СПОСОБ ОТБОРА МУТАНТНЫХ ШТАММОВ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ ЦЕННЫЕ ПИТАТЕЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА Советский патент 1966 года по МПК C12N15/01 

Известен способ отбора мутантных штаммов, выделяюш,их ценные питательные вещества, путем совместного выращивания на агаризованной синтетической питательной среде популяризации штаммов с индикаторными микроорганизмами, потребляющими в процессе своей жизнедеятельности эти питательные вещества, и последующего отбора колоний мутантиых штаммов по интенсивному росту ин дикаторных микроорганизмов.

Предлагаемый способ заключается в сле-i дующем. Приготавливают питательную средз( следующего состава (в г/л): глюкоза 20, KaHPOi 2, (NH4)2SO4 1, MgSOi 1, агар 20, затем ее стерилизуют, после чего вносят в нее смесь витаминов в объеме 1 мл/л.

На чашку Петри с приготовленной питательной средой засевают смесь клеток водорослей и дрожжей, причем клетки водорослей предварительно облучают и разводят водой до количества 100-500 жизнеспособных клеток на одну чашку.

Ауксотрофные, нуждающиеся в аминокислотах дрожжи засевают из расчета 10-20 млн. клеток на чашку. Р1нкубация протекает при 30° С в темноте.

лупы. Колонии водорослей, вокруг которых заметно более активное размножение дрожжей, рассматривают как предполагаемые мутаиты-кормильцы. Эти колонии отсевают иа среду, обеспечивающую рост водорослей и не дающую роста дрожжей, нуждающихся в аминокислотах.

Предполагаемые мутанты повторно оценивают. Для этого их засевают в виде штрихов иа чашку Петри с иредварительио иаиесениыми на нее ауксотрофными дрожжами той же консистенции (10-20 млн. клеток на чащку). На эту же чашку для сравнения засевают суспеизию клеток исходного штамма водорослей.

Мутанты, подтвердившие способность подкармливать ауксотрофные дрожл и, являются мутантами-кормильцами. От примеси дрожжевых клеток их очищают обычными методами выделения чистых культур водорослей.

Получеиные мутанты-кормнльцы размножают. После проверки их биомассы биохимическим путем на содержание нулсиой аминокислоты мутанты-кормильцы используются для выращивания одноклеточных водорослей в промышленных установках. 3 тем совместного выращивания на агаризованной синтетической питательной среде этих штаммов с другими микроорганизмами, потребляющими в процессе своей жизнeдeятeльf ности питательные вещества, выделяемые при автолизе клеток отбираемых штаммов, отличающийся тем, что, с целью отбора штаммоЕ} е повышенным содержанием ценных аминокислот в биомассе микроорганизмов, в качестве 4 последних используют водоросли, клетки ко-} торых перед посевом обрабатывают мутагеном, а для совместного выращивания с ними используют ауксотрофные дрожжи, нуждаюч щиеся в этих аминокислотах, и по количеству дрожжей, выросших после автолиза краевых клеток водорослей, соприкасающихся с дрожжевыми клетками, судят о полноценности мутантных штаммов в отношении аминокислот.