Способ получения антибиотиков Советский патент 1977 года по МПК C12D9/00 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ кая и гонкая поверхность, светпо-i орехово го цвега. Воздушный мицепий светло-розов го цвета, растворимый пигмент светпо-ореховый. Яично-апьбуминовый агар. Рост хороший гпадкая поверхность копонии светпо-оранже вого цвета с розовым налетом, с хорошо развитым воздушным мицелием, Пептоно-гпюкозный агар. Хорошо развит копонии со скпацчатой поверхностью темно- оранжевого цвета, образует пигмент светло-янтарного цвета. Ломтики картофеля. Рост умеренный, колонии со складчатой поверхностью светло-оранжевого цвета. Солодовый агар с дрожжевым экстрактом Рост хороший, колонии со слегка складчатой поверхностью светло-оранжевого цвета с розовым оттенком, воздушный мицелий развит хорошо ,светло-коричневого цвета, растворимый пигмент янтарного цвета. Агар с овсяной мукой. Рост хороший, гладкая поверхность от бледно-оранжевого до светло-оранжево-коричневого, с возрастом много спорангиев, светло-розового цвета, растворимый пигмент светло-орехов цвета. Усваивает фруктозу, маннит, ксипозу, арабинозу, сахарозу, маннозу, глюкозу. Плохо усваивает салицин, лактозу, не усва вает инозит, рамнозу, рафинозу, целлюлозу Гидролизует крахмал, казеин, сероводород образует, не гидролизует тирозин, кал циевые соли яблочной кислоты, лакмусово молоко не коагулирует, слабо пептонизирует лакмусовое молоко, нитраты восстанавливает, желатину разжижает, целлюлозу разлагает. Для получения антибиотиков штамм AciiMOpPoirtes ieichomycei-icus nov.sp. АТСС 31121 предварительно культивирую в питательной среде в аэробных условиях получения значительного количества мице- лиев, при рН 6-8. Культура,полученная в качалочной колбе, имеет следующий состав ,г/л: Мясной экстракт3,0 Триптон5 0 Дрожжевой экстракт5,0 Глюкоза1 0 Крахмал растворимый24,0 Кальциевая соль яблочной кислоты Вода дистиллированная до 10ОО,О Колбы встряхивают 24 ч при 28-30 после чего культуру (1л) пересевают в ферментеры, содержащие каждый по 10 л питательной среды следующего состава, в Мясной экстракт40 Пептон40 Экстракт дрожжевой10 Натрий хлористый25 Мука соевая100 Глюкоза500 Карбонат кальция50 Вода водопроводнаядо Юл Питательную среду с пересеянной предварительной культурой аэробно культивируют с перемешиванием при 28-30° С. Через одинаковые интервалы микробиологическим путем определяют образование антибиотиков Максимального образования достигают через 72-96 ч. Содержащиеся в ферментационной среде и мицелиальном жмыхе антибиотики экстрагируют обычным способом органическими растворителями. рН ферментационного раствора доводят до 3,5 добавлением хлористого водорода (8%), после чего дважды экстрагируют бутанолом (30%). Органические экстракты концентрируют в вакууме при 45С до j /Ю первоначального объема, промывают небольшим количеством воды при рН 3,5 и снова концентрируют до небольшого объема. Концентрированный раствор вьщерживают при невысокой температуре 10-15 ч до образования осадка, который отфильтровывают. Фильтрованный раствор выливают в большое количество петролейного эфира, сырой осадок отфильтровывают. Мицелиальный жмых промывают водой при рН 3,5, высушивают в вакууме и экстрагируют смесью вода-ацетон (2:8). Ацетоновый экстракт концентрируют в вакууме при 4О-45 С. Водный остаток доводят до рН 3,5 и трижды экстрагируют бутанолом. Собранные бутаноловые экстракты промывают небольшим количеством воды-пои рН 3,5 и концентрируют в вакууме до 1/20 первоначального объема. Концентрированный раствор выдерживают при 40°С 10-12 ч.. Получают сырой осадок, который от фильтровывают. Фильтрованный раствор выливают в большое количество петролейного эфира, образуется небольшое количество осадка. Результаты, полученные согласно проведенной хроматографии, показывают, что пр дукты, полученные охлаждением концентрированных бутаноловых экстрактов в основном содержат тейхомодин А;,, А и АдПричем А составляет наибольшую долю, а продукты, полученные осаждением в инертном неполярном растворителе (петролейном эфире), содержат антибиотик 8327 факторы В и С. Антибиотики 8327 факторы В и С разделяют противоточными способами и выделяют в виде отдельных соединений антибиоти