Способ количественного определения дигидрокверцетина Советский патент 1992 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способам количественного определения дигидрокверцетина, и может быть использовано в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки.

Известен способ определения дигидрокверцетина, основанный на образовании комплексного соединения с хлористым алюминием 1, и способ спектрофотометриче- ского определения по максимуму собственного поглощения. Максимум поглощения комплекса, образующегося по реакции с хлористым алюминием, лежит в УФ-области (290-365 нм).

Это создает определенные трудности в использовании этого способа для осуществления контроля за производством дигидрокверцетина и качеством полупродуктов и готовой продукции в заводских условиях,

так как для выполнения анализа требуется специальная аппаратура, обеспечивающая анализ в УФ-области.

Наиболее близким по технической сущности является способ определения дигидрокверцетина с использованием реакции восстановления металлическим магнием в присутствии соляной кислоты в водной или спиртовой среде 2 (прототип).

Эту реакцию используют для качествен- чого обнаружения флавоноидов. Для количественного определения дигидрокварцетина способ по реакции с металлическим магнием не применяется и в литературе не описан, При использовании этого способа в количественном анализе наблюдается низкая точность анализа. При анализе предгидролизата (и продуктов его переработки) по этому способу окраска получаемого соединения неустойчива. Это приводит к

о

vj 4 О

неточным результатам определения дигид- рокверцетина в анализируемых объектах.

Цель изобретения - повышение точности и чувствительности определения. Цель достигается тем, что в предлагаемом способе определения дигидрокверцетина обработку анализируемой пробы металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде, сначала в присутствии уЪсусной кислоты при нагревании, затем добавляют соляную кислоту в объемном соотношении к уксусной не менее 2:1.

Проведение реакции в две стадии (использование более слабой восстанавливающей системы для проведения реакции восстановления металлическим магнием) обеспечивает стабильность окраски. Точность анализа при этом значительно повышается.

При использовании водно-ацетоновой среды в качестве растворителя при проведении реакции с металлическим магнием в 3 раза повышается чувствительность реакции.

Отличительными признаками предлагаемого способа являются обработка пробы металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, а затем - соляной, взятой в объемном отношении к уксусной не менее 2:1, и проведение реакции в водно- ацетоновой среде.

Объемное соотношение соляной кислоты к уксусной ограничено тем, что при уменьшении соляной кислоты окрашенное соединение неустойчиво, окраска быстро исчезает. Анализ становится невозможным.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Определение дигидрокверцетина в предгидролизате.

Отбирают 1,0 см пробы, помещают в круглодонную колбу вместимостью 50-100 см и разбавляют до 2,0 см дистиллированной водой. Затем приливают 2 см3 ацетона, добавляют 0,2 г Mg-стружки и колбу присоединяют к обратному холодильнику. Затем через холодильник приливают 2 см3 ледяной уксусной кислоты, колбу погружают в предварительно нагретую до 80-90°С водяную баню и оставляют на 30 мин. По истечении указанного времени колбу отсоединяют от холодильника и к содержимому в колбе приливают4 см концентрированной соляной кислоты (объемное соотношение HCI к уксусной 2:1). Раствор перемешивают и количественно переносят в пробирку вместимостью 20 см , ополаскивая колбу 5 см3 ацетона и дистиллированной водой до метки. Раствор в пробирке перемешивают и фотометрируют на ФЭКе

и

10

20

в кювете с толщиной поглощающего слоя I 1,0 см при длине волны А 530 нм относительно контрольного опыта. Для приготовления контрольного опыта предгидролизат в количестве, соответствующем основному опыту, помещают в пробирку и разбавляют водой до метки без добавления реактивов. Массовое содержание дигидрокверцетина, определяемое по калибровочному графику, составило 1,156 мг/см3.

Пример 2. Определение дигидрокверцетина в фильтрате.

Отбирают 5 см3 пробы и помещают в круглодонную колбу.. Приливают 2 см3 ацето15 на, добавляют 0,2 г Mg-стружки, 1 см3 уксусной кислоты и далее поступают, как при анализе предгидролизата. После нагревания содержимого колбы на водяной бане с обратным холодильником в колбу приливают 5 см соляной кислоты (объемное отношение HCI к уксусной 5:1). После фотометрирования окрашенного соединения массовое содержание дигидрокверцетина составило 0,014 мг/см .

25 П р и м е р 3. Определение дигидрокверцетина в товарном продукте.

Готовят раствор пробы в ацетоне с кон- центрацией1 мг/см . Для анализа отбирают 0,5 см3 приготовленного раствора, помеща30 ют в круглодонную колбу и разбавляют до 2 см ацетоном. Затем приливают 2 см дистиллированной воды , добавляют 0,2 г Mg- стружки, колбу присоединяют к обратному холодильнику и через холодильник прилива35 ют 2 см3 ледяной уксусной кислоты. После нагревания к содержимому в колбе приливают 5 см3 концентрированной соляной кислоты (объемное отношение НС :СНзСООН 2,5:1). Далее поступают, как при анализе

40 предгидролизата. Массовое содержание дигидрокверцетина в пробе 9,42 мг/см .

В табл. 1 приведены примеры, иллюстрирующие предлагаемый способ (примеры 1-5), а также примеры проведения анализа

45 в условиях, выходящих за гфеделы условий предлагаемого способа (примеры 6-8).

В примерах 1, 4, 5 приведены результаты анализов предгидролизатов одной и той же пробы, полученные при различных объ50 емных соотношениях уксусной и соляной кислот.

Точность и правильность предлагаемого способа проверена методом добавок за- данных масс. В табл. 2 приведены

55 результаты определения заданных масс со статистическими характеристиками.

Результаты табл. 2 свидетельствуют о том, что предлагаемый способ обладает высокой точностью, так как воспроизводимость результатов высокая (относительное

стандартное отклонение изменяется от 0,012 до 0,064 в диапазоне 0,15-0,50 мг ДКВ). Предлагаемый способ обладает и достаточной правильностью, о чем свидетельствует отсутствие систематической погрешности, невысокая ошибка определения (заданные массы находятся с ошибкой, не превышающей 5,0%) и высокий процент выявления, то есть процентная степень правильности (найденный результат, выраженный в процентах от истинного значения) в среднем 100%,

Для доказательства достоверности получаемых результатов предлагаемый способ был сравнен с методом УФ-спектрофото- метрии (по максимуму собственного погло- щения и по реакции с хлористым алюминием). Результаты сравнительных анализов приведены в табл. 3.

В табл. 4 показаны результаты, иллюстрирующие повышение чувствительности предлагаемого способа в водно-ацетоновой среде по сравнению с известным в водно- спиртовой среде.

0

5

0

5

Предлагаемый способ обладает высокой точностью, не требует сложной аппаратуры, легок в исполнении и может быть использован в производственных условиях для аналитического контроля за содержанием дигидрокверцетина в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки.

Формула изобретения Способ количественного определения дигидрокверцетина путем обработки пробы металлическим магнием в присутствии соляной кислоты в среде растворителя с последующим фотометрированием окрашенного соединения, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определения, обработку металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде сначала в присутствии уксусной кислоты при нагр.евании, затем добавляют соляную кислоту в объемном соотношении с уксусной не менее 2:1.

Таблица 1

Сущность изобретения- пробу обрабатывают в водно-ацетоновой среде металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, затем добавляют соляную кислоту при объемном отношении к уксусной не менее 2:1 с последующим фотометрированием полученного раствора 4 табл.

Таблица 2

Продолжение табл. 2

Таблица 3

Таблица 4