Циклические аналоги каллидина и других пахикининов,обладающие пролонгированным гипотензивным действием в сочетании с низкой или полностью отсутствующей миотропной активностью Советский патент 1986 года по МПК C07K7/06 A61K38/08 

Изобретение относится к новым соединениям - циклическим аналогам кал лидина и других пахикининов, обладающим биологической активностью, которые могут найти применение в ме- дицине.

Каллидин и другие пахикинины - вещества пептидной структуры, широко распространены в живой природе и выполняют функции биорегуляторов сердечно-сосудистой и других систем организма животных и человека. С нарушением анаболизма и метаболизма пахикининов связаны различные заболевания и патологические состояния живого организма l .

Однако для лечения подобных нарушений природные пахининь не применимы. Их основные недостатки - кратковременность действия (период полураспада их в крови 0,32 мин 2, а также отсутствие селективности З.

Известен синтетический аналог каллидина - цикло-(7-глицин)-кал- лидин, в котором для образования цикла использована к,-аминогруппа лизина 4 .

Однако известное соединение не- обладает биологической активностью.

Цель изобретения - получение но- вых биологически-активных соединений - циклических аналогов каллидина и других пахикининов, обладающих пролонгированным гипотензивным действием в сочетании с низкой или пол- ностью отсутствующей миотропной активностью, расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается цик лическими аналогами каллидина и других пахикининов общей формулы

R-Ri-Pro-Pro-Gly-Phe-R -Pro-Phe-Arg где В - лизин, водород, со -аминодо

декановая кислота; В - аргинин, лизин;

В - серин или глицин.

В отличие от известного цикло- -(7-глицин)-каллидина для образования цикла в предлагаемых соедине- ниях использована Ы-аминогруппа лизина или со-аминододекановой кислоты

Способ получения предлагаемых соединений основан на известных методах пептидной химии, например азид- ном, методе активированных эфиров с использованием блокирования функциональных групп и последующего де5

10 15

20

25

30 5

0

5

0

5

блокирования известными приемами 5 .

Для синтеза используют производные аминокислот, поставляемые фирмой Реанал (Венгрия). Упаривания проводят на ротационном испарителе при 30 С. Все аминокислоты, кроме глицина,имеют L-конфигурацию. Температуры плавления, определенные в открытых Капиллярах, приведены без исправления. Индивидуальность полученных соединений определяют по тех на пластинках Силуфол или Мерк. Приведены хроматографичес- кие подвижности В. на пластинках Силуфол УФ 254 в следующих системах: А - хлороформ-этанол-этилаце- тат-уксусная кислота-вода (85:5:8: :2:0,25); Б - хлороформ-этанол-н-бу- танол-этилацетат-вода (10:6:4:3:1); В - хлороформ-метанол-вода (50:30:5); Г - бутанол-уксусная кислота-вода (4г1:1); Д - этилацетат-пиридин-ук- сусная кислота-вода (5:5:1:3), а также электрофоретическая подвижность по отношению к гистидину на бумаге FN-16 в 1 н. или 5 н. уксусной кислоте. Пятна веществ обнаруживают осмотром хроматограмм в ультрафиолетовом свете, а также опрыскиванием нингидрином или при помощи хлора - реагента бензидина. Для всех соединений данные элементного анализа удовлетворительно совпадали с вычисленным содержанием С, Н, N. Для идентификации соединений широко используют спектры ПМР при 60 МГц, снятые на приборе Perkin-Elmer R12A. Химические сдвиги, форма и интенсивность сигналов соответствуют строению пептидов. Строение веществ под- тверясдено также аминокислг тным анализом, который вьшолнен на анализаторе Biocal-200 после гидролиза пептида в запаянной ампуле при 110 С в течение 24 ч.

На фиг. 1 даны кривые, характеризующие влияние брадикинина, ЦК и АЦАБ на артериальное давление наркотизированной крысы при дозе 50 мкг/кг; на фиг. 2 - влияние брадикинина в дозе 50 мкг/кг и ЦАДБ в дозе 250 мкг/кг на артериальное давление наркотизированных крыс; на фиг. 3 и 4 - миотронный эффект БК, ЦК и ЦАДБ в опытах in vitro на изолированной матке крыс; на фиг. 5 - схема синтеза цикло- и -каллидина ; i

3

на фиг. 6 - схема синтеза И-арги- нилцикло- Г(м -лизин,6-глицин)-бра- дикинина; на фиг. 7 - схема синтеза цикло-(и-аминододеканош1 )брадики- нина.

Пример 1. Цикло- м -калли- дин (I).

П -Нитробензкловый эфир трет -бут- оксикарбонил-0-бензилсерилпролилфе- нилаланина (4).

7,17 г (15 ммоль) гидробромида П-нитробензилового эфира пролилфе- нилаланина (3) и 6,61 г (16,5 ммоль пентафторфенилового эфира трет -бут- оксикарбонил-0-бензилсерина растворяют в 50 мл диметилформамида. Добавляют N-метилморфолин до рН 8 (проба нанесением капли на влажную индикаторную бумажку). Выдерживают , 30 мин при комнатной темлературе, упаривают, остаток растворяют в 50 мл зтилацетата, промывают 50 мл 10%-ного раствора бисульфата калия, затем 50 мл воды, сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и упаривают до 15 мл, добавляют 100мл гексана, выдерживают при О С. Осаждается масло, которое высушивают при 50 С -и 1 мм рт.ст. Выход 10,0 г (99%). RJ 0,55 (этилацетат), 0,90 (А).

Трифторацетат-п-нитробензилового эфира 0-бензилсерилпролилфенилалани- на (5).

9,5 г (4) (14 ммоль) растворяют в 20 мл трифторуксусной кислоты, выдерживают 20 мин при комнатной температуре, упаривают при 20 С, остаток растирают с 100 мл безводного эфира. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают эфиром и выдерживают над гидроокисью калия при 1 мм рт.ст. Выход 8,04 г (94%) -25,3° (с1, диметилформам-ид) . К. 0,60 (5н. уксусная кислота), R 0,06 (А); 0,46 (Б); 0,76 (В); 0,58

(Г). I

н -Нитробензиловый эфир трет -бутоксикарбонилфенилаланил-0-бензилсе-рилпролилфенилаланина (6).

6,89 г (5) (10 ммоль) и 4,74 г (11 ммоль) пентафторфенилового эфира трет -бутоксикарбонилфенилаланина расворяют в 50 мл диметилформамида, добавляют К-метш1морфолин до рН 8 и выдерживают 1 ч при комнатной температуре. Упаривают, к остатку добавляют 50 мл 10%-ного водного раство9587

ра бисульфата калия и 20 мл эфира. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промьшают водой, затем эфиром. Сушат над пятиокисью фосфора при

5 1 мм рт.ст. Выход 7,19 г (87,5%), -32,5° (с1, диметилформамид) . R 0,42 (А), 0,92 (Б), 0,93 (В), 0,86 (Г), 0,80 (Д).

