Способ определения амедина Советский патент 1989 года по МПК G01N21/78 

3 (Л

Изобретение касается аналитической химии, в частности определения амедина в фармацевтических препаратах и лекарственных формах. Для повышения точности и чувствительности анализа исходную пробу в водном растворе обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем при PH 2-5 с последующей экстракцией хлороформом, обработкой экстракта водным раствором щелочи и фотометрированием водного слоя.Эти условия позволяют снизить открываемый минимум амедина с 3400 до 7,3 мкг при относительной ошибке ±2 против ±2,54%. 5 табл.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к -способам количественного определения амедина- - 2-диметиламиноэтилового эфира фенил- циклогексилгликолевой кислоты гидрохлорида - экстракционно-фотометричес- ким методом, и может быть применено в фармацевтическом анализе для количественного определения препарата в субстанции, и лекарственных формах.

Целью изобретения является повышение точности и чувствительности определения и расширение области применения способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Определение амедина в субстанции.

В делительную воронку вносят 1 мл водного раствора амедина (0,024 - 0,12 мг в пробе), прибавляют 7 мл универсальной буферной смеси с рН

4,0, 2 мл 0,04%-ного водного раствора реагента и 10 мл хлороформа. Смесь взбалтывают в течение 3 мин, затем оставляют для разделения фаз на 10 мин. После разделения фаз хлороформный слой переносят в делительную воронку, содержащую 12 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия, и встряхивают 10-15 с. После отстаивания фаз отделяют окрашенный щелочной раствор. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектро- колориметра КФК-2 (светофильтр при 590+10 нм, кювета 20 мм). В качестве раствора сравнения берут 0,1 н.раствор гидроксида натрия.

Построение калибровочного графика.

В делительные воронки вносят по 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 и 1,0 мл стандартного раствора амедина, в 1 мл которого содержится 0,12 мг препарата. За4ь

00

со со

Ј

СО

тем во все делительные воронки прибавляют раствор УБС (рН 4,0) до 8 мл, по 2 мл 0,04%-ного раствора реагента и по 10 мл хлороформа и поступают, как указано выше. Используя полученные значения оптической плотности (табл.1), строят калибровочный график.

Подчиняемость закону Бугера-Лам- берта-Бера наблюдается в пределах концентраций амедина 0,024-0,12 мг/мл

Используя калибровочный график, определяют количество анализируемого препарата. Этот метод можно применять для количественного определения амедина как в субстанции, так и в табле- тах.

П р и м е р 2. Количественное оп- ределение амедина в таблетах по 0,003.

Одну таблету взвешивают (точная навеска) и измельчают. Берут около 0,05 (точная навеска) измельченной таблеточной массы, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют и доводят до метки раствором УБС (рН 4)

В делительную воронку вносят 8 мл раствора анализируемого препарата и 2 мл 0,04%-ного раствора реагента. Далее поступают аналогично примеру 1.

Расчет концентрации амедина в таблетах можно производить не только по калибровочному графику, но и по формуле

г 7 D QiQor 12 S:.ҐE Q0

TV :о,оо:Г

40

45

де D - оптическая плотность анализируемого раствора;

1fT - оптическая плотность стандартного раствора амедина (Пст 0,83 при содержании 0,12 мг/мл амедина); 0,00012 -содержание амедина в 1 мл стандартного раствора;

g - точная навеска исследуемой таблеты амедина;

а - точная навеска измельченной массы таблеты амедина, 50 взятая на анализ;

р - объем в котором растворена взятая на анализ навеска

таблеты амедина;

объем исследуемог ра, взятый на анализ; количество амедина в исследуемой таблете.

Q

j

0

5

Q

5

0

5

0

5

Данные о выборе оптимальных условий количественного определения амедина представлены в табл.2 и 3.

Из результатов, приведенных в табл.2, следует, что ионный ассоциат амедина и реагента в наибольших количествах экстрагируется хлороформом при рН 2-5. В дальнейших исследованиях использовали раствор универсальной буферной смеси с рН 4.

Из данных, приведенных в табл.3, следует, что для полного образования ионного ассоциата между амедином и реагентом, необходимо прибавить 1,8- 2,5 мл 0,04%-ного раствора кислотного фиолетового антрахинонового красителя. В дальнейших исследованиях прибавляли по 2 мл раствора указанного реагента.

