Изобретение относится к способу по лучения рроиз водных пенициллановой кислоты, кото{ ге могут найти npHMeHetние в медицине. : Иав-ес.т.ен. споср каталит11ческого восстановления азйдог уппы до аминот групйы, :йалримерсД9срб. получения а 4пицилЛи,Н-а. ааид 5Ь1рс иа В9га(ыв;, вос .становление, йХ- оаордэддм - :.яwe.-, лем прн/п-ф.в1да й-ч4 «йавлйнии;г: 1 / 1 23. Целью KsoepeTieHK :-явлW gтc Ра эработка способа получений новых антибиотиков пенициллинового. ряда, обладающих улучшенной антимикробной активностью. Цель достигается способом получения 6-замаценных пенициллинов общей 1 1г ,Сн. в,щ-|-т ч4, -N-Ч О COOBj где ацетил, фенилацетил, фетноксиацетил, сС -аминофенилацетил, - алкокси f предпочтительно метоксигруппы, водород или бензил. Способ заключается в том, что соединение формулы II 5 .i Н, «fr 0 cooij где Т ,1, имеют указанные значения, подвергают восстановлению водородом в органическом растворителе, таком как уксусный ангидрид, диоксан, этклацетат, в присутствии катализатора - окиси платины или 10%-ного палладия на угле при атмосферном или повышенном давлении водорода с последующим ацйлиройанием в хлорированном органичеёкси растворителе, таком как V Qтиленх;кэриД:, (соответствующим ангидридом или хлора н гидрид ом кислоты при 10-25 С и полученный при этом продукт выделяют в свободном виде или в виде бенэилового эфира. Пример 1. А. Бензил - 6 -ацетамидо-6-метокси {еницилланат. К раствору 0,065 г бензил-б-азидо-б-метоксипеницилланата в 20 мл уксусного ангидрида добавляют 0,065 г окиси платиЕш и смесь гидрируют при атмосферном давлении 18 ч. Получаемый раствор концентрируют под уменьшенным давлением при температуре ниже для удаления уксусного ангидрида. К полученному остатку добавляют смесь равных объемов метиленхлорида и этилового эфира и профильтровывают через кизельгур для удаления катализатора. Фильтрат и промывку выпаривают при пониженном давлении для получения 0,066 г бензил-6у9-ацбтамидо-6-метокси -пеницилланата. Сырой продукт очищают с помощью тонкослойнойхроматографии. Получают 0,03 г чистого продукта. RfcO,52 (2% СН OH/CHCgg), ИК-рпектр: 5,59/г/(/3-лактам) и 5,71 /W (эфир) . Б. 6 /Ь -Ацетамидо-6-матоксипенициллановая кислота и ее натриевая соль Раствор бензил б/3-ацетамидо-6-метоксипеницилланата (0,03 г) в смеси 2 мл диоксана/ 4 мл метанола и 2 мл воды гидрируют при использовании 10%ного палладия, нанесенного на 0,03т древесного угля при давлении 40 фунтов/дюйм в течение 1 ч. Удаляют кат талиэатор, а затем ввакууме при комнатной температуре удаляют раствори-, тель. К остатку 6 -ацетамидо-6-метоксипенициллановой кислоты добавляют раствор 0,03 г бикарбоната натрия в 10 мл воды. Бикарбонатньй раствор про мывают метиленхЛоридом,- водный слой сушат при. температуре 0°С для получения б З-аце амидо-б-метоксипеницилланата натрия. Пример2. Бензил-б-р-адетамидо-6-метоксипеницилланйт. Бензил-6-метокси-б- аминопеницилланат обрабатывают 2,0 мл уксусного ангидрида в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем уксусный ангидрид испаряют при пониженном давлении, ос-таток очищают с помощью препаративной тонкослойной хроматографии для получения продукта, имеющего /5 -лактам, эфир и амидкарбонил в инфракрасных спектрах поглощения и на тонкослойньох хроматограммах по существу такой-же, как и определенный для бензил-б/З-ацетамидо-6-метоксипеницилланата полу-;. ченногов примере 1 А.;,: ..;; П р ;ИМ е. р 3.. ,Фенилацетамйдот -б-мет.