Штамм продуцирующий -триптофан Советский патент 1975 года по МПК C12D13/00 

Изобретение относится к микробиологии и касается штаммов, продуцирующих L-триптофаи.

В изобретении предлагается штамм Bacillus subtilis Ген-37, продуцирующий триптофан.

В отличие от известных штаммов указанного типа штамм Bacillus subtilis Ген-37 не нуждается в ростовых факторах, обеспечивает достаточно высокий выход L-триптофана при меньшей продолжительности биосинтеза и более эффективном использовании углеводов.

Штамм Bacillus subtilis Ген-37 дает грамположительную окраску и образует споры. На мясо-пептонном агаре после одних суток роста образует колонии диаметром 10-12 мм, круглые с изрезанным краем и гладкой слабо исчерченной блестящей поверхностью белого цвета. На минеральной агаризованной среде образует круглые колонии диаметром 1,5-2 мм с гладкой блестящей поверхностью серовато-белого цвета. В мясо-пептонном бульоне и минеральной среде дает умеренное помутнение без образования пленки; не растет на молоке, слабо разжижает желатину, не выделяет индол в среду, хорошо, растет па крахмале, сахарозе, глюкозе, маннозе. Не использует лактозу, галактозу, глицерин и маннит. При ферментации на питательных средах, содержащих углеводы, азот и минеральные соли, без введения предшественника триптофана образует после 48 час роста в среднем 4,1 г/л L-триптофана.

Для выращивания посевного материала используют среду состава, г/л: сахар-сырец 50, К2НРО4 3 и кукурузный экстракт 20, либо меласса 30 и К2НРО4 2. Для ферментации можно использовать среду состава, г/л: сахар-сырец 100; мочевина 5; кукурузный экстракт 20; КН2Р04 1,2; К2НРО4 2,8; MaSO4 1 и NaCl 0,5.

Для засева посевной среды используют суточную культуру штамма, выращенную на

агаризованной среде Хоттингера. Посевной материал выращивают в колбах на качалке (200-220 об/мин) в течение суток при 28- 30°С. Для засева ферментационной среды используют посевной материал в количестве 2-

5%. Процесс ферментации проводят в колбах емкостью 250 мл с 30 мл среды на качалке или в двадцатилитровых металлических ферментерах с турбинной мешалкой, барбатером и автоматическим пеногашением. Ферментацию осуществляют в течение двух суток при 28-30°С.

ную окраску, образует споры; на мясо-пептонном агаре после одних суток роста образует колонии диаметром 10-12 мм, круглые с изрезанным краем и гладкой слабо исчерченной блестящей поверхностью грязно-белого цвета; на минеральной агаризованной среде образует круглые колонии диаметром 1,5- 2 мм с гладкой блестящей поверхностью сероватобелого цвета; в мясо-пептонном бульоне и минеральной среде дает умеренное помутнение

без образования пленки; не растет на молоке, слабо разжижает желатину, не выделяет индол в среду, хорощо растет на крахмале, сахарозе, глюкозе, маннозе, не использует лактозу, галактозу, глицерин, маннит; при ферментации на питательных средах, содержащих углеводы, азот и минеральные соли, без введения предщественника триптофана образует после 48 час роста в среднем 4,1 г/л L-триптофана.