Способ получения производных 2-тиенилоксиуксусной кислоты или их фармацевтически применимых солей Советский патент 1990 года по МПК C07D333/26 A61K31/381 A61P7/02 

тровывают и промывают многократно дистиллированной водой.

9,3 г (0,028 моль) амида N-{2- 2- (5-(2-окси)-этокси)-тиенил -этил)- бензолсульфокислоты (I) растворяют в 90 мл водного раствора гидроокиси натрия, добавляют еще влажную окись серебра и при механическом перемешивании нагревают до 80 С. Спустя Зч при этой температуре охлаждают и суспензию фильтруют через HYELO. Прозрачный раствор гидроокиси натрия подкисляют с помощью примерно 6 мл концентрированной соляной кислоты и экстрагируют трижды по 100 мл эфира. |Эфирные фазы встряхивают трижды по 100 мл с насыщенным раствором бикарбоната натрия, промывают их 50 мл эфира и подкисляют концентрированной соляной кислотой. Водную фазу экстрагируют дважды с помощью 150 мл эфира, объединенные эфирные фазы сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают. Кристаллический осадок настаивают с 30 мл диизопропи- лового эфира и отфильтровывают.

Выход 2,6 г бесцветных кристаллов (26,4% от теории), т.пл. 110-113°С Ъфир/диизопропиловый эфир,

1Н-ЯМР (DMCO),( (ppm): 9 16 (син- глет, уширенный, Ш, -СООН); 7,67- 7,88 (мультиплет, 2Н,-B-HZ, В-Н6); 7,47-7,55 (мультиплет, ЗН, В-Н, В-Н4, Е-Н); 7,27-; 7,33; 7,47 (три- плет, 1Н, -NH-); 6,02; 6,06; 6,33; 6,38 (АВ, 2Н, Тп-Н5, Th-H4, J-3,r 3,7 Гц); 4,51 (синглет, 2Н, 0-СН2-С 2,57-2,99 (мультиплет, 4Н,., )

°С-ЯМР. (DMCO).,Ј (ppm): 169,1 (синглет, -СООН); 162,0 (синглет, Th-C2); 140,3 (синглет, В-С.,); 13.1,8 (синглет, В-С4); 128,5 (дублет, В-СЭ В-С5); 127,7 (синглет Th-C5); 126,3 (дублет, В-С4, В-С6); 122,0 (дублет, Th-C4); 105,3 (дублет, Th-C3); 69,5 (триплет,. 0-СК,2-СО); 43,8 (триплет, -NH-CH2-); 30,2 (триплет, Th-CH -). Исходный продукт можно получать следующим образом:

2-(2-Тиенилокси)-этанол. К 1600 мл абсолютного этиленгли- коля добавляют 323,,7. мл 5,4 М раство метилата натрия.(1,75 моль). Реакционную смесь нагревают и образующийся метанол отгоняют путем пропускания азота через обратный холодильник до тех пор, пока температура в нижней части не повысится до 130°С. По окончании удаления метанола добавляют 187,5 г (1,15 моль) 2-бромтиофена, 55,5 г тонко измельченной окиси меди и 5,6 г иодида натрия, аппаратуру еще короткое-время промывают азотом, закрывают баллон и перемешивают 175 при 80 С. Затем реакционную смесь охлаждают и отсасывают через . Фильтрат разбавляют 800 мл воды и - слегка подкисляют концентрированной соляной кислотой..

Экстрагируют четыре раза по 400 м метиленхлоридом (в целом 1600 мл). Объединенные органические, фазы встряхивают один раз с 200 мл воды, сушат над сульфатом натрия, отфильтровываю и выпаривают. Остаток перегоняют.

Выход 102,7 г бесцветного мясла (62% от теории), т.кип.,90-95°С (0,6 мбар).

Амид №-|2- 2-(5-(2-окси)-этокси)- тиенил -этил -бензолсульфокислоты.

30 г (0,208 моль) 2-(2-тиенилок- си)-этанола помещают в 300 мл абсолюного тетрагидрофурана и растворяют в этом растворе 50 мг n-толуол суль- фокислрты. К раствору добавляют 18,37 г (0,218 моль) 3,4-дигидропира на и перемешивают 8 ч.

Охлаждают до -20°С и при перемешивании прикапывают 83,2 мл (0,208 моль) -2,5 М раствора н-бутил лития в н-гексане так, чтобы температура не превышала -10°С. Оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение часа.

