Н,, СН гЛ дцерол)-5 5j:36 (бН,- олефин).
Пример 13. А), .ифенил м ;тил-2-стеароил-8п-глицеро-3-фосфо - Н трифенш1метил)-этаноламин.
Получают ан.апогично примеру 12 стадия А), путем взаимодействия ЗоО мг 1-0-трифенилметил 5п-глицеро- 5-фосфо-(N-трифенилметнл)этанолами- ни с 350 мг стеароилимидазолида.
В) . 2-Стеароил-8п-глицеро-3-фосфо -(Ы-трифенилметш1)-этаноламин полу- ч;1ют путем отщепления 1-0-трифенил- метильной группы от полученного на С гадии А продукта .указанным в приме™ ре 11 (стадия: Б) способом,
В). 1-Олеоил-2-стеароил-5п-глице- РО-3-фосфо-(К -трифенш1метил)этанол- ar-sHH.
Г); 1-Олеоил 2-стеароил Зп-глш ;е рд-3 фосфоэтаноламин,
Полученный на стадии .Б 2--стеароил -Sn-глидеро-З-фосфо-(Ы-трифенилметил эфаноламин аналогично способу по примеру 11 (стадия Б) вводят во вза
5
о
„
5
5
,ействие с 1,5 г ангидрида олеи- : новой кислоть с получением 340 мг 1-олеоил-2-стеароил-8п-глицеро-3-фос- фо-(Н-трифенилметил)-этаноланина. Детритшхирование по примеру 5 (стадия Г) дает 250 мг 1-олеоил-2-стеа- роил-Зп-глицеро-З-фосфоэтаноламина, из которого путем хроматографии на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол получают 140 мг (56,4% теории) чистого продукта, показывающего в тонкослойной хро- матограмме (растворитель - хлоро- ;... форм : метанол : 25%-ный водный раствор аммиака в соотношении 50:25:6 по объемам) единое пятно, ,5.
Рассчитано: С 66,01j Н 10,81,- N 18,8i Р 4,15.
G. (746, 061)
Найдено: С 65,90; Н 11,00- N 1,70; Р 4,00.
ЯМР: 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (CHj), ,3 (альфа- и бета-СН), 2,08 (ЗН, S, ), 3,1-4,3 (8Н, СН, гли цepoлJ этанол-силин); 5,1 (1Н, СН- . глицерол),
Пример 14. А). 1-0-Трифенил- ме тил-2-аце тил-Зп-глицеро-З-фо сфо- -(N-трифенилмётил)-этаноламин,
300 мг 1-0-трифенилметил-Зп-гли- деро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этанол- амина вводят во взаимодействие с 500 мг ацетангидрида в 5 мл безводного пири- дкна в течение 20 ч при 20 с, затем выливают в 50 мл ледяной воды и дважды экстрагируют смесью хлороформа с метанолом 2:1 (по объему). Объединенные органические фазы дважды промывают смесью хлороформа с метанолом и водой, взятых в соотношении 3:48:47 (по объемам), сузиат над бикарбонатом натрия и доводят косука в вакууме. Остаточный пиридин удаляют путем выпаривания в присутствии толуола. Неочищенный продукт очищают путем хроматографии под средним (умеренным) давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол. Полученное чистое вещество (128 мг, выход 40%) на тонкослойной хромато- грамме на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 8;2 по объему) показывает единое пятно;, ,50.
ЯМР-МЬспектрг сГм.д. (CDClj - CDjOD по объему), 2,0 (HjC-C-CO, синглетр ЗН), 2,8-4,2 (глицерол и холин-СН), 5,16 (глидерол-СН, мультигашт, 1Н), 7,23 (ароматичесиир, ЗОН).
1-0-Трифенилметил-2-ацетил-5п-гли- церо-3-фосфо-(Ы-трифенилметил)-эта- ноламин способами, использованными на стадиях Б, В и Г примера 11, превращают в следующие продукты:
Б). 2-Ацетил-5п-глицеро-3-фосфо- -(К-трифенилметил)-этаноламин.
В). 1-Пальмитош1-2-ацетил-8п-гли- церо-3-фосфо-(Н-трифенилметил)-эта- ноламин.
