Способ получения винбластина, винлейрозина и винкристина Советский патент 1974 года по МПК C07G5/00 A61K27/14 

1

Изобретение относится к области медицины, а именно к производству лекарственных препаратов.

Известен способ получения алкалоидов из растительного сырья (Vinca rosen), согласно которому сырье предварительно обрабатывают кислотой, экстрагируют 50-70%-ным водным раствором метанола, упаривают, подкисляют, фильтруют, повторно обрабатывают несмешивающимся с водой растворителем, выпаривают. Остаток, содержащий сумму алкалоидов, обрабатывают бензолом, хроматографируют на окиси алюминия, элюируют смесью бензол-метилепхлорид, фракционируют с последующей перекристаллизацией целевых продуктов из этанола.

Однако технология такого способа сложна, а выход целевых продуктов недостаточно высок.

Целью изобретения является разработка способа, позволяющего упростить технологию получения винбластина, винлейрозина и винкристина и повысить выход целевых продуктов.

Достигается это тем, что сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4-5), кристаллизацией, растворением в смеси хлористый метилен-хлороформ (2:1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами. Пример 1. 100 кг высушенного, состоящего в основном из листьев, измельченного растения Vinca rosea L. Cantharanthus roseus G. Don выщелачивают три раза 90%-ным водным раствором метанола: один раз - порцией 600 л, и дважды - порциями по 400 л. 0тфильтрованные и объединенные метанольные экстракты сгущают при пониженном давлении до 140-150 л, после чего подкисляют одинаковым объемом 5%-ного раствора серной кислоты в воде до рН-2 и отфильтровывают

образовавшийся осадок темного цвета. Отфильтрованный кислый водный раствор трижды выщелачивают бензолом порциями по 500 л. После этого при помощи концентрированного водного раствора гидроокиси аммония устанавливают рН 8,5-9,0. Затем выщелачивают щелочной водный раствор три-четыре раза бензолом порциями по 600 л. Соединенный бензольный раствор сушат на безводном сульфате натрия или карбонате кальция, отфильтровывают и выпаривают при пониженном давлении. Получают около 700 г коричневой смеси алкалоидов с рыхлой структурой. Алкалоидную смесь растворяют в этаноле,

содержащем 10% серной кислоты, величина

рН раствора должна быть 4,0-5,0. Раствор выпаривают, выпадение кристаллов сульфата винОластина начинается после обработки щеткой стенки сосуда. Кристаллизацию продолжают в течение двух дней при комнатной температуре, а затем отфильтровывают осажденные кристаллы на стеклянном фильтре.

В зависимости от качества лекарственного растительного сырья выход составляет 20- шО г смеси кристаллов, состоящей из сульфата випбластина, винлейрозина, винкристпна и сульфатов сопутствующих алкалоидов. Смесь кристаллов сырых алкалоидных сульфатов растворяют в смеси, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотнощепии 2 : 1, а именно 7 мл на 1 г. Этот раствор хроматографируют на колонке, наполненной стократным количеством AlgOa, частично дезактивированной водой, и после этого элюируют смесью, содержащей хлористый метилен и хлороформ Е соотнощении 2:1. Улавливают фракции по 30-50 мл. Первые три фракции содержат преобладающую часть сопутствующих алкалоидов. Винбластин и виплейрозин получают во второй-девятой фракциях. Винкристин начинает появляться в 9-й фракции и элюируется до 18-й фракции. Содержащие винбластин, винлейрозин и винкристин фракции, идентифицированные методом хроматографии па бумаге и тонкослойной хроматографии, отдельно выпаривают досуха. Выход 15-75 г винбластина и винлейрозина и 0,6-3,0 г винкрпстина в аморфном сухом остатке.

Содержащий винбластин и винлейрозин сухой остаток растворяют в 15-кратном количестве водного этанола. Винлейрозин выкристаллизовывают и отфильтровывают, промывают и сущат. Выход в зависимости от качества сырого продукта 5-17 г винлейрозина. Точка текучести 202-205°С +72

(CHCls).

