Способ разделения смеси @ - и @ -энантиомеров 4-[1-(2,3-диметилфенил)этил]-1Н-имидазола Советский патент 1991 года по МПК C07D233/64 A61K31/495 

Изобретение относится к способу получения новых оптических изомеров 4- - JJ -(2,3-диметилфенил)этил -1Н-имида- зола (медетомидина), который известен как селективный сильнодействующий стимулятор -рецептора.

Цель изобретения - получение d- и 1-энантиомеров медетомидина, значительно повышающих &2-селективность и потенцию $2 РеЦепт°Ров по сравнению с рацематом медетомидина.

Пример. 14 г медетомидина (основание) растворяют в 50 мл метанола. 10,5 г (+)-винной кислоты растворяют в 50 мл метанола. Растворы смешивают и растворитель упаривают до объема 50 мл. Смесь помещают в ледяную баню и получают 9 г осадка белого цвета. Осадок суспендируют в 25 мл этанола, смесь подвергают в течение

14 мин воздействию ультразвука и отфильтровывают, Осадок растворяют в смеси 20 мл абсолютного спирта и 60 мл метанола при нагревании на паровой бане. 5 г осадка (степень ротации +55°) получают после охлаждения. После перекристаллизации из 60 мл метанола получают 4,1 г продукта со степенью ротации +60°. Перекристаллизацию повторяют до тех пор,пока степень ротации не перестает возрастать. Тартрат d-энантиомера растворяют в воде, раствор подщелачивают и d-энантиомер растворяют в органическом растворителе, например ди- хлорметан или диэтиловый эсЪир. Степень ротации d-энантиомера в Лорме основания равна +75 . 1-знантиомер может быть выделен из маточного раствора, d- и 1-энантиомеры медетоми

дина являются селективными и сильнодействующими стимуляторами о -рецепторов.

Адренергические рецепторы являются физиологически важными связующими участками, специфичными по отношению к норадреналину и адреналину и расположены на поверхности клеточных мембран. Адреноцепторы симпатической нервной системы классифицируют как два различных субтипа - альфа (00 и бета (А) рецептора, которые далее могут быть подразделены на субгруппы, а именно #, и о(ги f}, и /}2 Среди этих рецепторов ft,, (Ьги в основном локализуются постсинаптически на поверхности, например, гладкой мышцы и, таким образом, влияют на контрактацию или релаксацию гладкой мышцы в это же время О -рецепторы в основном локализуются пресинапти- чески на окончаниях норадренергиче- 1ских нервов. Если (Xg -рецепторы сти- |мулируются норадреналином в физиоло- гических условиях, то освобождение норадреналина приводит к понижению активности (2 РеДепт°Р°в т.е. в данном случае наблюдается отрицательная обратная связь. Этот феномен от- рицательной обратной связи может быть также вызван некоторыми синтетическими о 2 стимУлят°Рами подобными меде- томидину, и некоторыми близкими ему производными.

R экспериментах на животных предлагаемые d- и 1-энантиомеры, особенно d-энантиомер, показали себя,как вещества, значительно повышающие -селективность и потенцию -рецепт ров по сравнению с рацематом (т.е. медетомидином), d-энантиомер может иметь значение в качестве, например, препарата, обладающего седативно- анальгетическим действием, антидепрессанта, ср едства, понижающего давление. Кроме того, он может быть использован в качестве фармакологического инструмента при изучении физиологии и фармакологии #2-адреноцеп- тов.

Фармакологическую активность предлагаемых соединений определяют следующим образом.

Стимулирование альфа -2 in vitro.

-стимулирование определяют на изолированных, электрически стимулируемых препаратах, выделенных из сосудов мышей. В данной модели (-сти

мулятор способен блокировать мышечную контрактацию, индуцированную электричеством, благодаря активации -адреноцепторов пресинаптических и, таким образом, приводя к снижению влияния секреции на двигательный нерв. В качестве образца используют известные Йг-стимуляторы: детомидин, медетомидин и клонидин. Результаты приведены в табл.1, в которой эффект стимулирования -рецептора представлен выражением рР2 (отрицательный логарифм молярной концентрации соединения, вызывающей 50% максимума инги- бирования).

Результаты, представленные в табл.1, показывают, что d-энантиомеру медетомидина принадлежит верхний предел активности стимулирования (Xj-рецепторов. По сравнению с другими препаратами d-энантиомер проявляет повышенную активность в стимулировании --рецепторов.

Таблица 1

Соединение

(-стимулирование in vicro (сосуды из р1)2-мьппей)

9,3

6,0 (частичный

стимулятор)

9,0

8,5

8,5

#г WJ -селективность. Селективность d-энантиомера как .стимулятора й/г-рецепторов изучают в опытах по связыванию рецепторов с использованием мозговых мембран крыс. Способность d-изомера и базисных со- |едннений конкурировать с Н-клониди- ном (для Лг-рецепторов) и с % (tff- -празосином (для 0(t -рецепторов) изучают по известной методике. Результаты этого тестирования представлены в табл.2, в которой способность изученных препаратов конкурировать с 3Н-клонидином и Н-празосином за связывание выражена величиной 1С 50 (молярная концентрация конкурирующего лиганда, необходимая для замещения 50% радиактивного лиганда).

Таблица

наполовину самопроизвольная подвр ж- .ность у мышей.

Таблица 4

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности разделения смеси d- и 1-энантиомеров 4- - Јl - (2,3-диметилфенил ) этил -1 Н-имида- зола, являющихся селективными сильнодействующими стимуляторами (-рецептора. Цель - получение более активных энантиомеров указанного вещества. Разделение рацемата ведут обработкой его оптически активной ()-винной кислотой с последующей фракционной кристаллизацией. Эти условия позволяют получить d- и 1-стереоизомеры, имеющие более высокие, чем рацемат, селективность и потенцию Јг -рецепторов. 1 з.п. ф-лы, 7 табл.

