ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ПРОДУЦЕНТОВ ГЛЮКОАМИЛАЗЫ Советский патент 1973 года по МПК C12N9/34 

1

Изобретение относится к ферментной прОмышлениости, именно к иитательным средам для выращивания продуцентов глюкоамилазы.

Известна питательная среда для выращивания продуцентов глюкоамилазы, например, Endomycopsis, содержащая сернокислый аммоний и однозамещенный фосфорнокислый калий. Кроме того в состав питательной среды входят: азотнокислый калий, дрожжевой автолизат, вытяжка из солодовых ростков и раствор крахмала.

Предлагаемая питательная среда позволяет получить фермент высокой активности, а также увеличить выход его.

Предлагаемая питательная среда отличается от известной тем, что в нее вводят новые ингредиенты; хлористый кальций, кукурузную муку и кукурузный экстракт, вместо дорогостоящих дрожжевого автолизата, крахмала вытяжки солодовых ростков и нитрата кальция. При этом указанные вещества вводят в количествах, соответственно равных (в %): 0,01 - 0,04; 1-3; 1,5-2,0.

Сернокислый аммоний и однозамещенный фосфорнокислый калий целесообразно вводить в количествах, соответственно равных (в %): 0,3-0,4; 0,1-0,2.

Пример. Процесс ферментации заключается в выращивании культуры Endomycopsis fibuliger R-313 в условиях интенсивной аэра2

Ции. Эта культура является активным продуцентом фермента глюкоамилазы. Ферментацию ведут на питательной среде, содержащей следующие ингредиенты от общего количества культуральной среды (в вес. %):

Кукурузная мука2

Кукурузный экстракт2

(NH,)2S040,33

KHsPO,0,15

CaCb0,033

Процесс ферментации ведут при температуре среды 34° С, рН 7,5-8,0, давлении 0,4- 0,6 атм н скорости вращения мещалки 350-

500 об/мин. При этом аэрация ведется непрерывно. Во время вспенивания увеличивают давление до 0,8-1 атм или добавляют пеногаситель. Для контроля процесса ферментации пробы отбирают через 9, 12, 15 и 18 часов роста. Определяют рН среды, глюкоамилазную активность, количество биомассы в г/100 мл глубинной культуры, состояние клеток-микроскопически, отсутствие посторонней микрофлоры. Процесс ферментации прекращают

после достижения максимальной глюкоамилазной активности. Затем глубинная культура поступает в сборники, далее на вакуумно-выпарной аппарат, где упаривается примерно в 10 раз по объему при темиературе 34° С-40° С.

В концентрат культуральной жидко.сти вводят

наполнитель - NaCl в количестве 100% к содержанию сухих веществ в кондентрате. Сушку ведут при температуре 130-150° С, па выходе из сушилки - при 60-70° С. Получеппый продукт стандартизируется добавлением наполнителей, расфасовывается и упаковывается. Из культуральной жидкости можно выделить чистый фермент глюкоамилазы. В этом случае от глубинной культуры после окончания процесса культивирования отделяют биомассу на сепараторах или барабанном вакуумфильтре. Отделенная от биомассы культуральная жидкость поступает в промежуточный сборник и далее па вакуум-вынарной аппарат. Для осаждения используют этиловый спирт концентрацией 96,0-96,5 об. %. Перед осаждением концентрат охлаждают до температуры + 5° С, этиловый спирт - О-2° С. Осаждепие проводят четырьмя объемами спирта (концентрация в смеси 77%) в осадителе при ноСТОЯН110М перемешивании или сульфатом аммония при насыщении 0,7.

Полученный осадок высушивают до ълаШности 8-12% и растирают в порошок на шаровой мельнице.

Предмет изобретения

1.Питательная среда для выращивания продуцентов глюкоа.милазы, например, Endomycopsis, содержащая сернокислый а.ммоний и однозамещенный фосфорнокислый калий, отличающаяся тем, что, с целью увеличения выхода фермента, в нее донолнительно введены хлористый кальций, кукурузная мука и кукурузный экстракт, при этом указанные вещества введены в количествах, соответственно равных (в %): 0,01-0,04; 1-3; 1,5-2,0.

2.Питательная среда, отличающаяся тем, что сернокислый а.ммоний и одназамещенный

фосфорнокислый калий введены в количествах, соответственно равных (в %): 0,3-0,4; 0,1 - 0,2.