Г). 1-Пальмитош1-2-ацетш1-8п-гли- церо-3-фосфоэтаноламин.
Выход 58 мг (68,5% теории)j R 0,38 (растворитель - по примеру 11).
Рассчитано: N 2,83, Р 6,25.
Найдено: N 2,70; Р 6,10.
ЯМР: 0,9 (ЗН, CHj), 1,3 (СН), 1,6-2,3 (альфа- и eeTa-CHj), 2,08 (ЗН, S, СНэСО), 3,1-4,3 (8Н, СН, бе- та-глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол).
Пример 15. А). 1-0-Трифенил- метил-2-пропионил -8п-глицеро-3-фосфо- -(К-трифенш1метил)-этаноламин.
450 мг 1-0-трифенилметил-8п-глице- ро-3-фосфо-(Ы-трифенш1метил)-этанол- амина (согласно примеру 2) вводят во взаимодействие с 900 мг пропионового ангидрида в 10 мл пиридина при 30 С, как в примере 14 (стадия А), с получением 1-0-трифенш1метил-2-пропионил500 мг 1-0-трифенилметил-8п-гли- церо-3-фосфо-(Ы-трифенилметил)-эта-.-8п-глицеро-3-фосфо-(Ы-трифенш1метш1)-35 ноламина ацилируют изобутирилимидазо40
45
-этаноламина, обрабатывают и очищают. Выход 220 мг (45% от теории). ,5. Полученньй продукт превращают как в примере 11 (стадии Б, В и Г), в следующие соединения:
Б). 2-Пропионил-8п-глицеро-3-фосфо- -(N-тpифeншIмeтил)-этaнoлaмин.
В). 1-Пальмитоил-2-пропионил-8п- ,-глицеро-3-фосфо-(К-трифенш1метил)- ; -этаноламин.
Г). 1.Пальмитоил-2-пропионш1-8п- -глицеро-3-фосфоэтаноламин.
Выход 93 мг (63% теории). ,4 (растворитель - по примеру 11).
Рассчитано: N 2-,75j Р 6,08. 50
C H gNOgP (509,- 620)
Найдено: N 2,60 Р 5,80.
ffl-IP: 0,9 (2Н, СНз), 1,3 (СЕ), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН. бета-СН), 3,1-4,3 (8Н, СН, глицерол, этанол- 55 амин); 5,11 (1Н, СН-глицерол).
Пример 16.. А). 1-0-Трифенш1- метил72-бутирил-8п-глицеро-3-фосфо- -(N-трифенилметил)-этаноламин.
лидом, который получен ит 132 мг масляной кислоты и 267 мг карбонилдиимидазола, как описано в примере 12 (стадия А), обрабатьшают и очищают. Полученный продукт (272 мг, выход 50%, ,53), на силикагеле, растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 8:2 по объему) имеет следующие спектроскопические данные:
ЯМР- Н-спектр: м.д. (CDClj-CDjOD 2:1 по объему): 1,2 (CHj, 6Н), 2,5- 3,9 (глицерол и холин-СН, 8Н), 5,26 (глИцерол-СН, мультиплет, 1Н), 7,23 (ароматические, ЗОН).
1-О-Трифенилметил-2-изобутирил- -8п-глицеро-3-фосфо- (Jsl-трифенилме- тил)-этаноламин по примеру 12 (стадии Б, В и г) превращают в следующие соединения:
Б). 2-ИзобутирШ1-8п-глицеро-3- -фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.
в). 1-Олеоил-2-изобутирил-5п-гли- церо-3-фосфоэтаноламин.
5
0
5
0
50 мг 1 0-трифенилметил-3п-глтице- ро-З-фосфо-(Н-трифенилметил)-этанол- амина ацилируют бутирилимидазолидом, который получают из 132 мг масляной кислоты и 267 мг карбонилдиимидазола, как в примере 12 (стадия А), обраба- тьшают и очищают. Полученный продукт (300 мг, выход 56%, R.0,52, на си- ликагеле, растворитель - хлороформ : : метанол в соотношении 8:2 по объему) , описанными в примере 11 (стадии Б, В и Г) способами превращают в следующие соединения:
в); 2-Вутирил-8п-глицеро-3-фосфо- -(N-трифенилметил)-этаноламин.