оксипенициллановая,. кислота и- её натриевая-соль . . - . А. Бензил-б-/57-ф.енйлацетамидо-6-ме-г токсипеницйлланат..-. К раствору 0,5 г 6ензил-:6-азидог6-метоксипеницилланата,, 2,5 г фенилуксусного ангидрида в 2.0 мл дйокеана до бавляют 0,25 гокиси-платины,-, получен ную смесь гидрирую при атмосферйом давлении 20 ч. Диоксин удаляют при по миженном давлении, а остаток/хроматографируют на 30 г силикагёля. Колонку промывают бензолом для удаления непро реагировавшего Фенилуксусного ангидрида и непрореагировавшего азида. Колонку элюируют хлороформом, пять фракций элюата по 50 мл выпаривают для получения сырого продукта, смешанного с фенилуксусной кислотой. Сырой продукт растворяют в 30 мл метилег|хлорида, про мывают одной порцией 5%-ного раствора бикарбоната натрия, высушквв т над сульфатом 1 1агния и выпаривают для получения 0,175 г бензилового эфира б-метоксибензилпенициллина. Этот продукт хроматографируют на силикагеле при использовании градиента хлорида этилацетата для получения 0,06 г чистого 6- -фенилацетамидо-б-метоксипеницилланата.Этот продукт имеет Т3 0,434 (2% СНаОН/ /СНСг);. Ик-спектр: 5,59/U (/3-лактам) ; 5,7lyU (эфир) ; 5,95/и(амид 1) и 6,58/U (амид II ).« В. б-у&-Фенилацетамидо-6-метоксипенициллановая кислота и натриевая соль К раствору 0,317 г бензил-б-уЗ-фенилацетамидо-6-метоксипенициЛланатав смеси 90 мл диоксана, 5,0 мл метанола, и 10 мл воды добавляют 0,317 г 10%-ного палладия, нанесенного на древесный уголь, и 0,063 г бикарбоната натрия. Смесь гидрируют при давлении 40 фунтов/дюйм 2 ч.Катализатор отфильтровывают, рн фильтрата доводят до 7,3 и большую часть диоксана и метанола удаляют при пониженном давлении при температуру ниже комнатной. Получившийся водный раствор дважды промывают мё1:и л енхярри дом ri.в од ную фазу сдааФг ;ЛРИ/vT Mnepai ype . Высушенн;{ е.;. -oapaaoiyi iэ.щ.ёство перемш1Ив;4кйг;-:&, 20;-. бёзводйого.метанoлa .унёрартврримЕлй :иео.ргани еский продукт: огфййЬтрбрЫвак. Фильтрат испар|яю йрй тетературе ниже комнатной- . И .получают; .0,20 8-:г натрий-гб-уЗ-фенила пйт ами1то--€-йеток си .цилл а на та. ; - cnekfpr;v,65 и ( /3 -Лактам); fy95 Х йий 1).:; :б,19:уЬг.( ) . ;; ;Й;р:ИМ.е р4.. Натриевая соль 6ft-фен.оксиацетамидр-б- метоксипеницилла-:нов.ой .Кислоты. .. . ,: ; ; ;,Д. Бензил-б- -феноксиацетамидо-бХметоксипеницилланат. . .К раствору 0, бензил-6-/3-азидогб-метоксйпеницилланата 4,О мл диоксана,. содерькащем . О / 403.- г: феноксиуксусного ангидрида, йобав71шот 0,0 75 - F окиси платины, и CMficb . гндрифуют Г8.4 -С перемешиванием п;од.