Реакционную смесь охлаждают до 10° С и в течение 30 мин прикапывают раствор 19,05 г (0,104 моль) N-бен- золсульфонилазиридина в 100 мл абсолютного ТГФ при 10-15°С. Все нагревается до комнатной температуры и перемешивается еще 2ч.

Смесь выливают на 200 мл 2 н. водного раствора НС1 и экстрагируют трижды по 120 мл метиленхлоридом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают. Остаток обрабатывают 300 мл абсолютного метанола,смешивают мл 30%-ной метанольной соляной кислоты и перемешивают 10 мин при комнатной температуре. После добавки 2 г карбоната натрия выпаривают в вакууме.

Остаток распределяют между 250 мл 1 н, водного раствора гидроксида

51

натрия и 200 мл эфира, и эфирную фазу дополнительно промывают один раз 50 мл 1 н. раствора гидроксида натрия . Объединенные водные фазы промывают дважды по 10 мл эфиром, подкисляют примерно 25 мл концентт рированной соляной кислоты и экстрагируют трехкратно, смотря по обстоятельствам, 150 мл метиленхлорида. Me тиленхлоридную фазу, сушат над сульфатом натрия, смешивают с 3 г активного угля, отфильтровывают и выпаривают. Выход 33,3 г темно-красного масла (97,8% от теории), которое ис- пользуется непосредственно на самой ближайшей стадии.

П р и м е р 2. Растворяют 1 г (бензолсульфониламино)-этил -2- тиенилоксиуксусной кислоты (2,93ммоль в 20 мл метанола и прикапывают 0,117 г NaOH (2,93 ммоль), растворенных в 10 мл метанола, и перемешивают раствор в течение 1 ч при комнатной температуре. В заключение упаривают досуха, остаток промывают этилацета- том и диизопропиловым эфиром и сушат в вакууме при 50°С.

Выход 0,75 г бесцветных кристалло (80% от теории) Na-соли 5-(2-(бен- золсульфониламино)-этшт -2-тиенилок- сиуксусной кислоты.

ЧЬЯМР (DMSO), S (ppm): 8,0 (S, -NH-); 7,82-7,85 (т, 2Н, Bz-H2, Bz-H6); 7,60-7,70 (т, ЗН, Bz-H3, Bz-H4, Bz-Hs); 6,40; 6,39;. 5,98; 5,97 (АВ, 2Н, Th-K , Th-H4, J,4SS 3,7 Гц); 4,14 (S, 2H, -0-CHZ -CO-); 2,71-2,96 (т, 4Н, -СН2-СН2-).

Пример 3. (Бензолсуль- фониламино)-этшг -2-тиенилоксиуксусная кислота.

I

Растворяют 9,51, 19,0, 38,1 и 76,1 г нитрата серебра в указанном в табл. 1 количестве воды и переводят в окись серебра, как описано в примере 1 .

Растворяют четыре порции по 9,3 г (0,028 моль) амида (5-(2- гидрокси)г-этокси)-тиенил -этил|-бен- золсульфоновой кислоты (II) в 90 мл 2 М .водной натриевой щелочи каждая, добавляют еще влажную окись серебра

и нагревают при перемешивании до 80°С.

Дальнейшая обработка происходит как в примере 1. Все данные сведены в табл. 1.

0 5

Q

«

5

0

5

5

76«

v Пример4. (4-Хлорбен- 1 золсульфониламино)-этил 1-2-тиенилок- сиуксусная кислота.

15 г (0,088 моль) нитрата серебра растворяют в 90 мл дистиллированной воды и при перемешивании медленно прикапывают раствор 3,5 г (0,088 моль) гидроокиси натрия в 45 мл дистиллированной воды. Образовавшуюся суспензию окиси серебра перемешивают еще 10 мин, осадок отфильтровывают и промывают многократно дистиллированной водой.

4,0 г (0,011 моль) амида-4-хлор- 2-(5-(2-окиси)-этокси)-тиенил -: этил|-бензолсульфокислоты ДИ) растворяют в 40 мл 2 н. водного раствора гидроокиси натрия, добавляют еще влажную окись серебра и нагревают до 80°С при механическом перемешивании. Спустя 3,5 ч при этой температуре охлаждают и суспензию отсасывают через HYFLO и дополнительно промывают 2 н. водным раствором гидроокиси натрия. Прозрачный раствор гидроокиси натрия подкисляют с помощью концентрированной соляной кислоты и экстрагируют трижды по 80 мл эфиром.