Гидразид трет -бутоксикарбонил0 фенилаланил-0-бензилсерилпролилфенил- аланина (7).

4,11 г (6) (5,0 ммоль) и 5 мл гидразингидрата в 100 мл метанола перемешивают 3 ч при комнатной темпе5 ратуре, затем выдерживают 20 ч при комнатной температуре. Упаривают до 20 мл, добавляют 100 мл воды и 50 мл эфира. Фильтруют, осадок на фильтре промьшают водой, затем эфиром.

0 Выход 3,33 г (957,,Y -51,2° (с 1, диметилформамид). Р-f 0,30 (А), 0,81 (Б), 0,90 (В), 0,73 (Г).

П-Нитрофениловый эфир об-бензилок- сикарбонил- -(трет-бутоксикарбонил5 -и-нитроаргинил)лп1зина (8).

К раствору 12,8 г (34,3 ммоль) Трет -бутоксикарбонил-со-нитроаргинина и 3,80 мл (34,3 ммоль) N-метилморфо- лина в 100 мл диметилформамида при

0 15 добавляют 4,63 мл (34,3 ммоль) изобутилового эфира хлоругольной кислоты, а затем вводят 10,0 г (22,8 ммоль) порошка хлористоводородной соли и-нитрофенилового эфира

ci-бензилоксикарбониллизина. Перемешивают 30 мин при -10 С, затем в течение 2 ч по каплям добавляют раствор 2,55 мл (22,8 ммоль) N-метилморфоли- на в 50 мл диметилформамида. ПереQ мешивают еще 30 мин при , затем добавляют 1,33 мл (12,1 ммоль) 1 -диметиламиноэтиламина. Снова перемешивают 30 мин, упаривают, остаток растворяют в смеси 100 мл этил5 ацетата и 100 мл воды. Этилацетат- ный слой промывают 10%-ным растворами бикарбоната калия и бисульфата калия дважды и водой. Сушат над сульфатом магния, фильтруют, фильт0 Р т упаривают. Выход 13,5 г (86,5%). Wr -20,9 (с1, диметилформамид). Rf 0,80 (А), 0,90 (Г).

трет -Бутоксикарбонил-и-нитроаргинилпролин (9).

I

5 20 г (53,6 ммоль) трет -бутокси- карбонил-со-нитроаргинина 3/4 тет- рагидрофурана суспендируют в 300 мл безводного этилацетата и при охлаждении (0°С) добавляют 0,3 г (56 ммоль) пентафторфенола и 11,6 г (56 ммоль) дициклогексилкарбодиими- да. Перемешивают 10 ч при О С; фильтруют, при О С фильтрат встряхивают с 10%-ным раствором бикарбоната калия и водой (по 100 мл), затем сушат безводным сульфатом магния, фильтруют и упаривают. Полученное масло, содержащее пентафторфенило- вый эфир трет -бутоксикарбонил-и-нит роаргинина, растворяют в 300 мл ди- метилформамида, добавляют 9,25 г (80 ммоль) пролина, N-метилформолин до рН 8 и по каплям воду до растворения пролина. Выдерживают 2 ч при комнатной температуре. Упаривают, .остаток растворяют в 100 мл хлороформа, полученный раствор промывают 50 мл 10%-ного раствора бисульфата калия, 50 мл воды,.а затем 100 мл насьщенного раствора бикарбоната калия. Бикарбонатный экстракт промывают 50 мл эфира и подкисляют бисульфатом калия до рН 2. Полученную смесь экстрагируют 100 мл хлороформа, экстракт промывшот 50 мл воды, сушат безводным сульфатом магния. Фнпьтрушт, упаривают, полученное масло закристаллизовывают растиранием сф смесью этилацетат-гек- сан (1:1). Выход 10,3 г (46,1%). Wo 28,0 (с 1, диметилформамид) R 0,14 (А), 0,50 (Б), 0,78 (В), 0,67 (Г), 0,84 (Д).

Трифторацетат со-нитроаргинилпро- лина (10).

Получают аналогично (5), исходя из (9). Выход 99%. -24,4° (с 1, диметилформамид). 0,65 (1н. уксусная кислота). Ej. 0,08 (Б), 0,20 (В), 0,22 (Г), 0,40 (Д).

о(. -Бензилоксикарбонил -(трет-бут- оксикарбонил -со-нитроаргинил )лизил- -и-нитроаргинилпролин (11).

10,0 г (8) (14 ммоль) и 7,78 г (10) (18,5 ммоль) растворяют в 100 мл диметилформамида и добавляют N-метилморфолин до рН 8. Выдерживают 20 ч при комнатной температуре. Упаривают, остаток растворяют в 50 мл хлороформа, затем экстрагируют 50 мл 10%-ного бисульфата калия (дважды) и 50 мл воды. При упаривании хлороформного раствора обра- зуется кристаллический осадок, который суспендируют в эфире, фильтруют, на фильтре промывают эфиром. Выход 11,7 г (96%). -23,5° (с 1, диметилформамид). F.f 0,02 (А), 0,50 (В), 0,78 (В), 0,68 (Г).

Трифторацетат exi -бензилоксикарбо- нил, СО -нитроаргиниллизил-и-нитроар- гинилпролина (12).

Синтезируют аналогично (5) исхо- дя из (11), за исключением того, что вместо трифторуксусной кислоты используют ее смесь с хлористым метиленом (объемные соотношения 1:1). Выход 96%. -12,0° (с 1, ди- метилформамид) . Е 0,52 (1н. уксусная ккслота). RJ 0,16 (Б), 0,52 (В), 0,54 (Г). .

а: -Бензилоксикарбонил, Е -(трет -бут- оксикарбонилфенилаланил-0-бензилсерилпролилфенилаланил-со-нитроарги-нил)лизил-0}-нитроаргинилпролина ( 13). 1,42 г (7) (2,03 ммоль) растворяют в 50 .мл длметилформамида и при охлаждении до -30°С добавляют 0,66 нп

(6,09 ммоль) свежеприготовленного 9,25 н. раствора безводного хлористого водорода в диоксане в 5 мл диметилформамида и 0,31 мл (2,64 ммоль) трет -бутилнитрита в 3 мл диметилформамида. Перемешивают 30 мин при -10 С, а затем при -30 С добавляют раствор 0,85 мл (6,09 ммоль) триэтиламина в 10 мл диметилформамида, раствор 1,81 г (13) (2,03 ммоль) и 0,28 мл

(2,03 ммоль) триэтиламина в 20 мл диметилформамида. Перемешивают при 0°С и порциями добавляют раствор 0,28 мл (2,03 ммоль) триэтиламина в 10 мл диметилформамида (по 2 мл каждый час)

Затем реакционную смесь выдерживают 20 ч при 0°С, вьшивают в 2 л 1%-ной ; тссусной кислоты, снова выдерживают 20 ч при О С. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат над пятиокисью фосфора при 1 мм рт.ст. Выход 2,44 г (83%) .x.,2 (с 1, диметилформамид). R 0,06 (А), 0,62 (Б), 0,87 (В), 0,80 (Г).

