Способ определения мутагенной активности Советский патент 1991 года по МПК C12N15/01 

Изобретение относится к токсикогене- тике и может быть использовано в качестве экспресс-метода для контроля за загрязнением поверхностных и промышленных сточных вод в водной токсикологии, медицине, при определении активности химических веществ и физических факторов

Цель изобретения - сокращение длительности определения

Способ определения мутагенной активности состоит в том, что суспензию клеток Saccharomyces cerevisiae 15В-П4 экспонируют в питательной среде, содержащей тестируемое вещество, с последующим высевом клеток на твердую питательную среду, содержащ/ю соль Мора, после роста на ней фильтры с выросшими колониями переносят на застывшую агаризованную среду с 2,2 -дипиридилсм и по количеству

колоний с измененной окраской судят о мутагенной активности

Пример. Клетки двухсуточной культуры Saccharomyces cerevisiae, штамм 15В- П4, суспендируют в полной питательной среде, содержащей 0,1% супермутагена этилметансульфоната (ЭМС), и экспонируют при 30°С 24 ч. Затем дрожжи высевают на бумажные фильтры, покрывающие чашки Петри с полной агаризованной средой, содержащей 2 ммоль/л соли Мора. После 2 сут роста фильтры пинцетом переносят на чашки с застывшим 0,5%-ным агаризованным раствором 2,2 -дипиридила. Через 1-2 ч учитывают количество ярко-розовых и белых колоний - 24 красных и 61 белых мутантов. Общее число колоний 411700.

Частота мутаций составляет

Os

Ю

о

го со

24 +61

2-10

,-4

411700 т.е. достаточно велика.

Предлагаемый способ позволяет быстро и достаточно просто определять мутагенность химических веществ, визуально учитывать количество мутантов, не применяя селективных сред, дополнительных пересевов. Все определение мутагенной активности занимает 3 сут и не требует сложного и громоздкого оборудования.

Формула изобретения Способ определения мутагенной активности, предусматривающий суспендирова0

5

ние клеток штамма дрожжей Saccharomyces cerevlsiae 15В-П4 в жидкой питательной среде, содержащей мутаген, высев клеток на твердую питательную среду с последующим определением мутагенной активности, отличающийся тем, что, с целью сокращения длительности определения, клетки высевают на твердую питательную среду, содержащую соль Мора, покрытую бумажными фильтрами, а затем с помощью фильтров переносят на застывшую агаризо- ванную среду 2,2 -дипиридилом, а о мутагенной активности судят по изменению окраски колоний.

Изобретение относится к токсикогене- тике и может быть использовано в качестве экспресс-метода для контроля за загрязнением поверхностных и промышленных сточных вод в водной токсикологии, медицине при определении мутагенной активности химических веществ и физических факторов, Цель изобретения - сокращение длительности определения. Суспензию клеток штамма Saccharomyces cerevisiae 15В-П4 экспонируют в питательной среде с последующим высевом клеток на твердую питательную среду, содержащую соль Мора, после роста на которой фильтры с выросшими колониями переносят на застывшую ага- ризованную среду 2,2 -дипиридилом и по количеству колоний с измененной окраской судят о мутагенной активности. ел