Штамм -43-продуцент -амилазы Советский патент 1976 года по МПК C12K1/00 C12D13/10 

1

Изобретение относится к микробиологи1еской промышленности, в частности к получению нового штамма, используемого для получения фермента d-амилазы.

Известны различные штаммы, испопьзуе- 5 мые для получения -амилазы, например

Bcsicieeus subtieis юз. i.

Известный штамм мало пригоден для производства oi- -амилазы, поскольку он не обладает необходим й амилолитической актив- ю ностью во время глубинного культивирования.

Цель изобретения - получение нового высокоактивного штамма - продуцента ot- -амилазы.15

Для получения штаммаБо1С1 Си$ subtiCis, продуцента оС -амилазы с высокой н стабильной амилолитической активностью, были выделены из почвы лугов Литовской ССР различные штаммы бактерий, способных к био- 20 синтезу амилолитических ферментов.

Из выделенных штаммов отобрали высокоактивный по биосинтезу амилаз штамм и идентифицировали как продуцент et, -амилаз. 25

Морфология.

Величина клеток двухсуточной культуры на мясо-пептонном агаре (ls5-2,7) мк X (0,3-0,5) мк. Клетки однообразно окрашенные, без капсул, темных форм нет, подаижные с помошью перитриховых жгутиков, спорообразующие, грамположительные палочки.

Величина спор (О,9-1,3)мкХ(О,5-0,7)мк форма цилиндрическая и эллипсоидальная, прорастают экваториально путем разрыва мембраны споры вдоль экватора.

На мясо-пептонном агаре после 24 часовой инкубации в термостате образуются колонии диаметром 3-4 мм. Они беловатые, непрозрачные, тусклые, шероховатые, экстенсивные, складчатые в центральной части, края гладкие.

На мясо-пептонном бульоне поверхность покрывается толстой морщинящейся восковидной пленкой. Бульон прозрачный.

На ломтиках картофеля образуется толстая складчатая пленка серовато-белого цвета, которая быстро ослизняется.

Оптимальная температура роста 36-37°С при рН 6,6-7,0. Дыхяние строго аэробное.

Гидролиззет крахмал, пептонизирует молоко, разжижаег желатину. Усваивает сахарозу, глюкозу и 1/3 сорбита. Не усваивает лактозу, арабинозу, ксилозу, мальтозу, рамнозу, маннит, дульцит и инозит. Нитраты не воестанавливаются в нитриты. На среде Кларка образуется ацетюзметилкарбянол. Не растет на среде с цитратами.

Гемолиз эритроцитов отсутствует,индола и сероводорода не образует,

Культура хранится в консервированном виде на ломтиках картофеля в пробирках, лишенных кислорода, с дополнительной пробкой, смоченной пирогаллолом, а также в лиофилизированном виде.

Стерильную питательную среду ОСТ 5972 Главмикробиопрома засеивают штаммов bacigfus subiiCis G -43, после чего инкубируют культуру при 37°С на круговой качалке при 180 об/мин. После 48 час роста в культураяьной жидкости определяют активность по методу фирмы Рапидаз.

В таблице приведены сравнительные данные об амилолитической активности предложенного штамма Bacif us sutjii is б-43 и производственного штамма BoiciE us subii is 103.

При использовании предлагаемого продуцента активность культуральной жидкости увеличается на 24,8% и обеспечивается более стабильная ферментация.