трет -Бутиловый бензилоксикар- бонилпролилглицина (14). 10,0 г

(40 ммоль) бензилоксикарбонилпролина растворяют в 50 мл диметилформамида, добавляют 4,45 мл (40 ммоль) N-ме- тилморфолина и при -15 С по каплям охлажденный раствор 5,30 мл

(40 ммоль) изобутилового эфира хлор- угольной кислоты в 10 мл диметилформамида. Затем реакционную смесь

перемешивают еще 30 мин при -15°С и добавляют охлажденную суспензию 10,6 г (50 ммоль) фосфита трет -бутилового эфира глицина и 5,6 мл (50 ммоль) N-метилморфолина. Перемешивают 30 мин при -15 С, затем реакционный сосуд оставляют на 15 ч при -10°С. Упаривают, остаток растворяют в смеси 100 мл этилацетата и 100 мл воды, этилацетатный слой промывают 10%-ным растворами бикарбоната калия, бисульфата калия и водой (по 50 мл), сушат безводным сульфатом магния, фильтруют и упаривают. Полученное масло закристаллизо- вывают обработкой смесью эфира с гексаном (1:1). Выход 9,2 г (63%). Т.пл. 71-72°С л - -49,0° (с 1, диметилформамид). R 0,55 (А), 0,64 (Б), 0,68 (В),

трет -Бутиловый эфир пролилглици- на (15).

5,0 г (14) гидрируют в растворе 50 мл этанола в присутствии паллади- евой черни 5 ч. Затем отфильтровывают катализатор, фильтрат упаривают, остаток растворяют в смеси сухого эфира с г.ексаном (1 :2 ) и снова упаривают. При этом происходит кристаллизация и после полного упаривания получают бесцветное кристаллическое вещество. Выход 2,8 г (89%). Т.пл. 56-57°С. с -38,6° (с 1, диметилформамид). ЕН,-С 0,83 ( 1н. уксусная кислота).

трет -Бутиловый эфир ск1 -бензилок- сикарбонил,8 - фенилаланил-0-бен- зилсерилпролилиенилаланил-С -нитро- аргинил лизил-О-ннтроаргинилпролил- пролилглицина (16).

2,44 г (13) (1,68 ммоль) растворяют в 30 мл диметилформамида, при 0°С добавляют 1,40 г (1,85 ммоль) комплекса дициклогексилкарбодиимида с пентафторфенолом (1:3) (комплекс F) и 0,77 г (15)-(3,36 ммоль). Выдерживают 20 ч при комнатной температуре. Упаривают, затем добавляют 50 мл хлористого метилена, фильтруют, фильтрат упаривают, остаток растирают с эфиром. Полученное вещество наносят на колонку с силикагелем (3x100 см), через колонку пропускают сначала хроматографическую систему А (1 л) затем систему Б. Фракции, поглощающие при 280 нм (Увикорд 11) объединяют и снова наносят- на колонку с силикагелем (3x250 см), элюиру- ют системой Б. Фракции, содержащие чистый декапептид (контроль по ТСХ),

с объединяют, упаривают, растирают с эфиром. Выход 1,95 г (70%) .о, -48,0 (с 1, диметилформамид).R 0,08 (А), 0,82 (Б), 0,91 (В), 0,80 (Г).

0 Гидрохлорид об-бензш1оксикарбонил - Ленилаланил-О-бензилсерилпролил- фенилаланил-о-нитроаргинил.лизил- -со-нитроаргинилпролилпролилглицина (17).

5 1,0 г (16) (0,60 ммоль) растворяют в О мл безводного хлористого ме- т1-шена и при 0°С добавляют 10 мл 8 н. раствора сухого хлористого водорода в диоксане. Выдерживают 15 мин

0 при комнатной температуре, упаривают при 20°С. Остаток растирают с безводным эфиром. Выход 0,90 г (97%). сс р° -46,5° (с 1, диметилформамид). Ej. 0,43 (5н, уксусная кислота). /

5 0,21 (Б), 0,76 (В), 0,58 (Г). Цикло- сс-бензилоксикарбонил, - - (фенилаланил-0-бензилсерилпролил- фенилаланил-и-нитроаргиниллизил)- -со-нитроаргинилпролилпролилглицил

0 (8).

,

0,33 г (17) (0,214 ммоль) и 0,030 мл (0,216 ммоль) триэтиламина растворяют в 800 мл диметилформамида (диметилформамид сушат над окисью бария и перегоняют, а затем ректифи- цируют над нингидрином в атмосфере аргона при мм рт.ст.), охлаждают до -6 С, добавляют 49,4 мг N-окси- сукцинимида (0,428 ммоль) и при перемешивании Гатмосфера аргона) в течение 10 ч добавляют раствор 66,4 мг дициклогексилкарбодиимида в 100 мл диметилформамида. При этом поддерживают температуру -6°С. Затем смесь выдерживают 20 ч при -5°С и 36 ч при комнатной температуре. Упаривают, остаток растирают с эфиром, затем промывают водой. Полученное вещество наносят на колонку с силикагелем (2x100 см), элюируют 0,5 мл хроматографической системы А, затем системой Б. Объединяют фракции, содержащие предполагаемый циклопвптид (наиболее хроматографически подвиж- ный компонент смеси циклизации пептидной природы, поглощает при 280 нм). Упаривают, растирают с эфиром. Выход 25 мг (7,9%). -71,2° (с 0,5,

5

метанол). Rj О.,03 (А), 0,69 (Б), 0,84 (В), О 62 (Г).

Цикло- N -каллидин (1).

20 мг (18) -(0,0135 ммоль) раст- воряют в 1 мл метанола, добавляют I каплю уксусной кислоты и 0,2 мл воды Гидрируют при атмосферном давлении 70 ч в присутствии свежеприготовленной палладиевой черни. Фильтруют, упаривают, трижды лиофилизуют из воды. Выход 17 мг (93%). Полученное вещество оказывается хроматографи- чески и электрофоретически совершенно чистым. При инкубации с трипси- ном происходит расщепление с образованием каллидина, в свою очередь, распадающегося на лизин и. брадики- нин (электрофорез и хроматография продуктов расщепления со свидетеля- ми), что является доказательством цикличности структуры. E,,;g 0,85 (Дн, уксусная кислота). RJ. 0,60 (метанол-вода-ацетат аммония) 9,5 мл 0,5 мл; 0,15 г, силанизированная пластинка Мерк).