в), 1-Пальмитоил-2-бутирил-5п- -глицеро-З-фосфо-(М-трифенилметил)- -этаноламин.Г). 1-Папьмитоил-2-бутирш1-8п- -глидеро-3-фосфоэтаноламин,
Выход 110 мг (54% теории), R 0,44 (растворитель - по примеру 11).
Рассчитано: N 2,68, Р 5,91 .
C gH pNOgP (523, 648)
Найдено: N 2,70, Р 5,70.
ЯМР: 0,9 (6Н, CHj), 1,3 (СН), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН), 3,1 - 4,3 (8Н, СН, глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол).
Пример 17. А). 1-0-Трифенш1- метил-2-изобутирш1-8п-глицеро-3-фост фо-(К-трифенилметил)-этаноламин.
500 мг 1-0-трифенилметил-8п-гли- церо-3-фосфо-(Ы-трифенилметил)-эта-.5 ноламина ацилируют изобутирилимидазо0
5
0
5
лидом, который получен ит 132 мг масляной кислоты и 267 мг карбонилдиимидазола, как описано в примере 12 (стадия А), обрабатьшают и очищают. Полученный продукт (272 мг, выход 50%, ,53), на силикагеле, растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 8:2 по объему) имеет следующие спектроскопические данные:
ЯМР- Н-спектр: м.д. (CDClj-CDjOD 2:1 по объему): 1,2 (CHj, 6Н), 2,5- 3,9 (глицерол и холин-СН, 8Н), 5,26 (глИцерол-СН, мультиплет, 1Н), 7,23 (ароматические, ЗОН).
1-О-Трифенилметил-2-изобутирил- -8п-глицеро-3-фосфо- (Jsl-трифенилме- тил)-этаноламин по примеру 12 (стадии Б, В и г) превращают в следующие соединения:
Б). 2-ИзобутирШ1-8п-глицеро-3- -фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.
в). 1-Олеоил-2-изобутирил-5п-гли- церо-3-фосфоэтаноламин.
Выход 106 мг (55% теории)J Rf 0,44 (растворитель - по примеру 11 Рассчитано: N 2,55; Р 5,63. C HjjNOgP (549, 686) Найдено: N 2,40, Р 5,60. Пример 18-. А). 1-0-Трифенил метил-2-(3-трифторметилбутирил)-5п- -глице ро-3-фо сфо-(N-трифе нилме тил)- -этаноламин.
900 мг 1-0-трифенилметил-Зп-глице ро-3-фосфо-(Я-трифенилметш1)-этанол- :амина и 500 мг З-трифтЬрметилбутнрил : ангидрида EI 50 мл метилен хлорид а пос iпе добавления 300 мг 4-М,Ы-диметил- i аминопиридина перемешивают в течение |4 ч при 20 С, После добавки воды - IBстряхивают, органическую фазу су- |шат над Na,S04 и выпаривают в ваку-i |уме. После очистки неочищенного про- |дукта путем хроматографии под сред- ним (умеренным) давлением на силика- ;геле с помощью градиентов хлороформ :метанол в присутствии 0,5. об.% вод- :ного раствора NH получают 820 мг (выход 76%э Кг 0,50, на силикагеле растворитель - хлороформ : метанол 8:2 по объему) 1-0-трифёнилметйл-2- Н(3-трифторметш1бутнрил)-3п-глицеро- -3-фосфо-(№-трифенилметил)-этанолами а. Этот продукт аналогично примеру |l 1 (стадии Б, В и Г) превращают в
следующие соединения: I .
Б), 2-(3 -Трифторметилбутирил)- :-8п-глицеро-3-фосфо-(Ы-трнфенш1ме- -гчл)-этаноламин.
I В). 1-Пальмитоил-2-(3 -трифторме- |тнлбутирил)-Sn-глицеро-3-фосфо-(N- |- 1 рифенилметял)-этаноламин, г) 1-Пал:ьмитоил-2-(3 -трифторме- тилбутирш1)-5п-глицеро-3-фосфоэта- ноламин.
Выход 279 мг (49,5% теории) R. 0,42 (растворитель - по приме- РУ 11).
Рассчитано: С 52,79i Н 8,35., F 9,63i N 2.,37i Р 5,23.