Дав; 9йием водорода, равным з4 фунта/дюйм. Получающуюся смесь :концен. в вакууме при комнат:ной-:темпера±УРе и остаток абсорбируют на ;крлонКсе, напол«ен,ной 20 г силикагёля, бензолом. Продукт элюируют из абсорбата хлороормом вместе с фенслуксусной кислотой. Объединенные фракции, содержащие 0,377 г, растворяют в хлороформе и 3 раза промывают Sf-HHW раствором бикарбоната натрия. Затем хлороформный раствор концентрируют, и остаток вновь хрсматографируют,на 5 г силикагеля и элюируют смесью 2-3%-ного этил ацетата в метиленхлориде, элюат выпар вают для получения бенэил-б- фенокси ацетамидо-6-метоксипеницилланата. ИК-спектр 3,00/и; 5,бЗ/и; 5,74/U; 5,91/U . Б. б-/5-Феноксиацетамидо-6-метоксипенициллановая кислота и ее натриевая соль. Раствор 0,028 г бензил-б-уЗ-феноксиацетамидо-6-метоксипеницилланата в 8 мл растворителя (диоксан:метанол-.во да , в соотношении 1:2:1), содержащий 0,028 Г: Др%-ной платины на древесном угле, Гй црогенизируют 1ч при давлеНИИ 40 фунтов/дюйм Катализатор удаляют фильтрованием, ;а.органические растворители испаряет в вакууме лри комнатной температуре получения . 6-метокси-б-феноксиацётамидойенйЦИллановой кислоты, к которой добавляют водный раствор 0,06 г бикарбоната натрия в 10 мл воды. Водный раствор затем экстрагируют малым количеством метиленхлорида и после лиофильной перегонки получают натрий-б-/3-Феноксиацетамидо-б-метоксипеницилланат. ИК-спектр: 5,66yU; 5,91/U; б,0/Ы. Тем же самым способом получают риевую соль б-фенилацетамидо-б-метилпенициллановой кИслоты при замещении б-амино-б-метилпенициллановой кислоты на б-метокси-б- -феноксиацетамидопенициллановую кислоту, а в остальном следуя методике, описанной в примере 4Б. В. Бензил-б-р-метокси-б-фенилацетамидопеницилланатСмесь 150 г бензил-б-оС-азидо-б-Метоксипенидилланата, 0,1 мл диизопропилэтйламина и 75 мг 10%-ного палладия и древесном угле (катализатор) в сухом зтилацетате (1,5 мл)гидрируют при атмосферном давлении и.комнатной температуре. 3) ч.:.К полученномуVpacTвору бензил-б йС-а.ми:ко-б метоксип ениг цилланата дсэбавляюТ раствор .200. мг фенилуксусногр .анГ;Идрида- в -S мл метй ленхло рида, смесь пёР Э:мешива19Т при комнатной температуре 2.0МИН,, затем каталиэатЬр-уааляют фильтрацией, а: растворители :отгоняют v ;Qcr.aTok хромат графиру.ют на; 2U. .г ;.сйЛнкагеля; Метилен хлорид пргопу екают. :чбрвз; колонку до тех пор, пика .элюат сддерясит. свободную фенилуксусную кислоту,га затем элюируют продукт смесью З -ного этилацетата в метиленхлориде. Получают 75 мг бензил-6-/&-метокси-б-фенилацетамидопеницилланата. ИК-сПектр 5,65 /U ( (Ь-пактам t 5,75 /U (эфир) и широкая связь, 5,92,02 /U (амид) (пленка). Примерб. (D -об-Амино eнилaцeтaмидo) -б- метоксипенициллановая кислота. 1,0 г бензил-б-уЗ-азидо-6-метоксипеницилланата растворяют в 80 мл суxorq этилацетата, 4 мл | , М.-диизопро пилзтиламина и добавляют к раствору 10%-ный палладий на угле (1,0 г),Реакционную смесь перемешивают 10-15 ч под водородом при атмосферном давлении. Катализатор отфильтровывают и растворитель удгшяют.Остаток растворяют в 100 МП метиленхлорида и помещгиот на ледяную баню при 10°С.