Пример 2. N-Аргинилцикло- - (N -лизин, 6-глицин) брадикинина (2).

трет- -Бутоксикарбонил фенилаланил- глицин (19).

6,4 г (16,6 ммоль)п -нитрофенило- вого эфира Трет -бутоксикарбонилфе- нилаланина, 1,13 г (15 ммоль) глици- на и 1,67 мл (5 ммоль) N-метил- морфолина растворяют в смеси 200 мл диметилформамида и 20 мл воды. Полу- ченньй раствор выдерживают 20 ч при комнатной температуре, упаривают и оставшееся масло растворяют в смеси 80 мл 10%-ного водного раствора бикарбоната калия и 50 мл этилацета- та. Этилацетатный слой отделяют, а водный слой экстрагирук5т эфиром (50 мл ) и нейтрализуют избытком 10%- ного водного раствора бисульфата калия (до рН 2), Полученньй раствор экстрагируют этилацетатом (2x50 мл), экстракт промывают водой (50 мл), сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и упаривают досуха. Получают бесцветное кристаллическое вещество. Выход 4,0 г (82,7%). Для аналитических целей кристаллизуют из этилацетата. Т.пл. (с разл. , -9,0° (с 1, диметилформамид). Е 0,85 (А), 0,90 (В), 0,88 (В).

з О 5 0 5

0

5 Q 5 0 5

h -Нитробензшювый эфир трет -бут- оксикарбонилфенилаланилглицилпролил- фенилаланкна (20).

2,80 г (19) (.8,7 ммоль) растворяют в 50 мл сухого диметилформамида, добавляют 1,84 г (10 ммоль) пента- фторфенола, охлаждают до -20 С и вводят 1,90 г (9,2 ммоль) дициклогексил- карбодиимлда, встряхивают до растворения последнего и вьщерживают 30 мин при О С. Затем добавляют 4,15 г (З) (8,7 ммоль) и N-метилморфолин до рН 8„ Выдерживают 3 ч при комнатной температуре, упаривают, к остатку добавляют- 100 мл хлористого метилена, фильтруют, фильтрат экстрагируют 10%-ными растворами бикарбоната калия, бисульфата калия и водой (по 100 мл). Сушат нед безводным сульфатом магния, фильтруют и фильтрат упаривают. Обраузется масло, которое закристаллизовьшают растиранием с безводным эфиром. Выход 5,4 г (88,4%). Т.пл. 125-155°С. о(.-45,6 (с 1, диметилформамид). R, 0,88 (А), 0,91 (Б), 0,91 (Г).

Гидразид трет -бутоксикарбонил- фенилаланилглицилпролилфенилалани- на (21).

3,0 г (20) (4,26 ммоль) и 1,0 мл гидразингидрата нагревают 1 ч в 30 мл этанола при 70 С. Затем фильтруют, к фильтрату добавляют 50 мл воды и выдерживают 20 ч при. -10 С, отфильтровывают и кристаллы на фильтре промьшают 30 мл 50%-ного водного этанола, затем водой до нейтральной реакции фильтрата. Сушат в эксикаторе над пятиокисью фосфора. Выход 2,30 г (92,8%). Т.пл. 140-160°С. oij. -59,8° (с 1, диметилформамид). R 0,93 (А), 0,92 (Б), 0,91 (Г).

Hi, -Бензилоксикарбонил, Е -(трет - -бутоксикарбонил-о-нитроаргинил)ли- зилпролин (22).

10,0 г (8) (14,2 ммоль) растворяют в 100 мл диметилформамида, вводят 2,46 г (21,4 ммоль) мелкорастертого пролина, 1,66 мл (14,9 ммоль) N-ме- тилморфолина и перемешивают на магнитной мешалке 20 ч. Затем упаривают, остаток растворяют в смеси 100 мл этилацетата и 100 мл 10%- ного раствора бисульфата калия, водный слой отделяют, а этилацетатньш слой экстрагируют 10%-ным раствором бисульфата калия, а затем 10%-ным

раствором бикарбоната калия (по 100 мл). Водно-бикарбонатный слой отделяют, нейтрализуют избытком 10%- ного раствора бисульфата калия до рН 2 и экстрагируют этилацетатом (2 X 100 мл). Экстракт сушат безводным сульфатом магния, фильтруют, упаривают. Получают бесцветное аморфное вещество. Выход 7,9 г (82%). -23,1 (с 1, диметилформамид) R 0,54 (А), 0,81 (Г).

Трифторацетат о(,-бензилоксикарбо- нил, 8 - со-нитроаргинил)-лизилпроли- на (23).

Синтезируют аналогично (10), исходя из (22). Выход 98%. Ец; 0,49 (5н. уксусная кислота).И -11,1 (с 1, диметилформамид). R, 0,57 (В), 0,70 (Д).

oi -Бензилоксикарбонил, f -(трет - -бутоксикарбонилфенилаланилглицил- пролилифенилаланил-(д)-нитроаргинил) лизилпролин (24).

2,1 г (21) (3,62 ммоль) растворяют в 50 мл диметилформамида, охлаждают до -30 С и, перемешивая, добавляют охлажденную (-70°С) смесь в 3,5 мл,(15,7 ммоль) 4,5 н. раствора сухого хлористого водорода в тет- рагидрофуране и 20 мл этилацетата. Затем при -30 С по каплям добавляют охлажденный раствор 0,45 мл (3,87 ммоль) трет -бутилнитрита в 10 мл этштацетата. Вьщерживают 30 мин при -35°С, затем добавляют 1,76 мл (15,8 ммоль) N-метилморфолина, после чего добавляют еще раствор 2,86 г (23) (3,87 ммоль) и 0,44 мл Н-метил- морфолина в 50 мл диметилформамида. Выдерживают 3 сут при -10°С, упаривают, остаток растворяют в смеси 100 мл хлористого метилена и 100 мл воды. Слой хлористого метилена отделяют, промьшают последовательно 10%-ными растворами бикарбоната калия, бисульфата калия и водой (по 100 мл), сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и упаривают. Получают масло, которое закристалли- зовьшают при растирании со смесью эфира с этилацетатом (1:1). Выход 3,50 г (85,8%), т.пл. 140-177°С. 3 - -44,1° (с 1, диметилформамид) RJ 0,53 (А), 0,37 (Б), 0,87 (Г).

