Изобретение относится к микробиологии и касается питательной среды для дифференциальной диагностики сибирской язвы.
Известна питательная среда ГКИ дяя выявления капсулы сибиреязвенного .микг роба, состоящая из 40% сыворотки крупного рогатого скота и 60% раствора Хенкса.
К недостаткам известной питательной с0еды относится то, что она не является оптимальной по Составу, поскольку еспечивает капсулообразование не более 60-80%.
Известна также питательная среда Для выращивания капсульной формы сибиреязвенного микроба с использованием столовой минеральной воды.
Недостатком известной среды является то, что в качестве стимулятора капсулообразования используют пищевой продукт (столовую минеральную воду), который в экстремальных условиях (в частности, в полевых и особых ситуациях, в отдаленных и южных регионах страны) бывает малодоступным. .
Цель изобретения - упрощение и удешевление питательной среды.
Поставленная цель достигается тем, что среда для выращивания капсульной формы сибиреязвенного микроба и дифференциации возбудителя сибирской язвы, содержащая сыворотку крупного рогатого скота, взамен столовой минеральной воды содержит свежую мочу человека при следующем соотношений компонентов. о6.%:
Сыворотка Крупного
рогатого скота35-40
Свежая моча здорового
человека60-66
Известно, что наиболее оптимальной средой для жизнедеятельности сибиреязвенного микроба является организм человека и животных. Поэтому предлагаемая питательная среда является моделью уелоВИЙ пребывания микроба в естественных условиях, т.е. в организме человека или животного, поскольку содержит те же компоненты (сыворотку крови, соли, аминокислоты, ще лочность, которые присутствуют в крови и
моче).
Свежевыделенная моча человека имеет слабощелочную реакцию (рН 7,8), является сложным продуктом обмена веществ, содержит более 150 компонентов органического и неорганического происхождения, г/л: азот 10-20; белки 0,02-0,07: аминокислоты (17 наименований) 0,02-(У,Об: соли Са 1,5: Мо 20-40: натрия 0,5-13,6; фосфора 1520: хлора 0,01-1.0; мальтозы 75; тиамина , Из аминокислот в моче содержатся, мг/л: аланин 3-3,1; аргинин 16-60: валин 8-70; гистидин 8,3: гликокол 17-19; изолейцин 0,3-4,0; лизин 1,5-10,5; метионин 0,20,9; треонин 2-5; триптофан 0,5-3,0; тирозин 0,8-5,5; фенилаланин 1-4,0; цистин 7,0-23,0. Из приведенного материала видно, что моча человека является естественным химическим раствором, содержащим незаменимые аминокислоты, соли, сахара и витамины, необходимые для нормальной жизнедеятельности сибиреязвенного микроба, которые в производственных условиях приходится готовить по специальной рецептуре (раствор Хенкса, среда Игла и т.д.).
Культивирование сибиреязвенного микроба во всех примерах проводили в колбах емкостью 0,5 л, козффициент заполнения (К) 0,5, при 36-38°С, доза посевного материала 510 спор/100 мл, экспозиция инкубации 10-18 ч.
П р и м е р 1. К 35 мл стерильной сывоpoTKtT крупного рогатого скота (кр.рог.ск.) прибавлянэт 65 мл свежёпрлученной мочи человека. Среду разливают в колбы по 0,05 л и засевают споровой культурой Вас. anthracts штамм 11-й вакцины Ценковского из расчета 5-10 спор/100 мл среды, закрывают резиновыми пробками и культивируют 10-18 ч при 36-38С. По истечении указанного времени стерильно готовят мазки из выросшей культуры, окрашивают синькой Леффлера и просматривают в световом микроскопе, используя
иммерсионную систему, По наличию и коли честву инкапсулированных клеток оценивают степень и характер капсулообразования.
Степень капсулообразования к 18 ч роста в культуральной жидкости 85±2%, а титр клеток составил 1,7±0, (титр клеток определяли методом предельных разведений).
П ример2. Предлагаемая среда (об, %); 38 мл сыворотки кр,рог.ск., 62 мл мочи человека. Условия инкубации как в примере 1. Степень капсулообразования к 18 ч в культуральной жидкости достигла 92 ±2 %, а титр клеток составил 8.4±0,3 -10® на 1 мл среды.
