Комплексное соединение индометацина с глицирризиновой кислотой, проявляющее противовоспалительную активность Советский патент 1990 года по МПК C07J63/00 A61K31/704 A61P29/00 

Ияобретение. относится к новым химическим соединениям, а именно к комплексу индометацина (-пара-хпорбен- зоил-5-метокси-2-метилиндол-3-уксус ной кислотьО с глицирризиновой кисло- то и формулы соон

сош

Шз

,CHj-C

он

(1

соон

,.

(3-С1 ОН НО

проявляющему противовоспалительную активность.

Цель изобретения - поиск нового производного глицирризиновой кислоты менее токсичного соединения, обладающего высокой противовоспалительной активностью и не раздражающего слизистую.оболочку желудка. Поставленная цель достигается комплексным соединением -пара-хлор- бензоил-5-метокси-2-метийиНдол-3- уксусной кислоты с глицирризиновой кислотой вышеуказанной формулы (I), пр оявляющий противовоспалительную активность. Комплекс (I) получают взаимодействием индометацина с глицирризиновой кислотой в растворе водного этанола при 5П°С,

Фармакологические свойства соединения (Т.) бьти изучены в Башкирском медицинском институте им, 15-летия ВЛКСМ.

Острзто токсичность определяли на мышах при введении внутрь в дозах 50П, 1000, llOOj 1200 1400 1300 мг/кг, комплекса (I) составила 1300 (1210-1396) мг/кг, LDjo глицирризиновой кислоты равняется 680 мг/кг, I D JQ индометацина (II) 390 мг/кг. Таким обре13ом, комплекс (I) в 2 раза менее токсичен, чем гли цирризиновая кислота, ив 3 раза менее токсичен, чем препарат сравнения индометацин (II) (,05) .

Противовоспалительная активность комплекса (I) изучена на крысах на двух моделях воспаления. О противовоспалительной активности соединения (I) сз дили по угнетению каррагенинового отека лапок крыс в динамике и

и вы имплантипо уменьшению массы .сушенного

влажного

ватного тампона.

рованного в подкожную клетчатку, В качестве препарата сравнения служил индометацин (II), взятый в сред- неэффективной дозе (Юмг/.кг), Комплекс (I) изучали в дозах 5 и 10 мг/кг. Отек лапок измеряли онкометрически через 3,6,.4 и 48 ч. На модели карра- генинового отека () установлено, что комплекс (I) обладает более вы- раженным противовоспалительным дейст- вием, чем индометацин при введении в равных дозах (10 мг/кг). На модели имплантации ватного парика противовоспалительная активность комплекса (I) в дозе 10 мг/кг аналогична факту индометацина в той же дозе, как по влиянию на зкссудацию, так и пролиферацию (табл,2).

На .мьачах изучено влияние комплекса (I) на состояние слизистой оболочки желудка в сравнении с индометацином в дозах 10 мг/кг. В группе жий отных, получавршх комплекс (I), слизистая оставалась без повреждений, в то время, как у животных, получавших индоме- тацин, бьти обнаружены множественные изъявления как слизистой оболочки желудка, так и кип ечника и на П-е сутки 3-е животных из 10-ти погибли. Таким образом, комплекс (I) не обла- дает ульцерогенньм действием.

Пример 1, Влияние комплекса (Т) на каррагениновый отек лапок крыс,

Опыты проводили на 24 белых кры- разделенных на 4 группы по 6 в каждой, .Животные первой и второй групп внутрь получали комплекс (I) в дозах 5 и 10 мг/кг соответственно третья группа - индометацин в дозе to мг/кг, четвертая группа служила контролем /крысам внутрь вводили дистиплированную воду в том же объе- ме, и животным опытных групп). Через 30 мин после введения препара- тов крысу субплантарно инъецировали 0,1 мл 2%-ной взвеси каррагенина. Далее через 3, 6, 24, 48 и 72 ч измеряли отек лапок онкометрически.

Результаты о пытов приведены в табл.I,

Установлено, что в контроле воспалительный отек возникал сразу через 30 мин после введения каррагенина, максимум которого наблюдался через 24 ч и сохранялся до 72 ч, В группе животных, получавших индометацин, величина отека всегда бьта меньше, чем в контроле во все сроки наблюдения (р 0,05-0,001), В группе живот5 1616925

ных, получавших комплекс (I) в дозе 5 мг/кг, статистическое угнетение отека наблюдали лишь к 72 ч. При увеличении дозы до 10 мг/кг отмечал отчетливое противовоспалительное действие, выраженность которого была вьшш, чем у животных, получавших индо- метацин в той же дозе. Так например,

б

Как видно из данных табл.2, индо- метацин и комплекс (I) уменьшают массу экссудата и пролиферата, однако угнетение экссудативной и проли- феративной фазы воспаления комплексом (I) в дозе 5 мг/кг оказалось статистически недостоверны1.5, С увеличением дозы соединения до 1 О мг/кг

