Изобретение относится к области получения соединенир, которые могут найти нримеиение в качестве биологически активных веплеств.
Предложенный способ получения 3(2)-аминокислотных эфиров, производных аденозипа или адеиозин-5-фосфата, общей формулы
ХОСНп
гдеХ-П, алкил, НгОзР, алкнл ПО(О)РО; R- алкил или арил; А - остаток аденина, основан на том, что аминокислоту, например фепилаланин, иодвергают взаимодействию с производным аденознна в среде органнческого растворителя, например формамнда, в прнсутствин хлористого водорода н карбонилднимидазола с последующим выделением целевого продукта известными приемами.
Пример 1. Получение 3(2)-О-Ь-фенилаланил-5-тритиладенозина н 3(2)-О-Ь-фенилалаиил-адеиозниа.
в сухом эфире, через 10 мин вносят 17,8 мг (0,11 ммоль) карбонилднимидазола, встряхивают 5-10 мин. и к реакционной массе нрнливают раствор 50,9 мг (0,1 ммоль) 5-трнтиладеиозина в 0,4 мл абс. ди.метнлформамнда. Реакционную смесь перемешивают ири комнатиой температуре 2 час, разбавляют 4 мл охлаждеиный до О воды, смесь оставляют на 15 мин при 0°, осадок отделяют центрифугироваиием н сушат в вакууме над нятнокисью фосфора. Сухое вещество растворяют в 2 мл хлороформа, наносят на ко,1оику (38X1 см) с иолиамидом и вещество элюируют смесью хлороформ-гексаи 7 : 3 по объему (примерпо 30 мл). Растворитель упаривают,
1 остаток (70,6%). cyujaT в эксикаторе. Выход 58,1 мг Т. пл. 147-150°С. УФ-снектр: л,,а,.с 259 мм. е 29.4-10.
Найдено, %: С 70,60; Н 6,88.
C3sH:;,iN,O,C,ni..
Вычислено, %: С 71,24; П 6,53.
В реакцнонную смесь аналогичной но величине загрузки после 4-6 час неремешивання при О ирнливают 1 мл 1 н. хлористого водорода в эфире, иеремешнвают 5 мин ири 0°, оставляют на 25-30 мин в вакууме и наносят на щесть лнстов ленииградской быстрой бумаги для хроматографи. Провот,я электрофорез в 6%-ной уксусной кнслоте (рП 2,5), вещество
поглощающее в УФ-свете (Ef глицин 1,64, Ef гистидин 1,1), элюируют 20 Мл воды и элюат
ЛИОфИЛИЗЧЮТ.
Выход 29,2 мг (70,5%). Т. пл. 315°С. УФспектр: шкс 259 мм. Хроматография иа бумаге; система п. бутаиол-вода-уксусная кислота (№ 1) RI 0,53; изомасляная кислота- насыщенный раствор аммония в воде (N° 2) 10 : 6 ( 3,6), Rf 0,89; этанол- 1 М раствор уксуснокислого аммония в воде 70 : 30, рН 7,5 (Л2 3), Rf 0,72. Соотношение аминокислота/ну клеозид 1 : 1,19.
Аналогично синтезируют с D-фенилаланином, L- и С-валииом, L-лейцином, L-аланииом и др.
П р и м ер 2. Получение 3(2) -O-L-феиилаланил-аденозии-5-фосфата.
К раствору 16,5 мг (0,1 ммоль) L-фенилаланина в 0,15 мл формамида ирибавляют 0,02 мл (0,1 ммоль) 5 н. хлористого водорода в сухом эфире, через 10 мин вносят 17,8 мг (0,11 ммоль) карбонилдиимидазола, встряхивают 5-10 мин и к реакционной массе ириливают раствор 39 мг (0,1 ммоль) динатриевой соли аденознн-5-монофосфата в 0,35 мл абс. диметилсульфоксида. Реакционную смесь неремещивают 6-8 час нри комнатной температуре, нриливают 15 мл охлажденного до 0° ацетона, осадок отделяют центрифугированием и 3 раза промывают охлал денным ацетоном, затем эфиром. Высушенный в течение часа в вакуум-эксикаторе остаток растворяют в 0,1 мл воды, наносят на лист бумаги размером 38X19 см и проводят электрофорез в 6%-ной уксусной кислоте (800 в, илотиость тока 22 в/см). Полосу, поглощающую в УФ-свете и двигающуюся к аноду (Ef глиции 0,7-0,8), элюируют 30-40 мг воды при 4°С, и раствор лиофилизуют. Выход 1 г 12 м.г, или 498 ОЕ нри 259 мм (21%). УФ-снектр: .„акс 259 мм (е 10800). Хроматография на бумаге в системе 1 Rf 0,38. Соотношение аминокислота/нуклеотид 1 : 0,97.
При проведении аналогичной реакции в воде вместо диметилсульфоксида выход составил 12-15%.
Подобным способом проведен синтез с валиком, аланином, лейцином, глицином.
Пример 3. Получение 3(2)-О-Ь-фепила л анил-аденозип-5-мети л фосфата.
К раствору 16,5 мг (0,1 ммоль) L-фенилаланппа в 0,15 мл формамида ирибавляют 0,02 мл (0,1 м.юль) 5 н. хлористого водорода в сухом эфире, через 10 мин вносят 17,8 мг (0,11 ммоль) карбоиилдиимидзола, встряхивают 5-10 мин и к реакционной массе приливают раствор 38,3 мг (0,1 ммоль) натриевой соли адеиозии-5-метилфосфата в 0,35 мл абс. диметилсульфоксида. Реакционную смесь перемешивают 6-8 час при комиатной темиературе, приливают 15 мл охлажденного до 0° ацетопа, осадок отделяют центрнфугировапием и 3 раза промывают охлаждеиным ацетоном, затем эфиром. Высушенный в течение часа в закуум-эксикаторе остаток растворяют в 0,1 Л1Л воды, наносят на лист бумаги размером 38X19 см и проводят электрофорез, как в примере 2. Полосу, поглощающую в УФ-свете и двигающуюся к аиоду (Ef глицип 0,7-0,8), элюируют 30-40 мл воды при 4°С, п раствор лпофилизуют. Выход I г 12 мг, или 331 ОЕ ирп 259 мм (1.9%). УФ-спектр: /. 259 ммк (Е 11300). Хроматография па бумаге в н. BuOli-вода-АсОН 5:3;2 Rf 0,41.Молярная эллиптичность 0 клешневидного комплекса меди п основаиия Шиффа салицилового альдегида п L-валппа 8800 (отрицательная кривизиа). L-валип, последовательно проведенный через все этапы взаимодействия в синтезе 3(2)-0-Ь-валиладеиозин-5-фосфата, после превращения в аналогичное основание Шиффа показал в 8800. Для D-валииа были иолучепы те же самые результаты 0 8800, ио с иоложительпой кривизной.
Предмет з о б р е т е м и я
Способ получеппя 3(2)-О-аминокислотных эфиров, пропзводных аденозина или адепозип5-фосфата, отличающийся тем, что аминокислоту, например феиилаланин, подвергают взаимодействию с производным аденозпна в среде органического растворителя в присутствии хлористого водорода и карбоинлдиимидазола с последующим выделеиием целевого продукта известными ириемами.