Для достижения оптимальных условий количественного определения амедина, основанного на взаимодействии препарата с кислотным фиолетовым ант- рахиноновым красителем, необходимо брать 1-2 мл раствора амедина, содержащего в этом объеме 0,024 - 0,12 мг этого препарата, 6-7 мл раствора универсальной буферной смеси с рН 4, 2 мл 0,04%-нога-раствора реагента и 10 мл хлороформа.

П р и м е р 3. Определение амедина в биологическом материале.

К 100 г мелкоизмельченной печени трупа было добавлено 10 мг амедина. и оставлено на сутки при периодическом перемешивании. Исследуемый препарат из печени трехкратно изолируют смесью воды и этанола (1:1), подкисленной до рН 2,0 10%-ным раствором серной кислоты. Объединенные вытяжки фильтруют через 4-5 слои обеззолен- ных бумажных фильтров под вакуумом, отгоняют этанол. Амедин из вытяжек экстрагируют хлороформом из щелочной среды (рН 9,0-11,0). Сухие остатки вытяжек после отгонки хлороформа растворяют в 40-100 мл универсальной буферной смеси (рН 4,0), Для количественного определения берут 1-2 мл этого раствора и далее поступают, как в примере 1. После определения г оптической плотности количество выделенного амедина из биологического материала рассчитывают по калибровочному графику.

В табл.4 приведены результаты определения при использовании различных щелочей.

Сравнительная оценка количественного определения амедина в субстанци известным и предлагаемым способами и результаты количественного определения амедина в таблетах предлагаемым способом приведены в табл.5.

Таким образом, предлагаемый способ более чувствителен, чем известный (открываемый минимум его 7,3 мкг в пробе, тогда как открываемый минимум известного способа определения амедина в субстанции 3400 мкг).

Предлагаемый способ характеризуется более высокой точностью, чем известный. Относительная ошибка определения амедина в субстанции в таблетах не превышает ±-2%, в то время как относительная огаибка определения амедина в субстанции изестным методом составляет -2,54%.

Предлагаемым способом можно определять амедин не только в субстанции

Т а б л и ц а 1

Зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества амедина

Зависимость величины оптической плотности от рН универсальной буферной смеси (УБС)

0,12 0,12 0,12 О, 12 0,12

2 3 4 5 6

5

0

(как известным способом), но и в таблетах и объектах биологического про-1- исхождения.

Формула изобретения

Способ определения :амедина путем растворения анализируемого вещества с последующим измерением его содержания, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, чувствительности определения и расширения области применения способа, растворение проводят в воде, водный раствор обрабатывают кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем при рН 2-5, экстрагируют хлороформом, экстракт обрабатывают водным раствором щелочи и измерение содержания анализируемого вещества осуществляют фотометрированием водного слоя.

Таблица2

0,83 0,83 0,83 0,82 0,72

Т а б л и ц а 3

Зависимость величины оптической плотности от объема 0,04%-ного раствора реагента

Взято амединарНВзято 0,04%- D (средУБСного раство- нее из

млмгра реагента, трех опмлределений)

,00,1241,00,78

,00,1241,50,81

,00,1241,80,83

,00,1242,00,83

,00,124.2,20,83

,00,1242,50,83

Таблица

Количест- Оптическая плотность во амедина при обработке 0,1 н. мграстворами

NaOH КОН

0,120,830,83

0,120,820,82

0,120,830,83

0,120,840,84

0,120,830,83

Т аблица5 Известный способПредлагаемый способ

Навес- Найде- Метрологичес- Навес- Найде- Метрологичес- ка, гно, %кие характе- ка, гно, % кие характеристикиристики

Амедин в субстанции

97,73

97,73

101,10

99,93

102,27

,75

,02 S,0,91

Ј,,95 2,53 ,54

Амедин в таблетах по 0,003

99,75

101,20

101,20

98,31

99,75

,04 ,21 ,54 Јo,9s 1,50 1,50

ОТИ

97,50

99,37

101,20

97,50

99,37

,99 ,55 S 0,70

Јо.« 1.9 ,96