Добавяяляют 20 мл пиридина, а затем одной порцией добавляют .1,45 г (-) -азидофениладетилхлорида.После 45 мин перемешивания .-смесь выливают на лед, содержащий.;- 1,0 .г бикарбоната натрия. Два слоя разделяют и водный слой последовательно промывают тремя порциями метиленхлорида. Объединенные слои метиленхлорида промывают водой, сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают для получения темно-красного масла. Эта реакция повторяется более двух раз, продукты собирают и пропускают через колонку, заполненную 60 г силикагеля в бензоле. При элюнровании бензолом отбирают фракции по 200 мл. Фракции 11-23 содержат 0,981 г продукта, который растворяют в 100 мл метано.ла и 100 МП воды,добавляют 1,96 г 10%ного палладия на угле,и смесь оставляют на Parr SHaker на 2 ч. Катализатор удаляют фильтрованием. Органические растворители удаляют перегонкой. Оставшийся водный раствор промывают 2 порциями метиленхлорида, собранные растворы метиленхлорида еще раз промывают водой. Объединенные водные слои высушивают при температуре ниже . Получают 0,5 г б/3-(t)-оС-аминофенилацетамидо)-б-метоксипенициллановой кислоты. TvC.X.: 0,65 в бутаноле, уксусной кислоте и воде в соотношении . ;., ИК-спектр: ниjoE 1765 (/}-лактаК1);, 1700 (амид), 1600 (СОО-) . и р и м е р 7. Бензил-б-р-азидо-б-метоксипеницилланатА. Эпимеризация бензил-б- -бром-6-метоксипеницилланата. Раствор 200 мг бензил-б-у5-бромметоксипеницилланата и 0,2 г бромида лития в 1,5 мл диметилформамида перемешивают 10-15 ч при комнатной температуре. Диметилформамид удгшяют в вакууме, остаток извлекают хлороформом и проливают водой. Раствор хлороформа выпаривают, оставляя изомерную смесь содержащую по данн1м ЯМР 23% /а-бромизомера И 77% ot -брсмизомера. Хроматография на силикагеле с градиен
.том элюироваиия при зозрастании концентрации метиленхлорида в гексане давало 90 мг кристаллического б- Х-бром-6-метоксипенипилланата, имеющего т,пл. 41-43 С. ,
ИК-спек р1 5,59ум (р-лактам) ; 5,75 (эфир) (nyJoB muS) .
В, Бензил-б/5 -азидо-6-метоксипеницилланат
Раствор 90 MJ. бензил 6-ой-бром-б-метокси пеницилланатаКТоПЛо 43-41 с) в 1,5 мл N -литййазида в диметилформамиде .оста;зляют при комнатной температура на 3 Чо Диметилформамид откачивают в вакууме, остаток извлекают четыреххлористым углеродом-и водой. Сме центрифугируют и верхний водный слой удаляют. Органический слой промывают водой, трижды, затем высушивают и выпаривают. -Получают 50 мг бензилового эфира б/Э-азидо-6-метоксипенициллина,
а)Бензил-6-этокси-б-фенилацетамидопеницилланат
Смесь 3,6 г бензил б-азидо-б-эток-сипеницилланата, 2,8 мл диизопропилэтиламина и 3,6 г 10%-ного палладия на угле в 40 мл этйлацетата перемешИ. вают в атмосфере водорода при комнатной температуре и атмосферном давлении 18 ч. Раствор 4 г фенилуксусного ангидрида в 50 мл метиленхлорида добавляют к этой смеси и оставляют при комнатной;температуре на 0,5 ч. Смесь Ьтфильтровывают, и фильтрат разгоняют под пониженньм давлением. К остатку приливают-эфнр, промывают фосфатны буфером, имеющим рН 7, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают. Остаток хроматографируют на 5.00 г силикагёля. Элюирование 2%-ным этилацетатом в метиленхлориде дает 1,5 г бан зИл-б-этокси-б-фенилацетамидопеницилланата
