СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРГИНИН-СОДЕРЖАЩЕГОПОЛИПЕПТИДА С ПОВТОРЯЮЩЕЙСЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ АМИНОКИСЛОТ Советский патент 1974 года по МПК C07K7/00 

1

Изобретение относится к получению иолипептидов с повторяющейся последовательностью аминокислот и может быть использовано в медицине.

Известен способ получения аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот, заключающийся в том, что бромгидрат N-оксисукиинимидного эфира Ь-лейпил- -трифтор ацетил-Ь-орпити лL-лейцина полимеризуют в диметилформамиде в присутствии триэтиламина, из полимера удаляют трифторацетильную группу с помощью пиперидина и освободивщуюся аминогруппу гуанидируют, получая названный выше трипептид. При этом гуанидирование протекает только на 25%.

Предлагаемый в изобретении способ получения нового аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот (гли-Ь-ала-Ь-арг)п заключается в том, что бромгидрат М -нитроаргинин-содержащего трипептида, например, 2,4,5-три.лорфенилового эфира глицил-Ь-аланил-(М -нитро)-Ь-аргини а, полимеризуют в диметилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента триэтиламина с последующим удалением Х нитро-группы гидрогенолизом и выделение, целевого продукта известными приемами.

В качестве мономера используют бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-Lаланил-1-(К1 -нитро)-аргинина. Полимерный продукт реакции гидрируют для удаления нитро-группы. Мол. вес образуюндегося при этом иолипептида равен 10000.

Применив известный способ полимеризации, получают новый физиологически активный аргинин-содержании пол и пептид (гли-Ь-ала-Ьарг)„. Кроме того, в отличие от известного в предложенном ренгеним 1 сключен процесс гуанидирования, протекающий неполностью и умецьщено число стадий.

П р и .м е р 1. Получение мономера - бромгидрата 2,4,5-трцхлорфеннлового эфира глииил-Ь-алаиил-Ь- (Х -нитро) -аргинина.

К 0,5 т карбобензокси-глицил-аланила в тетрагидрофурапе (ТГФ) ири перемещиваиии и охлаждении до -5°С добавляют 0,7 г дициклогексилкарбодиимида в ТГФ, перемещивают 20 мин, приливают раствор 1,5 г бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира N -иитроаргииина в ТГФ и 0,8 мл триэтиламииа. Реакционную массу переменшвают 4 час при - 5°С П оставляют на ночь при комнатной температуре. Избыток дициклогексилкарбодиимида разрущают ледяной уксусной кислотой, растворитель отгоняют, остаток растворяют в этилацетате и промывают последовательно 2 н. ПС1, НаО и 5%-ным ХаНСОз. Органический слой сущат над MgSO.i, растворитель отгоняют, остаток кристаллизуют из смеси этилацетат-петролейный эфир.

Выход карбобензокси-трипептида 0,85 г (66%); т. пл. 89-91°С; Rf 0,9 и 0,81 в системах НаО-СНзСООН-н-С,Н,ОН (30:10:100) и вторичный С4Н90Н-3% NH.,OH (100:44).

Растворяют 0,85 г 2,4,5-трихлорфенилового эфира карбобензокси-глицил-Ь-алаиил-Ь- (N нитро)-аргинина в 3 мл ледяной уксусной кислоты и прибавляют 2 мл 35%-ной НВг/ /СНзСООН. Реакционную смесь встряхивают в течение 20 мин при 20°С и приливают абсолютный эфир. Выпавший осадок промывают эфиром и сушат в вакууме. Выход 0,5 г (63%); R, 0,28 и 0,54.

Пример 2. Получение полипептида глицил-Ь-аланил-Ь-аргинин.

Растворяют 0,5 г бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-Ь-аланил-Ь-(Ы -нитро)-аргинина в 0,4 г диметилформамида (ДМФА) при нагревании не выше 50°С. После охлаждения раствора до 20°С прибавляют 0,2 г триэтиламина (2,5 эвк). Полимеризацию проводят в течение 5 суток при комнатной температуре в запаянной ампуле. Полученный продукт обрабатывают абсолютным метанолом и выпавший осадок промывают декантацией метанолом и эфиром.

Поли - (глицил-L - аланил-L- (Ы -нитро-аргинин) подвергают каталитическому гидрированию на Pd в присутствии эквивалентного количества НС1 в ДМФА в течение 15 час. Раствор фильтруют, растворитель отгоняют в вакууме, а остаток обрабатывают абсолютным эфиром. Мол. вес образующегося при этом полипептида равен 10000.

Предмет изобретения

1.Способ получения аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот, отличающийся тем, что бромгидрат N -нитро.аргинин-содержащего полипептида полимеризуют в диметилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента триэтиламина с последующим удалением №нитро-группы гидрогенолизом и выделением целевого продукта известными приемами.

2.Способ получения по п. 1, отличающийся тем, что как мономер используют бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-Ь-аланил-Ь- (К -нитро) -аргинина.