Эфирные фазы дважды встряхивают с насыщенным раствором бикарбоната натрия, отбирая каждый раз по 50 мл, промывают один раз 50 мл эфира и подкисляют концентрированной соляной кислотой. Водную фазу экстрагируют дважды по 150 мл эфиром, объединенные эфирные фазы сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают. Сырой продукт перекристаллизуют из толуола. Выход 1,3 г бесцветных кристаллов (31,7% от теории), т.пл,- 125- 127 С (толуол).

1Н-ЯМР(СОС13), Ј (ppm): 7,81; 7,71; 7,51; 7,42 (АВ, 4Н, бензольные Н, ,0 Гц); 6,39; 6,35; 6,10; 6,06 (АВ, 2Н, Th-H3; Th-H4; ,8 Гц); 4,85 (триплет, 1Н, -NH-); 4,61 (син- глет, -0-CH2-COO-); 3,13 (триплет, 2Н, N-CH2-, Гц); 2,80 (триплет, 2К, Th-CH2-, Гц).

1ЭС-ЯМР (DMCO),Ј (ppm): 169,6 (синглет, -СООН); 161,9 (синглет, Th-C;); 139,3 (синглет, бензольный С,|); 137,1 (синглет, бензольный С);

129.1(дублет, бензольный С, В-С5);

128.2(дублет, бензольный С/, , бензольный С6); 127,4 (Th-C5),4 (дублет, Th-C4); 105,1 (дублет, Th-C-з); 69,4 (триплет, );

43,8 (триплет, -NH-CH4-); 29,9 (триплет, Th-CHu).

Исходный продукт может быть получен следующим образом.

Амид 4-хлор- 2- 2(5--(2-окси)- этокси)- тиеншт -этил|-бе золсульфо кислоты.

18,9 г (0,137 моль) 2-(2-тиенил- окси)-этанола помещают в 200 мл аб- солютного тетрагидрофурана и раст- йоряют там примерно 50 мг п-толуол- сульфокислоты. Добавляют 14,2 г (0,169 моль) 3,4-дигидропирана и перемешивают 8 ч„ Охлаждают до -20 С И при перемешивании прикапывают 66 мл (0,165 моль) 2,5 М раствора н-бутиллития в н-гексане так, чтобы температура не превышала -15°С. Оставляют медленно нагреваться до Комнатной температуры и перемешивают далее 1 ч.

Теперь при -5...0.°С прикапывают раствор 18 г (0,083 моль) Ы-(4-хлор- бензолсульфонил)-азиридина в 100 мл абсолютного ТГФ. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще 30 мин.

Реакционную смесь выпивают на 200 мл 2н„ водной НС1 и экстрагируют трижды по 250 мл метиленхлорвдом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрияt отфильтровываю и выпаривают Остаток обрабатывают 100 мл абсолютного метанола, смеши- вают с 10 мл 30%-ной метанольной солной кислоты и перемешивают 10 мин при комнатной температуре. Добавляют одну ложку карбоната натрия и метано отгоняют. Остаток распределяют между 100ч мл 1 н. водного раствора гидроксида натрия и 100 мл эфира и эфирную фазу дополнительно промывают один раз 100 мл 1 н. раствора гидро- окиси натрия, объединенные водные фазы промывают дважды пс 50 мл эфиро подкисляют концентрированной соляной кислотой и экстрагируют трижды, емот рч по обстоятельствам, 100 мл метиле хлорида. Затем сушат над сульфатом натрия, смешивают с активным углем, отфильтровывают и выпаривают. Получают 10,15 ,г вязкого темного масла,, Этот сильно загрязненный сырой про-- дукт фильтруют через силикагель 60 (180 г силикагеля, элюирующее средст во, отилацетат/петролейный эфир). Выход 4,5 г-бесцветных кристаллов

(15% от теории), т.пл, 85-87°С (бензол) .

Исследование антитромботической I активности.

Самцов крыс Wistar (SPF) массой 200-300 г наркотизируют с помощью пентобарбиталнатрия (60 мг/кг интра- перитонеально)«После этого животным внутривенно инъекцируют вещество примера 1 (вещество А) дазоксибен - гидрохлорид (Ш-имидазол-1-ил)- этокси -бензойной кислоты (вещество В Бенолубрыжейки) соответственно. Высвобождают препарированием, укрепляют в скобках на объективе микроскопа и споласкивают с постоянной скоростью 2,5 мл/мин физиологическим раствором хлорида натрия. Лазерный луч когерентности CR 2 суперграфитного ионного лазера (аргоновый лазер) в течение 30 мин после инъекции испытуемого вещества направляют через интерференционно-контрастный объектив 50; микроскопа Leitz Orthoplan с продолжительностью 1/30 с на венолу. Ис- (ходная энергия ниже объектива микроскопа составляет 0,18 Вт. Если после первого лазерного пуска не образуется никакой тромбоцитный тромб или если тромб по длине и ширине не соответствует диаметру сосуда, то производят второй запуск лазера, чтобы получить тромб, который по длине и ширине соответствует диаметру сосуда.