трет -Бутиловый эфир ос-бензилокси- карбонил, -(трет -бутоксикарбонил- фенилаланилглицилпролилфенилаланил-О-нитроаргинил)лизилпролилпролил- глицина (25).

2,70 г (24) (2,40 ммоль) растворя- с ют в 40 мл диметилформамида, охлаждают до О С и добавляют 2,19 г (2,89 ммоль) комплекса F и 1,1 г (15) (4,8 ммоль). Затем выдерживают 20 ч при комнатной температуре, упарива- 0 ют, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена, фильтруют, фильтрат промьшают 50 мл 10%-ного раствора бисульфата калия и 50 мл воды. Сушат над безводным сульфатом Mars ния, фильтруют, упаривают. Остаток дважды растворяют в минимальном объеме хлористого метилена и осаждают эфиром. Выход 2,8 г (87,2%), т.пл, 150-193°С, с разл. -60,3 0 (с 1, диметилформамид). R, 0,57 (А), 0,80 (Б), 0,60 (Г).

Гидрохлорид -бензшюксикарбонил, -(фенилаланилглидилпролилфенилала- нил-со-нитроаргинил )лизилпpoлилпpoлил- 5 глицина (26).

1,8 г (25) (1,35 ммоль) при 0°С растворяют в 20 мл смеси трифторук- сусной кислоты с хлористым метиленом (1:1), выдерживают 20 мин при ком- 0 натной температуре и упаривают при . Остаток закристаллизовывают растиранием с 50 мл сухого эфира, растворяют в 10 мл безводного диметилформамида, добавляют 0,33 мл 5 (lj5 ммоль) 4,5н. раствора безводного хлористого водорода в тетра- гидрофуране и осаждают 100 мл эфира. Выход 1,55 г (95%) -77,8 . Т.пл. 140-192°С. Rr 0,73 (В), 0 (Д).

Цикло- с -бензилоксикарбонил, С-(фенилаланилглицилпролилфенилала- нил-й-нитроаргинил)лизилпролилпро- лилглицил (27).

1,1 г (26) (0,91 ммоль) растворя- ют в 2л диметилформамида (сушат над окисью бария и перегоняют над нингидрином непосредственно перед употреблением) и, перемешивая в ат мосфере сухого аргона, при 0°С добавляют 1,5 г (1,98 ммоль) комплекса F. Затем при комнатной температуре в течение 6 ч добавляют раствор 0,19 мл (1,38 ммоль) триэтиламина

в 300 мл диметилформамида. Полученную смесь вьдержнвают при комнатной температуре 2 сут и упаривают. Остаток закристаллизовывают растираннем с безводным эфиром, фильтрут, осадок на фильтре промьшают эфиром, затем водой. Полученный продукт исследуют по ТСХ в системе Б, 5 Предполагают, что вещество с R.0,4 является нужным циклопептидом 1один из главных продуктов циклизации, хроматографически подвижен обнаруживается осмотром, в УФ-свете и pea- Ю гентом бензидина). Смесь циклизации предварительно очищают на колонке с силикагелем (2x100 см), используя в качестве элюента систему хло- роформ-этанол-н-бутанол-этилацетат 15 (10:6:4:3). Фракции, содержащие предполагаемый циклопептид, очищают сно- на на колонке с силикагелем (Зх х250 см), используя систему Б в качестве элюента. Фракции,содержащие 20 чистый циклопептид, объединяют, упаривают, остаток растирают с эфиром. Получают 102 мг (9,7%) кристаллического вещества. Т.пл. 163-165 С. Мол. масса: найдено 1024 (определено крио- скопич ески, используя расплав мочевины; вычислено по формуле 1163,31). ос в -64,1° (с 0,5, диметилформ- амид). Е 0,37 (А), 0,43 (В), 0,89 (В), 0,96 (Д), 0,37 (Г). 30

Цикла- f-(фенилаланилгяицилпролил- фенилаланил-у-нитроаргинил)-лизил- пролилпролилглицил )гидробромид ( 28).

26 мг (27) (0,0223 ммоль) растворяют в 0,5 мл ледяной уксусной кис- 35 оты, затем добавляют 0,2 мл свежеприготовленного насыщенного раствора сухого бромистого водорода в уксусной кислоте. Выдерживают 1 ч при комнатной температуре, затем 40 добавляют 5 мл безводного эфира. Образовавшейся осадок 10 раз суспендируют в 5 мл безводного эфира и декантируют. Затем выдерживают в эксикаторе над гидроокисью калия при 45 1 мм рт.ст. Выход 23,4 мг (94,7%). Е„;д 0,38 (5н. уксусная кислота). И -48,0 (с 0,5, диметилформ- амид).

N-Трибензилоксикарбониларгинил- 50 цикло- - (фенилаланилглицилпролил- фенилаланил-со-нитроаргинил) лизил- пролилглицил (29).

20 мг (28) (0,018 ммоль) растворяют в 0,5 мл диметилформамида, до- бавляют 36,7 мг (0,036 ммоль) пента- фторфенилового эфира трибензилокси- карбониларгинина и раствор N-метилморфолина в диметилформамиде до рН 8, Вьодерживают 1 ч при комнатной температуре, упаривают, остаток растирают с 3 мл безводного этилаце тата, образовавшийся осадок 3 раза суспендируют в безводном зтилацета- те и декантируют. Затем остаток высушивают струей сжатого воздуха, 3 раза суспендируют в 3 мл воды и декантируют. Сушат при 1 мм рт.ст. над гидроокисью калия и пятиокисью фосфора. Выход 26,0 мг (91%). Rt 0,67 (B). 61,2 (с 0,5, уксусная кислота),

h / N-Аргинилцикло (N -лизин, 6-глицин) брадикинин.

23 мг (29) (0,014 ммоль) гидрируют при атмосферном давлении в присутствии палладиевсЗй черни в смеси 0,4 мл уксусной кислоты, 0,2 мл метанола и 0,04 мл воды в течение 20ч Упаривают, лиофилизуют из воды. Получают пушистый порошок. Продукт электрофоретически и хроматографически однородный. Выход 17,7 мг (96%). 0,80 (1н. уксусная кислота). об д -0,62° (с 0,5, вода)

Пример 3. Цикло-(со-амино- додеканоил) брадикинин ,

и-Нитробеизиловый эфир трет -бут- ок-сикарбонилфенилаланил-0-бензш1- серилпролина (33).

