Способ количественного определения фепранона Советский патент 1993 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения фепранона - гидрохлорида диэтиламинопропиофенона - экстракционно-фотометрическим методом и может быть применено в фармацевтическом анализе для количественного определения препарата в субстанции, в лекарственных формах и в объектах биологического происхождения.

Целью изобретения является повышение точности и чувствительности определения фепранона, а также расширение круга анализируемых.объектов.

Для количественного определения фепранона используется стандартный водный раствор, содержащий в 1 мл 0,1 мг этого препарата. В качестве реагента используется 0,02%-ный водный раствор кислотного фиолетового антрахинонового красителя 1- окси-9,10-антрахинон-4-амино(м-толилсуль- фокислоты), в кислой среде с фепраноном образующий окрашенный ионный ассоциэт, который в той же среде извлекается хлороформом, Для создания определенного рН среды использовалась универсальная буферная смесь. В хлороформной вытяжке при обработке раствором щелочи происходит разрушение ионного ассоциата фепранона и красителя. В щелочный раствор переходит освободившийся краситель; количество которого эквивалентно количеству вступившего с ним во взаимодействие фепранона.

Кислотный фиолетовый антрахиноно- вый краситель в аналитической химии применяется для определения неорганических веществ. Для количественного определения фепранона кислотный фиолетовый антрахи- ноновый краситель предлагается впервые.

Данные о выборе оптимальных условий количественного определения фепранона представлены в табл. Т и 2.

Из результатов, приведенных в табл. 1, следует, что ионный ассоциат фепранона и реагента в наибольших количествах экстрагируется хлороформом при рН 2-5. В дальнейших исследованиях использовался

(Л

С

00

Ј о ел VI

раствор универсальной буферной смеси с рН 3,0.

Из данных, приведенных в табл. 2, следует, что для полного образования ионного ассоциата между фепраноном и реагентом необходимо прибавить 1,4-2,4 мл 0,02 %-но- го раствора кислотного фиолетового антра- хинонового красителя. В дальнейших исследованиях прибавляли по 2 мл раствора указанного реагента.

Установлено, что для достижения оптимальных условий количественного определения фепранона, основанного на взаимодействии препарата с кислотным фиолетовым антрахиноновым красителем, необходимо брать 1-2 мл раствора фепранона, содержащего в этом объеме 0,02-0,1 мг этого препарата, 6-7 мл раствора универсальной буферной смеси с рН 3,0, 2 мл 0,02%-ного раствора реагента и 10 мл хлороформа.

Зависимость оптической плотности исследуемого раствора от количества в нем фепранона иллюстрируется калибровочным графиком, где по горизонтали отложено количество фепранона (С), а по вертикали -. значение оптической плотности (D).

Решение обладает существенными отличиями, так как совокупность аналитических признаков в других технических решениях не обнаружена. Предлагаемое решение позволяет .повысить чувствительность определения и расширить область применения.

Сущность изобретения поясняется конкретными примерами.

Пример 1. Определение фепранона в субстанции.

В делительную воронку вносят 1 мл водного раствора фепранона (0,02-0,1 мл в пробе), прибавляют 7 мл универсальной буферной смеси с рН 3,0, 2 мл 0,02%-ного водного раствора реагента и 10 мл хлороформа. Смесь взбалтывают в течение 3 мин, затем оставляют для разделения фаз на 10 мин. После разделения фаз. хлороформный слой переносят в делительную воронку, содержащую 12 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия и встряхивают 10-15 с. После отстаивания фаз отделяют окрашенный щелочной раствор. Оптическую плотность окрашенного щелочного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 (светофильтр при А 590 ±10 нм, кювета 20 мм). В качестве раствора сравнения берут 0,1 н. раствор гидроксида натрия.