1,2

46 3,3

3,7

6,4

55019 45849

189975 16700

232 6200

4129 5060

65 969

Приведенные в табл.2 результаты свидетельствуют об экстремальной селективности энантиомера как стимулятора (Х -рецепторов в сравнении с ме- детомидином и другими базисными соединениями.

Седативно-анальгетические эффекты

Седативно-анальгетические свойств .предлагаемых препаратов изучают путем тестирования спонтанной подвижности и мышечных судорог у мышей. Спонтанную подвижность мышей и крыс измеряют с использованием прибора, определяющего Ahimex-активност Тестируемые соединения вводят за 30 мин до 2-минутных периодов измерения интраперитониально.

При изучении воздействия соединений на мышечные судороги соединения и соль вводят крысам под лопатку и через 45 мин вводят 1 мл 1%-ной уксусной кислоты интраперитониально.. Число судорог записывают через каждые 25 мин (Kascer et al., Tred. Proc. 1j3, 412, 1959). Результаты приведены в табл.3 и 4.

ветствует для изученных соединений той концентрации,при которой падает

Примеча ние. КП-- соответствует для изученных соединений той концентрации, при которой происходит падение судорожных сокращений, вызываемое у мышей уксусной кислотой, в два раза.

Результаты, приведенные в табл.3 и 4, свидетельствуют о том, что d- -энантиомер обладает, по сравнению с рацеметом (медетомидином) и другими родственными препаратами, повышенными седатично-анальгетическими свойствами. Седативно-анальгетический эффект медетомидина обусловлен d-энантиоме- ром.

Анксиолитический эффект

Анксиолитическое действие предлагаемых соединений изучают по известной методике: изучается способ экспло- рации свободных и связанных лап у крысы в подвешенном t-лабиритне. увеличивают относительную эксп- лорацию свободных лап. Крысу помещают в центр с-лабиринта и в течение 5 мин 40 записывают число открытых и закрытых (свободных и связанных) выходов. Результаты приведены в табл.5.

Таблиц

45

Результаты, приведенные в табл.5, свидетельствуют о том, что d-энанти

7164

омер в тесте с подвешенным t-лаби- ринтом обнаруживает анксиолитическое действие.

Чувство тревоги (состояние страха), связанное с симптомами отвода, вызы- вается норадренергической сверхактивностью. Вследствие этого такие симп- ,томы можно легко устранить (излечить) с помощью лекарственных препаратов, снижающих уровень норадреналина, например клонидина. Эксперименты, проведенные на крысах, показывают, что d-энантиомер способен снижать выделение норадреналина и, таким образом, укреплять симпатический нерв как периферической, так и центральной нервной системы. Это продесмонтировано путем измерения после введения с1 энаитиомера CSF-концентраций MHPG- SO/j (основного метаболита центрального норадреналина) у крыс. Результаты приведены в табл,6.

Таблица

CSF MHPO-SOf, % к контролю (4 ч после введения d-энантиомер а)

100 -10 -20 -30 -65

Антигипертензивный эффект.

Способность предлагаемых соединений понижать давление изучают следующим образом.

Крыс Sprague-Dauleg нормального веса вначале подвергают анестезии с помощью уретана. После этого бедерную артерию связывают полиэтиленовой труб кой с датчиком кровяного давления.После этого тестируемое соединение вводят в бедерную вену и регистрируют с помощью записывающего устройства давление крови и частоту пульса. Антигипертензивный эффект d-энантиоме- ра на анастезированных крысах приведен в табл.7.

i

Результаты, представленные в

табл.7, показывают, что d-энантиомер обладает ярко выраженным антигиперТаблица 7

-

5

5

0

0

5

0

45

0

5

тензивным и брадикардическим действием.

d- и 1-энантиомеры и их нетоксичные, фармацевтически приемлемые кислые соли присоединения или смеси на их основе можно вводить парэнтераль- но, внутривенно или орально. Эффективное количество соединения сочетают с подходящим фармацевтически приемлемым носителем. Эффективное количество - такое количество, которое приводит к желательному эффекту, не вызывая побочных явлений. Точное количество, используемое в конкретных ситуациях, зависит от многочисленных факторов: метод введения, тип млекопитающего, условия,в которых используется производное и другие, а также от структуры производного.

Фармацевтически приемлемые носители, которые используются с предлагаемыми соединениями, могут быть жидкими, твердыми и обычно выбираются в зависимости от планируемого способа введения лекарства. Так, например, твердые носители включают лактозу, сахарозу, желатин и агар, а жидкие носители включают воду, сироп, оливковое и арахисовое масла. Для тех, кто работает в области приготовления лекарственных препаратов, хорошо известны и другие подходящие носители. Сочетание производного и соответствующего носителя может привести к созданию большого числа разнообразных фармацевтически приемлемых форм: таблетки, капсулы, растворы, пыльца, эмульсии и порошки.

Формула изобретения

1. Способ разделения смеси d- и 1-энантиомеров 4- 1-(2,3-диметилфе- нил )этил Т-1Н-имидазола9 отличающийся тем, что рацемический 4-JJ-(2,3-диметилфенил)-1-этил -имидазол обрабатывают оптически актив- 2. Способ поп.1, о т л и ч а - ной кислотой с последующим разделе- ю щ и и с я тем, что в качестве нием смеси диастереоизомерных солей оптически активной кислоты испольпутем фракционной кристаллизации.5 3УЮТ (+)-винную кислоту.