-s--«I.V.-, -.i,,-, /.1,1 vJfcJi V-V/C/4niT,Cnil71 М - М1 / к

на третий час наблюдения в этой груп- ,о наблюдалось повышение противовоспапе крыс прирост отека лапок составил в среднем О,}2+0,09 мл, а в группе животных, получавших индометацин - 0,-39±П,10 мл (,05). На 6-Й и часы измерения регистрировали аналогичную картину. К 48 ч опыта в группе животных, получавших коютлекс (I.) , отек лапок полностью ликвидировали, в то время как в группе живот- ных, получавших индог-штацин, отек ре- 20 гистрировали у всех животных и составил в среднем 0,,10 мл (Р для X 0,01). Таким образом, комплекс индо-.гетацина с глицирризиновой кислотой проявляет противовоспалительное действие, превосходящее активность индометацина при введении в равных дозах,

П р и м е р 2, Влияние комплекса (I) на экссудативную и пролифера- тивную спазы воспаления.

Опыты проводили на 24 крысах, разделенных на 4 группы по 6 в каждой. Всем животным под легким эфирным наркозом (30 мг/кг) вживляли в подкожн то клетчатку стерильнь й ватный тампон массой 50 мг, после чего в.течение 7 дней крысы получали

лительной активности и оно бьто аналогично эффекту индометацина в той же дозе,

Пример 3. Изучение влияния

15 комплекса (I) и индометацина на состоя ние слизистой оболочки желудка.

Опыты проводили на 30 мьш1ах которые подразделяли на 3 группы (10 в каждой). Животным в течение 12 дней внутрь вводили комплекс (I) в дозе к; мг/кг (первая группа), второй группе - индометацин в той же дозе, а третья группа мьш1ей служили контролем. По истечении этого срока животных забивали хлороформным наркозом, вскрывали, извлекали желудок и исследовали состояние слизистой оболочки желудка на предмет обнаружения язв и эрозий, Б случае нали30 чин их подсчитывали..

Результаты опытов приведены в табл.3.

Как видно из данных табл.З. Б группе животных, получавших индометации, 35 обнаружены дефекты в слизистой оболочке желудка, а в группе животных, получавших комплекс (I), как и в контроле, слизистая оставалась без повреждений. Кроме того, в группе

25

внутрь препараты, указанные в табл.2. 40 мышей, получавших индометацин, уже По истечении этого срока животных на 7-10-е сут отмечали поносы, живот- забивали хлороформным наркозом, извле- ные худели и на 11-е сут 3-е животкали ватные тампоны, взвешивали с точностью 1 мг, что составляло массу влажного тампона. Далее влажные тампоны помещали в термостат при 60°С и высушивали до постоянной массы и взвешивали - показатель сухого тампона, Разница в массе влажного и сухого тампона являлась показателем экссудативной фазы воспаления, а разница между массой сухого тампона и первоначальной его массой (50 мг явля- « лась показателем пролиферативной фазы воспаления.

Результаты опытов представлены в табл.2.

ных из i0-ти пали. При вскрытии бьши обнаружены множественные дефекты не 45 только в слизистой желудка, но и кишечника. Таким образом, комплекс индометацина (Т) не обладает улг.це- рогенным действиен.

50 Пример 4. Изучение острой токсичности комплекса (I).

Острая токсичность комплекс а (I) изучена на 36 , разделенньгх на 6 групп, при введении внутрь в дозах,

55 указанных в табл.4. За животными вели наблюдение в течение 14 дней. В группах животных, получавших комплекс (I) в дозах 500, 1000, 1100 мг/кг, не наблюдали гибели, а в 4-6-й групб

Как видно из данных табл.2, индо- метацин и комплекс (I) уменьшают массу экссудата и пролиферата, однако угнетение экссудативной и проли- феративной фазы воспаления комплексом (I) в дозе 5 мг/кг оказалось статистически недостоверны1.5, С увеличением дозы соединения до 1 О мг/кг

V.-, -.i,,-, /.1,1 vJfcJi V-V/C/4niT,Cnil71 М - М1 / к

наблюдалось повышение противовоспа

лительной активности и оно бьто аналогично эффекту индометацина в той же дозе,

Пример 3. Изучение влияния

комплекса (I) и индометацина на состояние слизистой оболочки желудка.

Опыты проводили на 30 мьш1ах которые подразделяли на 3 группы (10 в каждой). Животным в течение 12 дней внутрь вводили комплекс (I) в дозе к; мг/кг (первая группа), второй группе - индометацин в той же дозе, а третья группа мьш1ей служили контролем. По истечении этого срока животных забивали хлороформным наркозом, вскрывали, извлекали желудок и исследовали состояние слизистой оболочки желудка на предмет обнаружения язв и эрозий, Б случае наличин их подсчитывали..

Результаты опытов приведены в табл.3.