Построение калибровочного графика. В делительные воронки вносят по 0,2; 0,4; 0,6; 0,8: 1,0 мл стандартного раствора фепранона, в 1 мл которого содержится 0,1 мг препарата. Затем во все делительные воронки прибавляют раствор У ВС (рН 3,0) до 8 мл, по 2 мл 0,02%-ного раствора реагента, по 10 мл хлороформа и поступают, как указано выше.

Используй полученные значения оптической плотности (табл. 3), строят калибровочный график. Подчиняемость закону Бугера-Ламберта-Бера наблюдается в пределах концентраций фепранона от 0,02 до

0.1 мг/мл.

Используя калибровочный график, определяют количество анализируемого препарата. Этот метод можно применять для количественного определения фепранона

как в субстанции, так и в таблетках.

П р им е р 2. Количественное определение фепранона в дражетках по 0,025. Одно драже взвешивают и помещают в мерную : колбу емкостью 250 мл, растворяют и доводят до метки дистиллированной водой.

В делительную воронку вносят 1 мл раствора анализируемого препарата, 7 мл УБС (рН 3,0) и 2 мл 0,02%-ного раствора реагента. Далее поступают аналогично примеру 1,

Расчет концентрации фепранона в дражетках можно производить не только по калибровочному графику, но и по следующей формуле:

30

ах

DX а0

Do

где Do - оптическая плотность стандартного раствора;

Dx - оптическая .плотность исследуемого образца;

а0 - содержание фепранона в 1 мл стандартного раствора.

Приготовление стандартного раствора.

0,025 г субстанции фепранона помещают в мерную колбу емкостью 250 мл и растворяют в 100 мл дистиллированной воды, доводят объем раствора водой до метки. Для анализа берут 1 мл стандартного раствора.

Оценка количественного определения фепранона в субстанции и дражетках предлагаемым способом представлена в табл. 4.

П р и м е р 3. Определение фепранона в биологическом материале.

К 100 г мелкоизмельченной печени трупа добавили 10 мг фепранона и оставили на 1 сут при периодическом перемешивании.

Исследуемый препарат из печени трехкратно изолировали водой, подкисленной щавелевой кислотой до рН 2,0. Объединенные вытяжки фильтровали через 4-5 слоев марли и центрифугировали. Фепранон из вытяжек экстрагировали хлороформом из щелочной среды (рН 8.0-9,0). Сухие остатки вытяжек после отгонки хлороформа растворяли в 20 мл универсальной буферной смеси (рН 3,0). Для количественного определения брали 1-2 мл этого раствора и далее поступали, как указано в примере 1. После определения оптической плотности количество выделенного фепранона из биологического материала рассчитывают по калибровочному графику. Примеси, выделенные совместно с фепраноном из биологического материала, не вступают во взаимодействие с реагентом и не мешают определению фепранона, выделенного из биологического материала.

0

5

Формула изобретения Способ количественного определения фепранона путем растворения анализируемой пробы в воде, обработки полученного раствора цветореагентом с последующей экстракцией хлороформом и фотометрировани- ем, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, чувствительности и расширения области применения способа, в качестве цветореагента используют кислотный фиолетовый антрахиноновый краситель, обработку им проводят в присутствии универсального буферного раствора при рН 2,0-5,0, хлороформный экстракт обрабатывают водным раствором гидроксида натрия и фото- метрированию подвергают водный слой.

Использование - в области аналитической химии. Сущность изобретения: образование ионного ассоциата фепранона и кислотного фиолетового антрахинонового красителя, его экстракция хлороформом из кислой среды, разрушение раствором щелочи с последующим измерением оптической плотности освободившегося красителя. 4 табл. 1 ил,

.Т а б л и ц а 1

Зависимость величины оптической плотности от рН универсальной буферной смеси (УБС)

Таблица2 Зависимость величины оптической плотности от объема 0,02%-ного раствора реагента

Таблица 3 Зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества фепранона

Таблиц а 4 Результаты определения фепранона в субстанции ив дражетках по 0,025

Навеску препарата, определяя его в субстанции, растворяли в 100 мл воды, для анализа брали 1 мл полученного раствора.