Элементный анализ
Вычислено, % С 64,08; Н 6,02;
М 14,88,
Найдено, %: С 64,43; Н 6,15;
М 15,03о
б)Натрий-б-этокси-6-фенилацетамидопеницилланат
Раствор 1 г бензил б-этокси-б-фенилацетамидопеницилланата и 180 г карбоната натрия в 34 мл воды, 16 мп метанола и 30 мл диоксана гидрируют при.давлении 40 фунтов/дюйм в присутствии 10%-ного палладия на угле в качестве катализатора- в течение 3 ч. Свежий катализатор (1 г) добавляют и продолжают гидрирование;еще 2 ч. Катализатор затем отфильтровывают, фильрат выпаривают до минимального объема, разбавляют водой и высушивают при температуре ниже О С. Получают продукт натрий-б-этокси-б-фенилацетамидопеницилланат.
ТоС.Х. в смеси бутанол:этанол:вода 4:ls5, 0,66.
П р и м е р 9. б-ТиенилацетамилР-б-аминопенициллановая кислота.
10 ммолей бензил б-тиенилацетамидо -б-нитропеницилланат восстанавливают в 50 мл л.етанола, используя в качестве катализатора 1 г палладия на угле при давлении 40 фунтов/дюйм, при KOM натной температуре 1ч, Растворитель удаляют выпариванием для получения б-тиенилацетамидо-б-аминопенициллановой кислоты;
Примерю.
А. Бензил-б- ос-оксиметил-б-/3-феноксиацетамидопеницилланат.
Бензил б ОС -оксиметил-б (Ь -аминопеиицилланат, полученный из 1,2 г соответствующей тозилатной соли, .охлаждают д в среде 5 мл метиленхлорида и интенсивно переметоивают с 820 мл растворенного в 15 мл воды, одновременно прибавляют по каплям на протяже НИИ 1 мин к реакционной смеси раствор 440 мг феноксиацетилхлорида в 10 мл метиленхлорида. После энергичного перемешивания при температуре О С в течниё следующих 15 мин фазы разделяют и водный слой повторно экстрагируют метиленхлоридом и после высушивания объединенных органических фаз сульфатом магния упаривают в вакууме для удаления растворителя, получая 1,16 г сырого продукта, который очищают хроматографией на колонке, заполненной 35 г силикагеля (причем набивка, колонки сорбентом производится в хлороформе). Для элюирования первых 12 фраций используют хлороформ. Фракции 13 и 14 элюируют 30 мл 1%-ного этйлацетата в хлороформе, тогда как для элюирования фракций 15-21 используют 50 мл.2,5%-ного этйлацетата в хлороформе. Собранные фракции анализируют на присутствие целевого продукта с помощью тонкослойной хрсматографии. По результатам этого:анализа объединяют фракции с 5 по 17у получают 676 мг бензил-боС -оксиметил-б/3-фенрксиацетамидопеницилланата, На ИК-спектре продукта () присутствуют полосы поглощения характерные для МН-ЮН (2,8-3,1 мкм), полоса у5 -лактама (5,62 мкм), полоса поглсяцения сложно эфирной группы (5,73 мкм) и амида (5,96 мкм). Для спектра протонного магнитного резонанса (ПМР) выделенного вещества (в дейтерированном хлороформе) характерно наличие пиков в области 452-408 (комплект 11Н; основные пики при 442 и 421), 338 (1Н) ; 312 (2Н), 272 (2Н), 268 (1Н) , 253 (2Н 86 (ЗН) и 82 (ЗН) Гц.
