Штамм вируса клещевого энцефалита для специфической лабораторной диагностики Советский патент 1992 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано для лабораторной диагностики клещевого энцефалита.

Цель изобретения - получение нового штамма вируса клещевого энцефалита.

Штамм выделен из мозга умершего больного и депонирован номером ГВК № 899 и характеризуется следующими признаками.

Штамм высокопатогенен для беспородных белых мышей. При заражении вызывает характерные клинические симптомы, смертность 100%-ная, инкубационный период при внутримозговом заражении 3 - 4 дн. Максимальный инфекционный титр 8,9 lg ЛДбо/1 мл, при подкожном введении инкубационный период 5 - 6 дн, инфекционный титр 7,9 Ig ЛДэд/1 мп. Штамм репродуцируется в культуре клеток СПЭВ с накоплением гемагглютининов на 2-е сутки в титре 1:64.

. Гемагглютинирующая активность при репродукции в мозге белых мышей 1:128 - 1:256. При постановке РГА оптимальная зона рН фосфатного буфера для мозговых антигенов 6,2 - 6,4, для культуральных 6,2. Штамм обладает высокой бляшкообразую. щей активностью. Титр по БОЕ 6-10 при 37°С. Прогревание при 56°С в течение 15 мин снижает титр вируса незначительно (1,8-109 БОЕ/мл).

Штамм специфически связывается со следующими антителами: моноклональны- ми антителами к белку Е штамма Софьин (1 Е 1,1; 2 Д 1; 5 - 10; 2 Н 3), с коммерческой сывороткой (штамм 139) вируса клещевого энцефалита. Штамм обладает средней степенью авидности к моноклональным и поли- клональным сывороткам, а также прочной связью антиген - антитело.

Пример. 2-дневных мышей-сосунков заражают интроцеребрально в дозе 0.01 мл вирусной суспензией штамма № 899. На 4 - 6-е сутки сосунков забивают, стерильно извлекают мозг, готовят 10%-ную суспензию на физиологическом растворе при рН 7,4.

Взвесь центрифугируют при 6000 об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость о-ц сасывают и используют в качестве антигена вируса клещевого энцефалита.

Формула изобретения Штамм вируса клещевого энцефалита ГКВ № 899 для специфической лабораторной диагностики.

Использование: вирусология, лабораторная диагностика клещевого энцефалита. Сущность: штамм Пищелкин (Мг 899 Государственная коллекция вирусов института вирусологии им. Д.И. Ивановского) выделен из мозга умершего больного 65 лет. При изучении патогенетических маркеров на модели беспородных мышей, а также чувствительности взрослых хомячков выявлено, что этот штамм высоковирулентный, обладает высокой степенью авидитета, вызывает выраженный иммунодефицит. Штамм используют для специфической лабораторной диагностики выявления клещевого энцефалита. 1 табл. S Ё

Спленоциты мышей на 7-е сутки после заражения разными штаммами вируса КЭ, Количество специфических РОК достоверно выше контрольного уровня (р 0,05).