(591, 624)
Найдено: С 52,50; Н 8,40 Р 10,00; N 2,20- Р 5,20.
ЯМР: 0,9 (ЗН, СНэ), 1,3 (СН,;,), 1,6-2,5 (альфа- и бета-СН, гамма- СНз), 3,1-4,5 (9Н , СНа, глицерол, Фтаноламин, CH-CFj), 5,1 (1Н, СН- глицерол).
Пример 19. А). - -О-Трифе- иилметил-2-(2 -бутилгексаноил)-5п- глице ро- 3-фо сфо- (N- трифен илме тил ) - -этаноламин.
430 мг 1-0-трифенилметш1-8п-гли- церо-3-фосфо-(N-трифенилметил)-эта- ноламйна ацилируют с помощью 2-бу- тилгексаноилимидазолида, которьй получен из 200 мг 2-бутилгексановой кислоты и 210 мг карбонилдиимидазола, как в примере 12 (стадии А), обраба- тьшают и очищают. Полученный продукт
(370 мг, выход 70%; R 0,55, на
силикагеле, растворитель - хлороформ: :метанол в соотношении 8:2 по объему) по примеру 11 (стадии Б, В и Г) превращают в следующие соединения:
Б). 2-(2 -Бyтилгeкcaнoил)-Sn-гли- цepo-3-фocфo-(N-тpифeнш мeтшI)-этa- нoлaмин .
в). 1-Пальмитош1-2-(2 -бутилгек- саноил)-8п-глицеро-3-фосфо-(К-трифенш1метил)-этаноламин.
Г). 1-Пальмитоил-2-(2 -бутилгек- саноил)-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламийе
Выход 139 мг (51% теории)J R 0,5 (растворитель - по примеру 11). Рассчитано: N 2,30; Р 5,10. (607, 81) Найдено: N 2,1; Р 4,8. ЯМР: 0,8 (9Н, СНз), 1,3 (СН ), 1,6-2,3 ( и р-СН), 3,1-4,3 (9Н, СН глицерол этаноламин СН-СО), 5,1 (1Н, СН-глицерол).
Пример 20, А). 1-0-Трифенил- метип-2-арахидоноил-Зп-глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметкл)-этаноламин.
500 мг 1-0-трифенилметш1-8п- глице- ро-3-фосфо-(М-трифенш1метил)-этанол- амина и 890 мг ангидрида арахидоно- вой кислоты в 50 мл метиленхлорида
после добавки 400 мг ,N-димeтил- аминопиридина перемешивают в течение 4 ч при 20°С. После добавления воды встряхивают, органическую фазу сушат над Na2SO. и выпаривают в вакууме. После очистки продукта путем хроматографии под средним давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол в присутствии 055 об.% водного Мйз получают 520 мг
(выход 82%j R 0,61, на силикагеле, растворитель - хлороформ : метанол в соотношении 8:2 по объему) 1,0-трифенш1метил-2-арахидоноил-Зп- -глицеро-3-фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламина. Этот продукт, следуя примеру 11 (стадии Б, В и Г) превращают в ,соединения:
Б). 2-Арахиданоил-8п-глицеро-3- -фосфо-(N-трифенилметил)-этаноламин.
У14005
в) . 1-Пальм11Тоил-2-арахидоионл- -Sn-глицеро-З-фосфо-(N-трифеннлме- тил)-этаноламин.
Г). 1-Пальмитоил-2-арахидоноил- -8п глицеро-3-фосфоэтаноламин.
Выход 119 мг (20% теории); Ro 0,48 (растворитель - по примеру 11 ).
Рассчитано: С 66,55; Н 10,,Q
N 1,89; Р 4,18.
.NOjP (740, 021)
Найдено: С 66,3-, Н 10,3; N 1,7; Р 4,1.
ЯМР: 0,9 (6Н, CHj), 1,3 (CH,j), 5 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН-г), 2,80 (6Н, 0 C-CHj-C), 3,1-4,3 (8Н, гли- церол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-гли- церол), 5,39 (8Н, олефин).
20
Пример 21. А). 1-0-Трифе- нилметил-2-тетракозаноил-5п-глицеро- -3-фосфо-(N-трифенилметил)-этанол- амин.