Исследование полученного вещества методом масс-спектрометрии также показало наличие целевого мсшекулярного иона смолярным весом ( т/е) t.470,
Ё. Натриевая соль бо -оксиметил-б / -феноксиацетамидопенициллановой кислоты
Бензиловый эфир боб.-оксиметил-6/3-феноксиацетамидопенициллановой кислоты гидрируют в водном метаноле в Ьрисутствии равного по весу количест)ва 10%-ного Pd /С {по Больхоферу) и i. эквивалента бикарбоната натрия в течен11е 1 ч под давлением 40 фунтов/ /дюйм . После завершения гидроанализа катализатор отфильтровывают, а фильтрат лиофилизуют. В результате лиофилизации с почти количественным выходом выделяют натриевую соль б оС-оксиметил-б /J -феноксиацетамидопенициллановой кислоты, на ИК-спектре которой (в вазелиновом масле) обнаруживаются полосы поглощения, характерные для WH-ОН-группы (2,8-3,1 мкм), /Э -лактама (5,68 мкм), амида (5,96 мкм) и карбоксилата (6,26 мкм), На.ПМР-спектре продукта имеются пики в области 452410 Гц (комплекс 5Н; главньШ пик - 422 Гц), 330 ГЦ (1Н), 279 (); затемняет пик (ОСН.СО), 252 Гц (1Н), 242 (2Н) , и. 84 Гц (бН)..
Тозилатнуй) соль бензилового зфира , 6с -оксиметил-бр -аминопенициллановой кислоты, используемую в качестве исходного вещества в разделе А, получают следу1ощим образом.
1,53 г бензилового эфира б-аминопенициллановой кислоты, полученного этерификацией исходной б-аминопенициллановой кислоты фенилдиазометаном, кипятят 1 ч с 50 мл бензола и 0,75 г паранитробензальдегида, используя прибор для азеотропной отгонки воды. После этого растворитель отгоняют в вакууме, получая 2,2 г бензил-б-(паранитробензилиденамидо)-пеницилланата. Это продукт (200 мг) растворяют в О,5 мл К ,N -диметилформамида. Через.полученный таким образом раствор изумрудно зеленого цвета пропускают короткое время азот- к которому подмешив.ают затем газообразный формальдегид, полученый нагреванием 50- мг параформальдегида в потоке азота. Эту га.зообразную смесь азота и формальдегида.пропускают через раствор Шиффова основания. Зеленый цвет раствора при этом быстро исчезает, сменяясь сначала оранжевым, а затем жёлтым цветом. Конечный реакционный раствор упаривают в высоком вакууме дообразования смолистой массы которуто дважды;растворяют в нескольких капЛях хлороформа и снова упривают в вакууме, получая бензил-6/4 (4-нитробензилиденамино) б- о -оксиметилпеницилланат в виде смолистого ве щества. Сырой бензил 6 ;в-(4-нитробёнзилиденамино)-б «;-оксиметилпеницилланата, полученный из 2,4 г бензил-6-(-нитробензилиденамиГ)) пеницилланата, растворяют в Гй мл абсолютного
этанола и 1 мл метиленхлорида, полученный раствор прибавляют к смеси 1,04 г моногидрата паратолуолсульфокислоты ,08 г тонко измельченного 2,4-динитрофенилгидразона, которую перемешивают в 10 мл абсолютного; этанола. Прибавление упомянутого раствора осуществляют в течение 30 мин, после чего реакционную смесь перемешивают еде 30 мин, причем за 15 мин до конца этого периода к рг акционной смеси добавляют еще 10 мл абсолютного этанола. Оранжевого цвета суспензию фильруют и осадок на фильтре несколько раз промывают небольшими порциями абсолютного этанола. Объединенный фильтрат упаривают в вакууме при температуре ниже комнатной. Полученное в остатке твердое вещество суспендируют в диэтиловом эфире, содержащем несколько капель метиленхлорида; суспензии дают отстояться, жидкость декантируют и после упаривания в вакууме получают 2,4 г тозилатной соли, пригодной дальнейших химических превращений. Перекристаллизация из этанола и диэтилового эфира дает чистую тозилатную соль бензил-бос-оксиметил-б/2)- -аминопеницилланата с т.пл. 1б8-1б9°С
Элементный анализ:
Вычислено, % С 54,31; Н 5,55; V 5,61; И 12,61.