10,3 г (22,3 ммоль) пентафторфе- нилового эфира т.рет -бутоксикарбо- нил-0-бензилсерина и 6,7 г (23,4 ммоль) гидрохлорида п-нитро- бензилового эфира пролина растворяют в 200 мл диметилформамида и добавляют триэтиламин до рН 8. Перемешивают 2 ч при комнатной температуре, упаривают, остаток растворяют в смеси 100 мл эфира и 100 мл воды. Органический слой отделяют, экстрагируют 100 мл 10%-ного раствора бикарбоната калия, затем 100 мл 10%- ного раствора бисульфата калия, сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют, упаривают. Получают масло, содержащее п-нитробензиловый эфир трет -бутоксикарбонил-0-бензил- сершшролина (31; RJ. 0,95 (л); 0,77 (Б), 0,95 (в), 0,76 (Г)) и пентафто фенол. Его растворяют в трифторук- сусной кислоте, выдерживают 20 мин при комнатной температуре, упаривают. Остаток, содержащий трифтораце- тат п-нитробензилового эфира 0-бензилсерилпролина (32), нейтрализуют триэтиламином до рН 8, добавляют 10 г (23,2 ммоль) пентафторфенило- вого эфира трет-бутсксикарбонилфе- нилаланина. Выдерживают 1 ч при комнатной температуре, затем добавляют 1 мл р-диметиламиноэтиламина. Спустя 10 мин смесь нейтрализуют уксусной кислотой до рН 6, упаривают, ос- таток растворяют в смеси 100 мл эфира и 100 мл воды, эфирный слой отделяют, промывают 100 мл 10%-ного раствора бикарбоната калия, 100 мл 10%- ного бисульфата калия, затем 100 мл воды. Добавляют 50 мл бензола, упаривают полученное темно-коричневое масло, очищают хроматографически (700 г силикагеля, элюируют сначала смесью гептан-этилацетат (5:1), за- тем- хроматографической системой (А). После упаривания элюата получают свело-коричневое масло. Выход 9,7 г (64,5%). Для аналитических целей небольшую часть (33) закристаллизовы- вают растиранием с гексаном.о(. -29,1 (с 1, диметилформамид)jRr 0,94 (А), 0,77 (Б), 0,96 (В), 0,81 (Г).

Трифторацетат-П-нитробензилового эфира фенилаланил-О-бензилсерилпро- лина (34).

9,0 г (33) (13,3 ммоль) растворяют в 30 мл трифторуксусной кислоты и вьщерживают 20 мин при комнатной температуре. Упаривают, остаток об- рабатьшают безводным эфиром. Получают масло, выход 8,9 г (97%). Для аналитических целей небольшзто часть масла закристаллизовывают растира- нием с гексаном. оС -16,3° (с 1, диметилформамид); ЕH;S 0,61 (1н уксусная кислота); Rj 0,12 (А), 0,66 (Б), 0,88 (В), 0,62 (Г).

П-Нитробензиловый эфир трет -бут- оксикарбонилпролилглицилфенилаланил- -О-бензилсерилпролина (37).

Синтезируют аналогично (33), используя (34) вместо (32) и пента- фторфениловый эфир трет -бутоксикар- бонилглицина. Получают-масло, содержащее п-Нитробензиловый эфир трет-бут оксикарбонилглицил сменил аланил-0-бен- зилсерилпролина (35), EJ. 0,71 (А), 0,76 (Б), 0,95 (В), 0,80 (Г) и пентафторфенол, которое без очистки обрабатывают трифторуксусной кислотой аналогично (31) с образованием трифторацетата tt-тробензилово- го эфира глицилфенилаланил-0-бензил- серилпролина (36), Ец;д 0,58 (1н, уксусная кислота); Rj 0,02 (А), 0,2 (Б), 0,67 (В),О,62 (г). Масло, содержащее (36), нейтрализуют и используют для реакции с пентафтор- фениловым эфиром Трет -бутоксикар- бонилпролина аналогично получению (ЗЗ). Полученное масло очищают хроматографически 700 г силикагеля, элюируют сначала хлороформом, затем смесью хроматографическая система (А) - изопропанол (4:1). После упаривания элюата получают светло-коричневое масло, которое закристаллизовывают растиранием смесью эфира с гексаном (1:1). Выход 62%. И щ° -43,0 (с 1, диметилформамид), R 0,58 (А), 0,72 (Б), 0,94 (в), 0,78 (Г).

Трифторацетат п-нитробензилового эфира пролилглицютфенилалан)-ш-0-бен- зилсерилпролина (38).

2,5 г (37) (3,0 ммоль) растворяют в 20 мл хлористого метилена, затем добавляют 4 мл трифторуксусной кислоты. Выдерживают 2 ч при комнатной температуре, упаривают, остаток закристаллкзовывают растиранием с безводным эфиром. Выход 2,47 г (98%) Ы -27,8° (с 1, диметилформамид EHJS - (1н, уксусная кислота); Ri О .(А), 0,13 (Б); 0,81 (В), 0,26 (Г).

П -Нитробензиловый эфир трет бут- оксикарбонил-Щ-нитроаргинилпролил- пролилглицилфенилаланил-О-бенэил- серилпролина (39).

1,36 г (9) (3,27 ммоль) 0,60 г (3,27 ) пентафторфенола и 0,67 (3,27 ммоль) дициклогексилкарбоди- имида при 0°С растворяют в 50 мл безводного хлористого метилена, вы- дерзкивают 1 ч, фильтруют. В фильтрате растворяют 2,36 г (38) (2,8 ммоль) добавляют триэтиламин до рН 8. Выдерживают 20 ч при комнатной температуре. Смесь экстрагируют 50 мл 10%-ного бикарбоната калия, затем 50 мл 10%-ного бисульфата калия и 50 мл воды, упаривают, остаток очищают хроматографически (200 г силикагеля) элюент - хроматографическая система (А) - изопропанол (4:1). Выход 1,9 г (60%). -50,0° (с 1,

диметштформамид), R, О,08(А), 0,61 ,(Б), 0,96 (В), 0,56 (Г).

Трет-Бутоксикарбонил-и-нитроарги- нилпролилпролилглицилфеНИЛаланил-0- бензилсерилпролнн (40).

,45 г (39) (1,29 ммоль) растворя ют в 18 мл ацетона, добавляют 7 мл воды, 1 мг тимолфталеина и при перемешивании 1,3 мл 1 н. гидроокиси нат рия (порциями по 0,3 мл) в течение 7 ч. Очередную порцию щелочи добавляют после исчезновения синей окраски Нейтрализуют I0%-ным раствором бисульфата калия до рН 6, упаривают до исчезновения запаха ацетона .Добавляют 30 мл хлористого метилена, органический слой промывают 30 мл 1%- ного раствора бисульфата калия- и водой (трижды по 30 мл), З паривают, остаток закристаллизовывают растиранием с безводным зфиром, Выход 1,1 г (.86%).J -56,5°( с 1, диметил- формамид); Rf 0,04 (А), 0,56 (в), 0,90 (В), 0,54 (Г).