500 мг 1-0-трифенилметш1-5п гли- 25 церо-3-фосфо-(Н-трифенилметил)-эта- ноламина (согласно примеру 2) аци- лирзтот тетракозаноилимидазолидом, который получен из 1,57 г тетрако- зановой кислоты и 267 мг карбонил- зо диимидазола, как в примере 12 (стадия А), обрабатьюают и очищают. Полученный продукт (640 мг, выход 90%, R(,6, на силикагеле, растворитель - хлороформ : метанол в соотно- шении 8:2 по объему) по методике примера 11 (стадии Б, В и Г) превращают далее в следующие соединения:
Б). 2-Тетракозанош1-8п-глицеро- -3-фосфо-(N-тpифeнилмeтшI)-этанол- Q амин.
В). 1-Пальмитоил-2-тетракозаноил- -8п-глицеро-3-фосфо-(М-трифенилме- тил)-этаноламино
Г). 1-Пальмитоил-2-тетракозанош1- 5 - Sij- г лице ро - 3-фо сфо э тан оламин.
Выход 296 мг (60,5% теории); R 0,53 (растворитель - по примеру 11)
Рассчитано: С 67,21; Н 11,28,g
N 1,74; Р 3,85.
C jHgeNOgP (806,- 191) Найдено: С 66,9; Н 11,4i N 1,5; Р 3,6.
.ЯМР: 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (СН 5), ,6-2,3 (альфа- и бета-CHj), 3,1-4,3 8Н, СН, глицерол, этаноламин), 5,1 1Н, СН-глицерол).
1120
П Р и м е Р 22, А) 1. 1-Стеаро -ш- .оил-8п-глицеро-3-фосфо-(1 -три- фенщ1ме тип)-этаноламин.
К раствору 2-олеоил-8п-глицеро-3- -фосфо-(Ы-трифенш1метил)-этаноламина который получен из 1,1 г 1-0-тр11фени метил-2-олеоил-8п-глицеро-3-фосфо- -(М-трифенилметил)-этаноламина (см. пример 11, стадии А и Б), в 150 мл метиленхлорида добавляют 3,5 г ангидрида стеариновой кислоты и 625 мг 4-N,N-диметштаминопнридина. Реакционную смесь перемеш1{вают 3 ч при затем смешивают с 45 мл смеси хлороформ : метакол : вода, взятых в соотношении 3:48:47 по объемам, и 75 мл метанола. После встряхивания HIiжнюю фазу отделяют и промывают еще дважды по 45 мл смесью хлороформ : : метанол : водньш аммиак (в соотношении 3:48:47 по объемам, а также один раз смесью хлороформ : метанол : вода (3:48:47 по объемам). После удаления растворителя в вакууме неочищенный продукт очищают путем хроматографии под средним давлением на силикагеле с помощью градиентов хлороформ - метанол, причем получают 990 мг (выход 89%, R 0,6) на силикагеле (растворитель - хлороформ : : метанол в соотношении 9:1 по объему) чистого вещества.
Б). 1-Стеароил-2-олеоил-8п-глицеро.-3-фосфоэтаноламин.
1 г. 1-стеароил-2-олеоил-5п-глице ро-З-фосфо-(Ы-трифенш1метил)-этанол- амина в 30 мл трифторуксусной .кислоты отстаивают в течение 5 мин при 0°С, Обработку осуществляют по примеру 11 (стадия Г). Получают 550 мг чистого вещества (выход 72%), которое на тонкослойной хроматограмме на силикагеле (растворитель - хло- 11оформ : метанол : 25%-ньш аммиак 50:25:6 по объемам) показывает единое пятно-, R 0,5).
Рассчитано: С 66,01 , Н 10,81; N 1,88; Р 4,15.
C4,H,jNOgP
Найдено: С 65,9 Н, 10,9; N 1,9; Р 4j3.
ЯМР: 0,9 (6Н, CHj), 1,3 (Ш,), 1,6-2,3 (альфа- и бета-СН), 3,1 - 4,3 (8Н, CHj, глицерол, этаноламин), 5,1 (1Н, СН-глицерол), 5,35 (2Н, олефин).