Как видно из данных табл.З. Б группе животных, получавших индометации, обнаружены дефекты в слизистой оболочке желудка, а в группе животных, получавших комплекс (I), как и в контроле, слизистая оставалась без повреждений. Кроме того, в группе

мышей, получавших индометацин, уже на 7-10-е сут отмечали поносы, живот- ные худели и на 11-е сут 3-е животных из i0-ти пали. При вскрытии бьши обнаружены множественные дефекты не только в слизистой желудка, но и кишечника. Таким образом, комплекс индометацина (Т) не обладает улг.це- рогенным действиен.

Пример 4. Изучение острой токсичности комплекса (I).

Острая токсичность комплекс а (I) изучена на 36 , разделенньгх на 6 групп, при введении внутрь в дозах,

указанных в табл.4. За животными вели наблюдение в течение 14 дней. В группах животных, получавших комплекс (I) в дозах 500, 1000, 1100 мг/кг, не наблюдали гибели, а в 4-6-й груп(О

пах отмечали дозу - зависимая ги- бель мьшей. Полученные результаты обрабатывали по Литчфйльду-Уилкоксо- н:5 . . , .

1. .

i; .20, IJDso l300, , значение ,115, значение f LD 1,074, ЗДГ 5396, НДГ 1210. Следовательно, средняя смертельная до- за (), для мьшей при введении составляет 1 300(1210-1396) мг/кгг 50 для глицирризиновой кислоты равняется 680-мг/кг, LDgjj индометацина 390 мг/кг. Таким образом, предлагае- 15 мый комплекс (I) в 2 раза менее токсичен, чем глицирризиновая кислотАТ;

и в 3 раза менее токсичен, чем ий- ометацин (,05)... ,

Пример 5. Получение кo a лeкc-2Q него соединения (1), 15,64 г (2 ммоль) глицирризиновой кислоты растворяют при перемешивании в 50 мл этанола (96%-ного), добавляют 0,45 г индоме- тацина,.40 мл воды и перемешивают при 70(; 2 ч. Упаривают растворитель в вакууме, остаток сушат в вакууме асляного насоса. Получают 2,0 г (У9%) комплекса (I) в виде аморфноо вещества желтоватого цвета. ИК,, см- г 3550-3200 ОН), 000-7850(СН), }700(СООН), 690, 1660(), 1615(Р). 1525(СН аром.).

25

30

У Д макс 50% EtOH:229 им (Ig 4,38)1 261 нм (Igg 4,31); 267 нм р-ве 4,27).

С«Я 56,6 (с 0,03, 50% FtOH); Т.пл. 1«8-191 С.

Найдено, %: С 63,67; Н 7,10: N 1,55.

. f eal SeOzoNC.

i Вычислено, %: с 63,48, Н 6,40: N 1,14.

Таким образом, предлагаемое комплексное соединение (I) является менее токсичным, где глицирризиновая кислота, обладает высокой противовоспалительной активностью и не раздражает слизистую оболочку желудка.

Формула изобретен ия

Комплексное соединение индометаци- на с глицирризиновой кислотой фор- У Сбои

-2Q

25

Тсоон он но

проявляющее противовоспалительную активность.

Таблица 1

Изобретение касается комплексных органических веществ, в частности комплекса индометацина с глицерризиновой кислотой, обладающего противовоспалительной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание нового более активного комплекса с малой токсичностью. Синтез ведут реакцией индометацина с глицерризиновой кислотой в водном эталоне при 50°С. Токсичность ЛД₅₀ 1300 мг/кг. Новый комплекс более активен на карагениновый отек лапок крыс при дозе 5 мг/кг (через 3 ч 0,97±0,25 против 0,39±0,1 для индометацина при дозе 10 мг/кг). 4 табл.

Пбозначены статистически достоверные результаты,

Таблица 2

Комплекс (I)

5 10

35,6451 209±2.

is±6,4 29+2,9

161692550

I Продолжение табл.2

.. I Индометацин 10 227±27 23±2,5

Контроль Дистил- 418tA8 76t6,l

лированная

вода

JL

Обозначены статистически достот верные результаты.

Таблица 3

-г------Препарат Доза, Число Уровень

мг/кг дефек- значимости тон

.Индоме- I тацин10 15,3±1,80 Р для

,01 Комплекс

(I)10О

Контроль -О

Таблица

Доза, Наблюдае- Наблп-Ожидав- Разница Слагаемые

мг/кг мый эф- даемыймый эф- для х

фект эффект,фект, %

%

500 0/6 0. 1000 0/6 О П 00 0/6 Or

1400 4/6 66,6 70 3,4 0,0054

1500 5/6 83,3 81 2,3 , 0,0035

0,0142x6 0,0752x2- 3,84

Составитель Й.Редосеева Редактор К.Киттулинец Техред М.Моргентал Корректор В.Гирняк

Заказ 1356Тираж 225Подписное

. , , -

ВНРЙШИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, г.Ужгород, ул, Гагарина,lOt