Oi; . ,

Трет -Бутоксикарбонил-ы-нитроар гинил-Ц-аминододексановая кислота

(41).

5 г (13,4 ммоль) трет -бутокси- карбонил-0)-нитроаргинина превращают в пентафторфениловьш эфир. Масло, содержащее пентафторфениловый эфир трет.-бутоксикарбонил-б.1-нитроаргин -ш растворяют в 75 мл метилформамр да, добавляют 4,3 г (20 ммоль) W -ами- нододекановой кислоты, N-метилмор- фолин до рН 8 и 20 мл воды. Интенсивно перемешивают при когчнатной температуре в течение 20 ч, фильт- руют, фильтрат з паривают, остаток очищают хроматографически ( 1 кг силикагех1я ), элюируют сначала хро- матографической системой А, затем смесью хроматографическая система А изопропанол (4:)). Остаток после упаривания элюата закристаллизовывают растиранием с гексаном. Вы- ход 1,5 г (22%). М в -4, (с 1, циметилформамид); Р. - 0,19 (А) 0,70 (Б), 0,87 (В), 0,75 (Г).

Трифторацетат со -нитроаргинил- -со-аминододекановой кислоты (42).

Получают аналогично (34) из (41) Выход 96%, Ек;д 0,58 (I н. з ксус- . нал кислота); Rf О (А), 0,33 (в); 0,48 (В); 0,55 (Г).

трег -Бутоксикарбонилфенилаланил- -а-нитроаргинил-о-аминододекановая кислота (43).

1,3 г (42) (2,45 ммоль) растворяют в 30 мл диметилформамида,, добавляют N-метилморфолин до рИ 8, затем 2,0 г (4,6 ммоль) пентафтор- фенилового эфира трет-б токсикарбо- нилфен илаланина. Выдерживают 1 ч при комнатной температуре, упаривают, остаток растворяют в 50 мл хлористого метилена и промывают 50 мл 10%-ного бисульфата калия и 50 мл воды (дваж/лы) . Упаривают, остаток очищают хроматографически (200 г силикагеля злюиpi oт хромато- .графической системой А) . Остаток после упаривания элюата закристал- лизовызают растиранием с гексаном. Выход 0,5 г (31%). о.: -13,5° ( с 0,2, диметилформамид). R . 0,19 (А)/0,76 (Б), 0,91 (В). 0,80 (Г).

Гидрохлорид фенилала1-шл-С)-китро- аргипил-и1-аминододекаиовой кислоты (44).

0,45 г (43) (0,68 ммоль) раство- piuoT 13 10 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 1 мл насьш1;енного раствора безводного хтюристого водорода в диоксане. Выдерживают 30 мин при комнатной температуре. Упаривают, остаток закристаллизовывают растиранием с безводным эфиром, cyj;iaT 3 эксикаторе над гидро- гзкмсыо калия. Выход 0,4 г (98%), IjiJ, -- +3,8 (с 1, диметилформамид 0,44 (1 н/уксусная кислота) -Ц О (А), 0,79 (В), 0,5 (Г).

трет -Бутоксикарбонил-и-нитроар- гыт-п1тшропилпролилглицилфенилаланил- - -0-оен;зилсерилпролилфепилаланил-и- -нитроа,ргннил--ц-аминододекановая кислота (45) ,

0,76 г (40) (0,77 ммоль) и 0,53 ;омш1екса F (0,70 ) растворяют в 20 Mj i безводного диметилформамида. Выдерживают 12 ч при комнатной тe mepaтypeз затем добавляют 0,4 г (44) (0,67 ммоль) и диизопро- пилэтиламин до рН 8. Выдерзкивают 20 ч при комнатной температуре, затем упаривают, остаток растиралот с 6езво7лньм зоэиром. Очищают хроматографически (1 кг силикагеля пяти- .кратной рециркуляцией, используя хроматографическую систему Б как элюент. Остаток после упаривания

элюата закристаллизовывают растиранием с безводным эфиром. Выход 0,56 г (54%).ot -47,5 (с 1, диметилформамид); R, О (А); 0,89 (В), 0,64 (Г).

Пентафторфениловый эфир трет -бут оксикарбонил-а-нитроаргинилпролил- пролилглицилфенилаланил-0-бензил- серилпролилфенилаланил-ш-нитроарги- нил-С1 -аминододекановой кислоты (46)

too мг (45) (0,065 ммоль) и 67,3 мг (0,089 ммоль) комплекса F растворяют в 20 мл безводного хлористого метилена. Выдерживают 20 ч |при комнатной температуре, упаривают, остаток закристаллизовывают растиранием с безводным эфиром. Затем его снова растворяют в 2 мл хо- хлористого метилена, фильтруют, фильтрат упаривают, остаток растирают с безводным эфиром. Выход 105 мг (95%).

Гидрохлорид пентафторфенилового эфира со-нитроаргинилпролилглицил- фенилаланил-О-бензилсерилпролил- фенилаланил-и-нитроаргинш1-со-амино- додекановой кислоты (47).

100 мг. (46) (0,059 ммоль) растворяют в 2 мл безводного хлористого метилена, затем добавляют 0,1 мл насьщенного раствора безводного хлористого водорода в диоксане. Бьщер- живают 30 мин при комнатной температуре затем добавляют 20 мл безводного эфира. Образовавшийся осадок фильтруют, промывают безводным эфиром, выдерживают в вакуумном эксикаторе над гидроокисью калия. Выход 92 мг (95%).

Цикло- сх) -нитроаргинилпролилпро- лилглицилфенилаланил-0-бензилсерил- пролилфенилаланил-Ы-нитроаргинил- -и-аминододеканоил (48).

К раствору 0,11 мл (0,64 ммоль) диизопропилэтиламина в 200 мл ди- метштформамида при интенсивном перемешивании добавляют раствор 90 мг (47) (0,055 ммоль) в 10 мл диметил- формамида. Выдерживают 2 дня при комнатной температуре. Упаривают, отаток закристаллизовывают растиранием с безводным эфиром, затем хро- матографируют (200 г силикагеля, злюент - хроматографическая система А - изопропанол (4:1), затем хро- матографическая система Б,). Фракцию элюата, содержащую циклопептид, упаривают, остаток хроматографируют повторно (100 г силикагеля, элюент спирт). После упаривания элюата ос- 5 таток закристаллизовывают растиранием с безводным эфиром, затем сушат и перемешивают с 3 мл воды, декантируют и снова промьшают водой. Сушат в вакуумном эксикаторе

0 над пятиокисью фосфора. Выход 20 мг (26%).WV -46,2 (с 1, метанол). R. О (А), 0,59 (Б), 0,88 (В).

Цикло-(со -аминодедаканоил бради- кинин диацетат (30).