21
140051
Пример 23. А). 1-Стеарош1- -2-линолеоил-8п-глицеро-3 фосфо-(N -трифе нилме тил)-э таноламин,
Б) „ 1-Стеароил-2-линолеоил-8п- -глицеро-3-фосфоэтаноламин.
2-Линолеоил-8п глицеро-3-фосфо -(Ы-трифенилметил)-этаноламин, полученный из 700 мг 1-О-трифенилметил- -2-линолеоил-8п-глицеро-3 фосфо-(Н- нтрифенилметил)-этаноламина (см. пример 12, стадии А и Б) в метилен- хлсэрнде, смешивают с 2,2 г ангидрида стеариновой кислоты и 390 мг 4- -N,N-димeтилaминoпиpидинa и перемеши аах: г 3 Ч нри комнатной темнературе. Полученный продукт, как описано в ;приь{ере 11 (стадия Г), вводят во взаимодействие, с трифторуксусной кис лотой и очищают. Получают таким образом 250 мг чистого 1-стеароил-2- -линолеоил-3п глицеро-3-фосфоэтанол- амина 5 который на тонкослойной хромате грамме на силикагеле (растворитель - хлороформ : метанол, как в примере 20) дает единое пятно Rp . Выход 250 мг (46% теории).
Рассчитано: С 66,19; Н 10,57; 1,88; Р 4,16. I C4,H7gNOgP (744, 051) i Найдено; с 66,00; Н 10,70j k 1,70; Р 4,10„
: ЯМРг 0,9 (6Н, СНз), 1,3 (СН),,- р,6-2,3 (альфа- и бета-СН), 2,,75 (СН, С СН2-С), 3,1-4,3 (8Н, СН, лицерол, этаноламин), 5,1 (IH, гли }цгрол), 5,36 ,(4Н, олефин). : Описываемый способ получения про- |1знодных глицерофосфолипидов позво- .тВяет повысить выход целевого продук- ta до 83% (с 48,76%) и упростить процесс благодаря использованию в качестве исходного синтетического три- фенилметильного производного глице- рофосфолипида.
Формулаиз обретения
Способ получения производных глицерофосфолипидов общей формулы
«
0
ОС-ЕЗ
ВгСО-Ш 0CHzOP-OCHaCHaSlRj): о
где R, - водород или CHj,; F;,иR5 различны и означают:
R
R-, 22
- линейный или разветвленный СJ-C2 -алкил, одно- или мно- гократноненасыщенный С 2. алкенил, CHjOCH,, С11зСН(СГрСНг,
CHj(CH,).,CH(Br)CH(Br)-(CHj)7- линейный ,7-алкил, од- нократноненасыщенный .- 10 алкенил,
включающий адилирование производного глицерофосфата, отличающий- с я тем, что, с целью повьшения выхода и упрощения процесса, в качест- 5 ве производного глицерофосфата используют трифенилметильное производное Sn-глицеро-З-фосфолипида общей формулы
НгС-от НО-Ш 0
HgC- О-Р- ОСН2СН2Й(К1)з
. о
где т - С(С,Н,;)з;
R - Н или CHj, или К,-С()з ,
если другие R - Н ацнлирование проводят производным 30 карбоновой кислоты, общей формулы
Ri 3 СООН,
где R имеет указанные значения, и карбонилдиимидазолом или ангид- тс РИДОМ соответствующей карбоновой лоты, полученное моноадилпроизвод- ное общей формулы
О НзСОТ
,0 Нг-с-о-сн о- -
CHgOP-OCH2CH2$(Rib
О
где RI и R. имеют указанные значения 45 обрабатывают трифтористым бором в смеси метанола и хлористого метилена при и полученный после отщепления 1-0-трифенилметильной группы продукт адилируют ангидридом карбо- 50 новой кислоты общей формулы
Rg - СООН,.
где RJ имеет указанные значения; в присутствии 4-N,N-димeтилилaминo- gg пиридина и в случае, если получено соединение общей формулы I, где - трифенилмртил, отщепляют трифторме- тильную группу обработкой трифторуксусной кислотой при 0°С.
| H.Eibl Phospholipide als funv- tionelle Bausteine biologischer Memb- ranen | |||
| - Angewanolte Chemie, 1984, 96, № 4, 247-314-. |