Маточный раствор винлейрозипа, который содержит только випбластин, разбавляют безводным этанолом до двукратного объема и рН раствора устанавливают 4 при помощи раствора серной кислоты в этаноле. Кристаллизацию сульфата винбластина начинают во время добавки раствора серной кислоты в этаноле. Затем проводят кристаллизацию 16 час в холодильном щкафу. Выход, в зависимости от качества сырья, 15-70 г сырого сульфата винбластина.

Высущенный и распыленный сырой сульфат винбластина растворяют при комнатной температуре в 20-кратном количестве безводного метанола и к фильтрованному раствору добавляют четырехкратный объем безводного этанола. Для полной кристаллизации винбластина раствор выдерживают в течение 16 час в холодильнике. При перекристаллизации MOiKHO достигнуть 90%-ного выхода. Выход, в зависимости от качества сырья, 13-63 г сульфата винбластина; а -28° (СНСЬ).

С целью идентифицирования виноластин переводят в оспоьание, и из него перекристаллизацией из эфира получают эфират винбластина. Точка текучести: 201-21 ГС; aJ J5j+42 (СНС1з).

Отделенный методом хроматографии, содержащий винкристин аморфный сухой остаток ((J,ti-3,0 г) растворяют в iO-кратном количестве безводного этанола и при помощи раствора серной кислоты в этаноле устанавливают рП раствора 4. Для полной кристаллизации сульфата винкристина раствор выдерживают 1Ь час в холодильнике. Количество отфильтрованного сырого сульфата винкристина

составляет 60-707о от растворенного, содержащего винкристин, аморфного сухого остатка.

Для перекристаллизации растворяют сырой сульфат винкристина в небольшом количестве

этанола, добавляют затем четырехкратное количество этанола, выдерживают раствор для выкристаллизовывания 16 час в холодильнике и фильтруют. Выход 0,3-1,5 г сульфата винкристина. Точка текучести 218-220С.

Пример 2. Полученную по примеру 1 сырую кристаллическую смесь, состоящую, в зависимости от качества лекарственного растительного сырья, из 20-100 г сульфатов винлейрозина, випбластина, винкристина и

сопутствующих алкалоидов, растворяют в воде, и рН раствора доводят до 8-9 при помощи аммиака. Алкалоиды четыре раза экстрагируют из раствора встряхиванием каждый раз с 1 л хлороформа. Соединенные растворы

ххлороформа сушат на безводном сульфате натрия и фильтруют, а затем выпаривают при понижепном давлении досуха. Выход 16-80 г смеси алкалоидпых оснований. Эту массу растворяЮт в 3-4-кратном количестве смеси,

состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1 : 1, и после этого хроматографируют на колонке, наполненной 40-кратным количеством , частично дезактивированной водой. В качестве элюирующей смеси применяют бензол-хлороформ в соотношении 1:1. После сливания первых 2-10 л элюата улавливают фракции 0,6-3,0 л. Фракции 1- Ю содержат випбластин и винлейрозин, фракции 11 и 12 не содержат винбластина и винлейрозппа. После этого, в зависимости от количества поданной смеси кристаллов, производят дальнейшее элюирование с 3-18 л смеси, состоящей из бензола и хлороформа в соотношении 1 : 1, причем улавливают фракции

0,6-3,6 л. Фракции 13-17 содержат винкристин.

Переработку фракций, содержащих винбластин, винлейрозин и випкристин, идентифицированных методом хроматографии иа бумаге и методом тонкослойной хроматографии, производят способом, описанным в примере 1.

Предмет изобретения

Способ получения винбластина, винлейрозина и винкристина путем экстракции растительного сырья (Vinca rosea) водным раствором метанола, сгущением экстракта, подкисления, повторной обработки несмешивающимся с водой органическим растворителем, выпаривания, обработки остатка, содержащего сумму алкалоидов, органическим растворителем, хроматографирования, фракционирования и нерекристаллизацией целевых нродуктов из этанола, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевых нродуктов

и упрощения технологии, сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4-5), кристаллизацией, растворением в смеси хлористого метилена-хлороформа (2 : 1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами.