Способ очистки сырого 4-деметоксидаунорубицина Советский патент 1989 года по МПК C07H15/24 

СП

Изобретение относится к способу очистки антрациклиновых гликозидов селективной адсорбцией на смолах, а именно к очистке 4-деметокси-даунору бицина.

Цель изобретения - создание технологичного способа очистки 4-демет- окси-даунорубицина, позволяющего по.лучить чистый продукт путем селек- тканой адсорбции на смолах.

Пример 1,-Очистка 4-демет- окск-даунорубицина.

15,0 г 4-деметокси-даунорубицина в виде сырья, имеющего титр 78,2% и содержание примесей 18%,растворяют в 3,6 л раствора 0,5% ацетата натрия. Раствор, рН которого с помощью добавления уксусной кислоты доводят до 4,7, адсорбируют на 400 мл смолы I Амберлит XAD 2 (R/Rolmand HaasT в колонке диаметром 7,5 см. Продукт промывают 1000 мл воды и затем элюируют смесью вода.- метанол (5:1 по объему)..В качестве первого элюа- та отбирают 2000 мл раствора, содержащего аглюконы и различные примеси.

Элюирование продолжают смесью вода - метанол (1:1 по объему) и отбирают фракцию 4500 мл: в этом раст- воре элюат содержит 4-деметокси- дауяорубиция -с 10% примесей.

Доводят рН элюата до 2,8 добавлением соляной кислоты и затем элюат концентрируют в вакууме до объема 1500 мл. Доводят рН этого раствора , до 4,0 с помощью добавления концентрированного раствора ацетата натрия, и слабо-кислый раствор адсорбируют на 150 мл смолы СМ Сефароза С1 6В (R) (Pharmacia) со скоростью 150 мл/ Т на колонке диаметром 2,5 см. Пос- ле завершения адсорбции колонку сначала промывают 450 мл воды и затем , элюируют I 0,03%-ной соляной кислотой

Первые 800 мл элюата, содержащие 18% примесей, доводят до рН 4,7 добавлением ацетата натрия и собирают для рецикла раствор сырого 4-деметокси-даунорубицина, который подвергают адсорбции на смолах Амберлит ХАД 2 для первой стадии очистки. Следующий элюат (3500 мл), содержащий чистый 4-деметокси-даунорубицин, концентрируют в вакууме до объема 50 мл.

Добавляют 250 мл ацетона, полученный осадок фильтруют, промывают ацетоном и высущивают. Получают выход 52% (в расчете на исходный сырьевой продукт), очищенного 4-деметокси-даунорубицина, имеющего титр 97% и содержащего менее 3% примесей.

Формула изобретения

Способ очистЬи сырого 4-деметокси-даунорубицина, полученного путем фермеитации или синтеза, о т- личающийся тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, 0,4%-ный водный раствор сырого продукта с титром 78,2% в 0,5% ацетата натрия после доведения рН раствора до 4,7 добавлением уксусной кислоты подвергают адсорбции на колонке 400 мл со смолой Амберлит ХАД-2, затем промывают «водой, элюируют целевой продукт смесью вода:метанол;(5:1 об./об.) и концентрируют в вакууме с последующей реадсорбцией элюата при рН 4 на колонке 150 мл со смолой СМ Сефароза С1 В, после чего промьшают водой, элюируют 0,03%-ной соляной кислотой, выпускают первый элюат и вьщеляют целевой продукт с титром 97% осаждением ццетоном из сконцентрированного в вакууме последующего элюата.

Изобретение касается производства антрациклиновых гликозидов, в частности ояистки 4-двметоксидауио рубицина, используемого в медицине как противоопухолевый препарат. Очистку 0,4%-ного водного раствора исходного вещества с титром 78,2, содержащего 0,5% CH9C(0)ONa, ведут после доведения рН раствора до 4,7 с помощью CH/jC(0)OH и последующей адсорбцией на колонке 400 мл со смолой Амберлит ХАД-2. Затем после про- мьшки водой проводят элюирование целевого продукта водно-метанольиой смесью (5:1 oQ/o6j. Полученный раствор концентрируют в вакууме с последующей реадсорбцией элюата при рН 4 на колонке 150 мл со смолой СМ-Сефа- роза-ClB. После.этого промьшают водой, элюируют 0,03%-ной НС1 и : вьщел ляют целевой продукт осаждением из сконцентрированного под вакуумом элюанта. Эти условия обеспечивают выход очищеиного Ч-деметоксидауно- рубицина до 52% с титром 97% и содержанием менее 3% примесей. (У)