Пример 3. Предлагаемая среда (об. %); 40 мл сыворотки кр.рог.ск,, 60,0 мл мочи человека. Условия инкубирования и проведения анализа aнaлoгVlчны примеру 1. Степень капсулообразования к 18 ч роста в культуральной жидкости составили 97±3%, а титр клеток составил 2,2±0,1 10 на 1 мл среды.
Результаты зависимости капсулообразования Bacillus anthracls от соотношения компонентов среды представлены в таблице.
Таким образом, предлагаемая питательная среда для культивирования Вас. anthracis имеет по сравнению с известной следующие преимущества: замена пищевого продукта более доступным - продуктом метаболизма человека, который позволяет полностью сохранить диагностическую ценность известной оптимальной дифференциально-диагностической среды и проводить достоверную идентификацию возбудителя.
Формула изобретения
Питательная среда для выращивания капсульной формы сибиреязвенного микроба, содержащая сыворотку крупйого рогатого скота и солевой раствор, отличающаяся тем, что, с целью упрощения и удешевления питательной средь, в качестве солевого раствора она содержит свежую мочу здорового человека при следующем соотношении компонентов, об.%:
Сыворотка крупного
рогатого скота35-40
Свежая моча здорового
человека60-65
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Диагностическая питательная среда для дифференциации возбудителя сибирской язвы по капсуло- и токсинообразованию | 2016 |
|
RU2654669C1 |
Питательная среда для дифференциации Bacillus anthracis | 2018 |
|
RU2678804C1 |
ЖИДКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ HAEMOPHILUS PLEUROPNEUMONIAE | 1993 |
|
RU2076903C1 |
АТТЕНУИРОВАННЫЙ ШТАММ Bacillus anthracis ДЛЯ РАЗРАБОТКИ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ | 2013 |
|
RU2544951C1 |
СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ BACILLUS ANTHRACIS | 2001 |
|
RU2204607C2 |
ТЕСТ-ЗАРАЖАЮЩАЯ КУЛЬТУРА ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ИММУНОГЕННОСТИ СИБИРЕЯЗВЕННЫХ ВАКЦИН, ЭФФЕКТИВНОСТИ СРЕДСТВ ЭКСТРЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ | 1997 |
|
RU2141522C1 |
СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ Bacillus anthracis С ДИФФЕРЕНЦИАЦИЕЙ ШТАММОВ ПО ПРОДУКЦИИ КАПСУЛЫ, ПРОТЕКТИВНОГО АНТИГЕНА И АНТИГЕНОВ S-СЛОЯ | 2008 |
|
RU2376385C1 |
СПОСОБ СЕЛЕКЦИИ ОДНОПЛАЗМИДНЫХ ВАРИАНТОВ BACILLUS ANTHRACIS В S-ФОРМЕ ИЗ СМЕШАННОЙ (S-R) ПОПУЛЯЦИИ С ПОМОЩЬЮ MYXOCOCCUS XANTHUS | 2003 |
|
RU2233886C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИКУМА ЭРИТРОЦИТАРНОГО СИБИРЕЯЗВЕННОГО АНТИГЕННОГО ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИТЕЛ К ПРОТЕКТИВНОМУ АНТИГЕНУ | 2009 |
|
RU2410699C1 |
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ШТАММОВ СИБИРЕЯЗВЕННОГО МИКРОБА ПО ВИРУЛЕНТНОСТИ IN VITRO | 1995 |
|
RU2101351C1 |
Изобретение относится к микробиологии и касается питательной среды для дифференциальной диагностики сибиреязвенного микроба. Целью изобретения! является упрощение и удешевление питательной среды, р этой цепью солевой раствор в жидкой питательной среде заме- .няется на мочу здорового человека. 1 табл.
Колесов С.Г | |||
Питательная средаТКИ для выявления капсулы сибиреязвенного микроба | |||
Сибирская язва | |||
М.: Колос, 1976, с | |||
Счетная таблица | 1919 |
|
SU104A1 |
Способ гальванического снятия позолоты с серебряных изделий без заметного изменения их формы | 1923 |
|
SU12A1 |
М.; Советская энциклопедия, 1981, т | |||
Прибор для нагревания перетягиваемых бандажей подвижного состава | 1917 |
|
SU15A1 |
ВОДЯНОЙ ЦЕПНОЙ ДВИГАТЕЛЬ | 1923 |
|
SU481A1 |
Авторы
Даты
1992-02-15—Публикация
1990-01-05—Подача