Способ получения гексапептида последовательности 9-14 в-цепи инсулина человека Советский патент 1975 года по МПК C07K7/06 C07K14/62 

Изобретеш-;е касается усовершенство-- ваниЕ способа по.лучения гексапептида В,} Ексулина чело- ека. Это соединвгше может бытш использовано в синтезе прй« ;родных инсулиноз, а также их |синтетич8С«jKKX аналогов.

Известен способ по.ггчений гексапептк- де Bj|™jj| инсулина последовательной ко1%9 |Д©нса1швй метклоБОго эфира апзклна с i запшшеиными аминокислотами с поспеду 1клщ1м: выделением целевого продукта ;ве6тным способом.

; Такой способ характеризуется вь5. |ни8м целевого в виде метапозо iго.эфира, поскольку для да чькейшего но I пользования пептида в синтезе инсулина для гфевращений мет-кло |вого эфира в гидраакд необходима обра ботка гидразином, которая приводит к частичной деструкции молекулы н снижо выхода целевого продзгкта на 30%. Для усовершенствования пронесса в качестве С-конечной защитной группы предложено использовать трет.-бутилоксв карбониягидразия, который превращается

Б гйдразнд при обработке три(|пх)руксуоной ккслотой, что- не вызывает деструкцик молекулы.

Сущность описываемого спсдзоба пслу чеийя- защищенного пептида последовйтель- HOCTJJ Вj..fij Енеулина человека заключаете Е .. ЧТО трет.-бутилокснкйрбонилгняра. lasaasHa последовательно коьщэнс1гру о |с защ11Швнйыми амннокислотамк е гюсле.ц;ЛfkjiECKj.i аыделеннем делевого прощкта иазэст |ным спосюбом,

Пример 1. ,ЧрбТр« Бутипожсика р 6oja:m.rrRHpS3,Hfl карбобензоксяшгакнна j/t i2f2 г карбобБкзоксЕаяагшна растворЯ ; :К,г & 13 МЛ. етилаиетата, добавляют i,lj тр-эТ.--.---бутияоксжк:ареошшг шрй,зада, к по |;гученной омёс атри 0°С добавляют 2,1 «|Д1 1:шкя6гексвлкарбодйймида и оставляго

н8 при О С, Отфильтровывают вь ;павшую двцЕКяогексилмочевину, фильтрат прог-.швакуг последовательно 0,5 н.серной: кислотой, водой, 5%-ным бикарбонатом |катрия, водой, сушат и упаривают досуха. кристаллизации остатка из этила3

цетата получают 2,8 г (91%) ггролукте 1

с т.пл. 65 СНайдено,: С 57,04; Н е,8Й;-,C/ijIusNaOr

Вычислено.%;: С 56,96: Н 6,.

Пример 2. трет.«.Бут1и10ксикаь бонилгидразия карбобензокси ( -.пйет..бутйловый эфир) глутамилалапнна

™а ,„ . 2,7 г продукта / растворяют

J Г

;мл метанола я гидрируют в присуп/ствлк палладия на yi-ie до прекрашекия вьполс-к

: кия СО| . Ката.: затор отфилг,тровыиают. ; промывают метанолом, фильтрат уперивак

Ю-

досуха, остаток растворяют п 10 мл эткл

(ацетата. К полученному раствору добйрля ют 2,8 г й-.«иитрофенилового яЬира | ...

: трет.-бутилозого эфира карбсбензоксигп--тамнкоЕой кислоты и оставляют нз дпа

.дня при комнатной температуре, Смйс:-.,

;упаривают досуха и после кристаллкэавдг

КЗ эфира получают 3,0 г (96%) гто- :

:с т.пл. 117.12О°С. : НайденоД: С 56,87: Н 6.84.: CarHjgWvOff

Вь числено,%: С 57,45; Н 7,33.

Пример 3. трвт.-Бутилоксккар бонилггадразид карбобензоксивелш f , .. трет..бутиловый эфир) глутамклаланина

4,6 г продукта Ц, 1кдрмрук:т в метекол© аналогично примдр| 2). остаток

после упаривания растворяют в 13 мп диоксана к полученнок / раствору цобав--.

ляют 3,5 г № Нитрофенилевого эфир в. карбобензоксивалйна. Через два д

j комнатной температуре смесь аязВа-пщ;

водой, экстрагирукуг этиладетатом, зтилааетатный слой прог аг вануг .,{ 5 карбонатом натркя, водой, сушат и у;т&.,

ривают досуяб. После кристйлгпжэагги-г ooiтатха из смеси этилаввтат .. петролейет-й

зфнр пол;, 4,0 г (72%)

. 181 83, . - - .

НаЙяено,%: С 58,51: Н 7,64.

C,0H«.Nj-Of

ВычисленоД: С 57 н 2

Пример 4, трет.-э-х-If- гшлгндраэид карбсбензэ 2:гея г(трет.-бутилозьй .-ут- -. - i- (t«),

: 2,3 г продукте Щ гидрирузот в глета ко-,лэ (см. предыдущую методяку J,. осгйтог;:

после упариБйнкя метекояг растпаря-,о н

10 мл диметилформамида, добавлиот 1,Ё

И,-нятрофенилового эфире кербоббнэс::с.

лейцина л оставляют на два дня ггок комнатной температуре. Смес:-, раэбавлягкУа зфиром, выпавший осадок отфнльтрс-ЕЫвагот,

I После переосаждешш кз смесн димэткл-- .,

;л:гТс ювека последовательной кондеисашей народного аминокислоты с защищенными аминокислотами известным способом, удв« лением защитных групп каталитическим гидрогено/гизом и выделением целевого5 продукта и-знестным способом, о т л л . чающийся тем, что. с целью уг вершенствования npoi., п качества Оконечной зйпктной группы liono n.-.vKv, трет.-бутялокснкярбонилгр пплянп