Способ микроклонального размножения кормовой свеклы Советский патент 1991 года по МПК A01H4/00 

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции и семеноводстве растений при массовом размножении ценных форм, а также и в исследованиях по физиологии, генетике и фитопатологии растений.

Известно, что для ускорения селекционного процесса по сахарной свекле используют микроклональное размножение путем культивирования верхушечных и пазушных

почек цветущих побегов. Для увеличения количества вновь образовавшихся побегов применяли аланин, глутаминовую кислоту, витамины и другие вещества.

Однако при микроклональном размножении кормовой свеклы эти средства не обеспечивают достаточно высокого уровня образования новых побегов.

Цель изобретения - повышение выхода размножаемого материала за счет увеличеия интенсивности побегообразования и лучшения роста и развития эксплантатов.

Способ состоит в том, что верхушечные пазушные почки цветоносных побегов кормовой свекпы культивируют на питаельных средах, при этом в питательную реду дополнительно вводят сок, полученный из ботвы этой культуры в концентрации т 2,5 до 10,0%.

Сок ботвы кормовой свеклы содержит необходимые для образования растительной ткани аминокислоты, макро- и микролементы и другие вещества, что и пределяет увеличение количества вновь бразующихся побегов кормовой свеклы в асептических условиях в 1,5-2,3 раза по сравнению со способом, предложенным для сахарной свеклы. Концентрация сока в среде от 2,5 до 5,0% является оптимальной для получения наибольшего количества новых побегов, хотя хорошее развитие эксплантатов отмечается и при увеличении концентрации сокадо 10,0%.

П р и м е р 1. Для опыта берут генотипы четырех разных сортообразцов кормовой свеклы. Пазушные и верхушечные почки вычленяют с цветоносов растений второго года жизни. После поверхностной стерилизации эти почки помещают на ага- ризованную питательную среду 85 (табл. 1) с набором витаминов и минеральных веществ, предложенных Гамборгом.

При размножении в асептической культуре все изучаемые генотипы положительно реагируют на добавление к среде сока, полученного из ботвы кормовой свеклы (табл. 2). В вариантах с добавлением сока ботвы увеличивается количество вновь образовавшихся побегов, а также наблюдают более интенсивное развитие эксплантатов (увеличение их длины и массы).

Математическая обработка полученных данных показывает, что ни количество вновь образовавшихся побегов, ни увеличение длины и массы у эксплантатов не зависит от исходного генотипа, на эти показатели в значительной мере влияет присутствие в среде сока из ботвы кормовой свеклы.

Полученные растения - регенеранты после индукции ризогенеза высаживают в почву. Различий между растениями внутри каждого генотипа не отмечают.

Таким образом, выращивание эксплантатов кормовой свеклы на средах с добавле- нием сока ботвы позволяет увеличить выход растений - регенерантов в 1,6-2,3 раза по сравнению с контролем.

Пример 2. С целью определения оптимальной концентрации сока ботвы и его влияния на количество вновь образующихся побегов и развитие эксплантатов

кормовой свеклы проводят ряд опытов,

По количеству вновь образующихся побегов и по развитию эксплантатов достоверный положительный эффект получен по всем генотипам при концентрации сока в

питательной среде от 2,5 до 5,0% (табл. 3). Более низкие концентрации сока (1,0%) способствуют увеличению количества вновь образующихся побегов, но эксплантаты заметно уступают по своему развитию лучшим вариантам.

При более высоких концентрациях сока (10,0-20,0%) отмечают хорошее развитие эксплантатов, но коэффициент размножения снижается.

Использование питательных сред с содержанием сока менее 1,0% и более 20,0% нецелесообразно, так как они сдерживают побегообразовательный процесс, а при ни.з- ких концентрациях также заметно тормозится и развитие эксплантатов .

При использовании питательных сред другого минерального состава (Мурасиге и Скуга и др.) получены аналогичные результаты.

Таким образом, добавление в питательную среду от 2,5 до 5,0% сока, полученного из ботвы кормовой свеклы, положительно влияет на рост и развитие эксплантатов

этой культуры и позволяет увеличить более, чем в 1,5 раза выход растений - регенератов по сравнению с контролем. Использование более высоких концентраций сока (до 10,0%) положительно влияет на рост и развитие эксплантатов, хотя количество вновь образовавшихся побегов несколько снижается.

Формула изобретения Способ микроклонального размножения кормовой свеклы,включающий культивирование верхушечных и пазушных почек цветоносных побегов на питательных средах с последующим получением растений- регенерантов,отличающийся тем,что, с целью повышения выхода размножаемого материала за счет увеличения интенсивности побегообразования и улучшения роста и развития эксплантатов, при культивирова- нии в питательные среды дополнительно вводят сок, полученный из ботвы кормовой свеклы, в концентрации 2,5-10,0%.

Таблица 1 Химический состав /питательных сред

Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции и семеноводстве растений при массовом размножении цепных форм, а также в исследованиях по физиологии, генетике и фитопатологии растений. Целью изобретения является повышение выхода размножаемого материала за счет увеличения интенсивности побегообразования и улучшения роста и развития эксплантов. Изобретение предусматривает культивирование на питательных средах верхушечных и наружных почек цветочных побегов кормовой свеклы с получением ре- генерантов, при этом в питательные среды дополнительно вносят сок, подученный из ботвы данной культуры, в концентрации 2,5-10,0%. 3 табл. О ю XI о 4 N3

влияние сока из ботвы на развитие эксплантатов корневой свеклы и их побегообразованиеN

В качестве контроля используется среда В 5 с добавлением аланина (300 нг/л) и глутаминовой

кислоты (500 нг/л):

Приведены средние значения по серии опытов с концентрациями сока ботвы 2,5 5jOi Ю и 20$ Достоверно на )|-нон уровне значимости; Достоверно на 1%-нои уровне значимости.

Таблица2

,ТаблицаЗ

Влияние концентрации сока из ботвы кормовой свеклы на рост

и развитие эксплантатов и их побегообразование ( г.г.)

Достоверно на 5%-ном уровне значимости Достоверно на 1%-ном уровне значимости