(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ
дукта может быть получено за счет выпаривания маточных растворов п последующего выдерживания в холодильнике. Получен выход 140 г.
Хроматографический тонкослойный (силикагель мар«и «G) анализ с применением в качестве растворителя смеси хлороформа, этанола и воды (80 : 19 : 1) и проявителя пятен в виде реагента ванилин - серная кислота, при нагревании до 120° С в течение 10 мин показал наличие пятен.
Для указанных соединений были получены следующие значения Rf:0,22 (синее пятно); 0,20 (фиолетовое пятно) и 0,15 (желтое пятно).
ПрИМер 2. 120 г общего кристаллизата (Т), полученного, как указано в примере 1. взмучивают в 100 .мл дистиллированной воды. Полученную суспензию механически перемешивают I ч при 25° С. Затем суспензию фильтруют при отсасывании. Фильтрат пе учитывают. Полученную после фильтрования плотную массу нодвергают новой обработке водой прп тех же условиях, что указаны выше. Для последовательных обработок каждый раз применяют 1000 мл воды.
После четвертой обработки тонкослойное хроматографическое исследовапие, проведенное как указано вынле, показало, что желтое пятно, обусловленное наличием крустекдизона в плотной массе после фильтрования (10 г) в результате промывок водой стало существенно слабее по сравнению с фиолетовым пятпом, вызванном макистероном А, и синим пятном, вызванным экдизоном.
К объединенным водным фильтратам (4000 мл) добавляют метанол (1600 мл) и полученный раствор упаривают в вакууме при максимальной температуре 35° С до объема около 1100 мл. Конпентрат охлаждают на ледяиой бане и выделившийся кристаллический продукт (30 г) собирают на фильтре.
Данный продукт (В), по данным исследования методом тонкослойной хроматографии, состоит из макистерона А и крустекдизона. Маточные жидкости (В) затем высушивают в ва:кууме при температуре, не превышающей 35° С. Полученный остаток кристаллизуют несколько раз из смеси метанола с ацетоном в отношении 1 : 5 вплоть до достижения хроматографической чистоты.
Водонерастворимая часть обн1его кристаллизата (А), как такового, то есть остающегося еще влажным от воды, поглощают чистым метаноло:м на водяной бане при 50° С. Затем массу охлаждают до комнатной температуры. Продукт, который был отделен, собирают на фильтре (Б). Метанольный фильтрат, от которого продукт (Б) был отделен, показывает, по данны.м указанного выше хроматографического исследования, что он содержит крустекдизон и экдизон. Экдизон отделяют, упаривая фильтрат в вакууме досуха при низкой температуре (35° С). Полученный таким путем
остаток затем подвергают повторной кристаллизации из днстиллироианпой воды. Для получения хро.матографически чистого продукта требуется провести по : геньп1ей мере три кристаллизации. Для 7,5 г остатка нужно брать 1500 мл воды.
Окончательная очистка продукта после высушивапня его в вакууме достигается путем перекристаллизации из этилацетата. Полученный таким образом экдизон имеет т. пл. 230- 240° С. 15 г нерастворимого остатка (Б) сначала кристаллизуют из 50 мл метанола, затем из метанола, содержащего I об. % воды до тех пор, пока не будет достигнута степень чистоты, приемлемая в хро.матографическом отношении. Полученный при этом продукт является ма кистероном А. Маточные жидкости, поступающие после всех кристаллизации, объединяют и унаривают досуха в вакууме при температуре ниже 35° С. Полученный таким путем остаток (Г) объединяют с остатком (В) и все вместе растворяют в метаноле. Метанольный раствор упаривают в вакууме нрн низкой температуре. Полученный таким путем остаток (Д) затем нодвергают новой операции разделения, один или вместе с новой партией общего кристаллизата (Т). 21 г остатка (Г), смешанного с 50 г силикагеля (раз:мер частичек 0,05-0,2 мм) помещают в колонку, приготовленную с 600 г такого же силикагеля. Извлечение из адсорбента вымыванием осуществляют сначала смесью хлороформа с метанолом в соотношении 95 : 5. Сухой остаток после этого вымывания отбрасывают. Последующие четыре фракции, полученные с нрименением смеси хлороформа с метанолом 90 : 10, дают остаток, который по данным тонкослойной хроматографии содержит новое вещество, обнаруживаемое по зеленому пятну. Остаток вновь подвергают хроматографическому разделепию на новой колонке, как указано выапе, до тех пор, но.ка не достигается требуемая степень чистоты. Вымывание осуществляют только смесью хлороформа с метаноло.м 95 : 5. Новые экстракты из адсорбента упаривают досуха. Полученный остаток после перекристаллизации из этилацетата дает продукт, имеющий т. пл. 227- 230°С (скорректированную) - муристерон. Данные инфракрасного исследования в бромистом калии: 3600-3200; 1660; 1630 см-. Данные ультрафиолетового исследования в метаноле: 236 нм. 0,994, 52,8 мл (s 9050). ,6±Г (,02 в пиридине).
Пример 3. Крустекднзон-триацетат. 0,15 г крустекдизона (экдистерона), полученного по примеру 2, растворяют в 5 мл пиридина (безводного) и обрабатывают в 2 мл уксусного ангидрида при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор выливают в ледяную воду и обнаруженный осадок собирают на фильтре, высушивают и повторно кристаллизуют из смеси этилацетата с н-гексанам.
Получают 0,056 мг твердого кристаллического вещества, имеющего т. пл. 153-157° С, который признан экдистерон-триацетатом.
Найдено, %: С 63,64; Н 8,36.
Вычислено, %: С 63,46; Н 8,33.
:-|-59±Г ( в метаноле).
Литературные данные: т. пл. 198,5-199° С для лолугидрата.
При м е р 4. Макистерон-триацетат. 0,2 г макистерона, полученного по примеру 2, обрабатывают, .как описано выше для крустекдизона. После кристаллизации из этилацетата с н-гексаном получают 0,15 г макистерона-триацетата, имеющего т. нл. 237° С.
Найдено, %: С 65,38; Н 8,40.
Сз4Н52010.
Вычислено, %: С 65,80; Н 8,38. а -f,74±r ( в метаноле).
(Пример 5. Экдизон-триацетат. 0,10 г экдизона, полученного по примеру 2, обрабатывают, как указано выше.
Твердый остаток подвергают хроматографированию на силикагеле. Для вымывания из
адсорбента применяют смесь хлороформа с метанолом (99: 1). Отдельные фракции объединяют и кристаллизуют из гексана; получают 45 Л5Г твердого аморфного вещества, имеющего т. пл. 85-95° С.
Формула изобретения
1. Способ получения стероидных гормонов из растительного сырья, о т л и ч а ю щ и и с я тсл, что, с целью расширения сырьевой базы, части растения Calonyction Ipomaea (choisy) Hallier F. сем. Convolvuiaceae измельчают,
при необходимости обезжиривают и экстрагируют смесью хлорированного алифатического углеводорода (например, хлороформа), алифатического спирта (например, метанола) и органического основания (например, аммиака), экстракт концентрируют и отделяют целевой продукт.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что экстракц по осуществляют смесью хлороформа, метанола и а ммиака в соотношении
9 : О, 9 : 1.