Число лазерных пусков при этом является мерой антитромботической активности испытуемых веществ: чем больше число лазерных пусков при одинаковом диаметре сосуда, тем сильнее анти- тромботический эффект.

В качестве контролен служат животные, которые не получили никаких испытуемых веществ.

Тесты осуществляются по испытуемому веществу и концентрации на 5 животных, причем у жизотного повреждаются 3 сосуда диаметром 20-30 мм. Статистическая осуществляется по тесту Kruskal и Wallis и по Bang- summen тесту по Dunn.

Результаты опытов представлеры в табл. 2.

Начало ант тромбнческого действия у вещества А находится при 1 мг/кг массы тела и достигает магсиыума действия при 5 мг/кг. Дальнейшее увеличение концентрации не ПРИВОДИТ ни к

91574

какому дальнейшему повышению действия. Для того, чтобы с помощью вещества В достичь сравнимого с максимумом действия вещества А действия, необходима инъекция 20 мг/кг, следовательно 4-кратное количество.

Токсикологические испытания.

Женским особям крыс давали орально соединение примера 1 в концентра- Q циях 3,0; 6-,0; 12,5; 25; 50; 100; 200 и 400 мг/кг массы тела. Каждую концентрацию определяли на двух животных. Подопытных животных исследовали на возможную смертность в течение J5 7 дней. Так как за все время исследования не умерло ни одно животное, LDgg не смогли определить. Таким образом новые соединения относятся к группе малотоксичных.20

Форму л а изобретения

1. Способ получения производных 2-тиенилоксиуксусной кислоты общей формулы

R-SOjNH -As/i cooH (i)

где R - незамещенный или замещенный галогеном фенил,

5 0

5

0

76Ю

или их фармацевтически применимых солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы

di)

где R имеет указанные значения, подвергают окислению окисью серебра в водно-щелочной среде с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде фармацевтически применимой соли.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что окисление проводят путем растворения соединения (II) в 0,5-4 н. растворе гидроокиси щелочного металла с помощью 2-16 эквивалентов окиси серебра при 75-85 С в течение 2-3 ч.

3.Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что растворение соединения (II) проводят в 2 н. растворе гидроокиси калия или натрия.

4.Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что окись серебра предварительно получают путем растворения нитрата серебра в дистиллированной воде и добавки эквимо- лярных количеств раствора гидроокиси натрия.

Изобретение касается производных 2-тиенилоксиуксусной кислоты, в частности получения 5-[2-(бензолсульфониламино)этил]-или 5-[2-(4-хлорбензолсульфониламино)этил]-2-тиенилоксиуксусных кислот, которые могут быть использованы в медицине для лечения тромботических заболеваний. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут окислением, например, амида N=[2-(2/5-(2-гидрокси)этокси/тиенил)-этил]-бензолсульфоновой кислоты окисью серебра в водно-щелочной среде. Растворяют амид в 0,5-4н., преимущественно в 2н., растворе КОН или NAOH, окисляют 2-16 эквивалентами окиси серебра при 75-85°С в течение 2-3 ч. Исходную окись серебра предварительно получают растворением AGNO₃ в дистиллированной воде с добавлением эквимолярных количеств NAOH. Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли. Новые соединения малотоксичны и в 4 раза активнее, чем Дазоксибен, при этом начало антитромбического действия наблюдается при 1 мг/кг и достигает максимума при 5 мг/кг против 20 мг/кг. 3 з.п.ф-лы, 2 табл.

Примечание;

Т а б л -и ц а 1

- молярное отношение AgN03 к соединению (II).

- применяемое для растворения AgN03 количество воды.

- применяемое для растворения NaOH количество воды.

онтроль)

.

2,93±0,36 3,12+0,52 6,40±0,56 6,13iO,30 6,33+0,53 6,4210,41

Редактор М.Бланар

Составитель Т.Власова Техред М.Ходанич

Заказ 1649

Тираж 323

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Таблица 2

2,93to,36 3,07±0,47 2,89±0,57 3,14±0,66 4,46iO,48 6,35+0,55

Корректор Л.Бескид

Подписное