5 20 мг (48) (0,014 ммоль)растворяют в 2 мл метанола, добавляют 1 каплю уксусной кислоты и гидрируют 24 ч в присутствии палладиевой черни. Фильтруют, упаривают, остаток раст0 воряют в 2 мл воды, фильтруют и лио- филизуют. Получают белый порошок, выход 13 мг 68% -63,2° (0,5 вода). ,67 (1н, уксусная кислота); R.J 0,3.2 (Г).

5 Проводят испытание биологической ак тивности аргинил циклического аналога брадикинина (АЦАБ), циклического аналога каллидина (ЦК) и цикло- - и-аминодеканоилбрадикинина | (ЦАДВ).

0 Определяют влияние in vivo АЦАВ, ЦК и ЦАДВ на кровяное давление у нарко-- тизированных крыс, ЦК и ЦАДБ на артериальное давление собак; in vitro влияние АЦ и ЦАДБ на сократительную 5 способность матки крыс.

Методика исследования.

В качестве стандартного соединения используют синтетический препарат брадикинина (БК) производства фирмы ° Reanal.

Определение влияния на артериальное давление крыс.

Эксперименты проводят на крысах обоего пола весом 180-200 г. Животных наркотизируют 25%-ным уретаном 0,5 мл/100 г. Артериальное давление из сонной артерии регистрируют с помощью ртутного манометра на.закопченной ленте кимографа АЦАБ, БК вводят в виде инъекций в бедренную вену в объеме 0,1 мл/200 г в дозах 0,5- 50 мкг/кг и ЦАДБ - 0,5-500 мкг/кг.

Определение влияния на артериальное давление собак,

У наркотизированных гексеналом собак регистрируют артериальное дав-i ление (из сонной артерии) и ЭКГ на физиографе Яагсо Bio-system.

5

0

5

Определение миотропного действия

Используют крыс-самок весом 200- 220 г. Регистрируют изотонические сокращения изолированных маток крыс в определенном режиме температуры (32°С) и аэрации по методу регистрации кумулятивных кривых концентрация-эффект. Миотропные эффекты АЦ АБ и ЦК исследуют в диапазоне 0 °-10 МО ль/л; БК и ЦАДБ исследованы в диапазоне концентраций 10 - 10 моль/л. Регистрацшо проводят . на модифицированном приборе ВИ6-5МА Вычисляет параметр, характеризующий специфическое сродстгзо к рецептоРУ (рСз

Результаты исследования.

В опытах in vivo на наркотизированных уретаном крысах установлено, что пороговая концентрация БК-- 0,5 мкг/кг, АЦАБ и ЦК-5 мкг/кг., ЦАДБ-50 мкг/кг. В дозе 50 мгк/кг для БК и 250 мкг/кг для ЦАДБ оба вещества вызывают эквиденрессорный эффект (30-40 мм рт.ст.), который длится 30 с и 35 мин у БК и ЦДДБ соответственно, затем исходное артериальное давление восстанавливается (фиг. 2). Введение ЦАДБ в дозе 500 мкг/кг приводит к резкому паде-- ншо артериального давления и гибели животных.

АЦАБ и ЦК в концентрации 50 мгк/ /кг вызывают эквидепрессориый (на 40-60 мм рт.ст,), но значительно более пролонгированный (до 2 ч) эффект по сравнению с таковым у БК в дозе 50 мгк/кг (30 с) (фиг, i). Повышение концентрации АЦАБ и ЦК до 250 мкг/кг приводит к резкому падению кровяного давления и гибели животных.

ЦК в опытах на собаках (в дозах 50 и 100 мкг/кг) вызывает гипотен- зивньш эффект на 20-25 мм рт.ст. К исходному уровню артериальное давление возвращается через 10 мин.

Данные ЭКГ при этом остаются неизмен , иДЦБ в дозе 20 мкг/кг не изменяет уровень артериального дав- ления, а также ритм и частоту сердечных сокращений собак.

В опытах in vitro на изолированной матке крыс установлено, что у в диапазоне концентраций 0 моль/л отсутствует миотроп- ное действие, свойственное природному БК. Б отхшчие от АЦАБ Ц1 обладает миотропной активностью, достигающей 100% от активности БК, КО проявляющейся в концентрации на дна порядка большей, чем у БК (фиг., 4).

Таким образом, АЦАБ и ЦК по сравнению с природным БК обладают явно вьгршхепным пролонгированным депрес- сорньм эффектом, Цо продолжительности гйпоте:-:зивные эффекты АЦАБ и ЦК о/1ипаковьи АЦАБ и ЦК отличаются между собой по отсутствию миотроп- ной активности у АЦАБ и наличию таковой у ЦК, проявляющейся в более (на два порядка) высоком диапазоне концентраций по сравненшо с БК.

В опытах in vitro на изолиро- ианной матке крыс установлено, что ЦАДБ обладает миотропной активностью, достигающей 81-7% от активности БК, за 100%, но прсзявля- 10У(ейся в концентрациях, на три по- рядкс больиих, чем у БК (pD для БК 9,30±0.,12; pD для ЦАДБ 6,4110,17 (рис 3)).

Таким образом, ЦАДБ по сравненшо С- природ1-й|1М БК обладает пролонгиро- ванным депрессор1-П)1м эффектом на крысах,,

ЦК проявляет п-шотензивное действие в опытах на собаках, IWtB в этом тесте активность не проявляет. Миотропный эффект ЦАДБ проявляется в более высоком (на три порядка) диапазоне концентраций по сравненшо с БК.

MM От cm.

5Кit,f(R6

-Ъ -4

во

0

I I I I I I I I I I I I I I I I (I и I I I I I I I I I

25мин

/

/

ВРЕМЯ, с

50 10 Ю

10 - С,мол(1/Л

Циклические аналоги каллидина и других пахикининов общей формулы E-Rj-Pro-Pro-Gly-Phe-R -Pro- Phe-Arg где Р, - водород, лизин, со-аминодо- декановая кислота; R - аргинин, лизин; Н„ - серин, глицин, обладающие пролонгированным гипотензивным действием в сочетании с низкой или полностью отсутствующей ми- отропной активностью. ё (Л CD СЛ 00 Время, с

-Ц- -ц- -ц- -4-J- , . , 10-ю jp-5 /0-8 iQ-v 10 Ю с, моль/л

Фиг. f

ЦМ6

Сч) &

Phe &iy Pro

The

Arg

Ly Pro

Pro

Gil/

fpui.-ff

.ЗСНзСООН

Редактор Н. Егорова

Составитель В. Волкова

Техред ,Л.Олейник Корректор В. Бутяга

Заказ 1230/33 Тираж 343 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35 Раушская наб,, д. 4/5

Филиал ШШ Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4