СогНоо NjO&j.
Найдено, %: С 54,01; Н 5,59; М 5,42; 0 12,54.
На ИК-спектре (в вазелиновом масйе) имеются полосы поглощения, соответствующие NH-OH (2,85 мкм, 2,99; 3,7-4,3 мкм), /5 -лактаму (5,63 мкм) и сложно-эфирному карбонилу (5,77 мкм На спектрепротонного магнитного резонанса, снятом в ДМСО-Т) , имеются пики в области 454, 446, 431, 422 (4Н 445 (5Н), 330 (1Н), 314 (2Н), 274 (1Н 233 (2Н), 138 (ЗН), 97 (ЗН), и 83 (ЗН Гц, считая от пика тетраметилсилана.
Пример 11. Синтез натриевой соли бос-оксиметил-б -ацетамидопенициллановой кислоты
А. Вензил-бс С-оксиметил-б р-ацетамидопен ицилл анат
При длительном выдерживании бензил-боС -ацетоксиметил-6 /Э-аминопеницилланата при комнатной температуре происходит медленная ацильная миграция, в результате чего исходный бензил б об-ацетоксиметил-6 /3 -аминопеницилланат трансформируется в бензил-бос -оксиметил-б у5-ацетамидопеницилланат. Этот процесс можно проследить с помощью тонкослойной хроматографии. Сначала на тонкослойной хроматограмме имеется всего одно пятно, свидетельствуквдее об однородности исходного бензил 6 сХ-ацетоксиметил-6/Э -аминопеницилланата. Однако по прошествии определенного промежутка вре11
мени на хроматограмме появляется второе,- более полярное пятно ,15 (50%-ый этилацетат в бензоле). К9гда реакция изомеризации достигает в своем развитиидостаточно .глубоких степеней превращения, упомянутое, бо лее полярное вещество выделяют ,с. помощью препаративной тонкослойной хро матографии. Полученный таким образом бензил-б (Зб -оксиметил-б уЗ -ацета 4идопеницилланат (выход 50%) обнаруживает на ИК-спектре1полосы поглощения, .характерные для И Н-ОН-группы (2,83,2 мкм), jb -лактама, бензилового сложного эфира (,8 мкм) и амидного карбонила (5,99 мкм)-. На спектре ПНР (.CDСЕ3 ) имеются следующие 41ИКИ (положение пиков указывается в гц от тетраметилсилана: 446 (5Н), 365 (широкий 1Н)р 339 (lH),i 314 (2Н) 268 (1Н), 250 (2Н)р 125 (ЗН), 96 (ЗН) и 84 (ЗН) ГЦ, .
Бо Натрий-б «й-оксиметил-буЗ-ацетамидопеницилланат
Натриевая соль 6 ct-оксиметил-б/S-ацетамиДопенициллановой кислоты полу чается, в результате гидрирования бен зил-боб. -оксиметил-б ft -ацетамидопеницилланата над палладиевым катализатором по методике, описанной в примере 1Вс
Исходное вещес тво, бензил-боб-ацетоксиметил-буЗ -аминопеницйлланат получают в соответствии со следующей методикой. Смесь 270 мг бензил-боС-оксиметил-6 ft-(4-нитробензилиденамино)-пенидилланата и 0,1 мл эквимолярной смеси (1:1) уксусного анлидрида и пиридина оставляют стоять в течение.16 ч при комнатной температуре, после чего реакционный,раствор .концентрируют в ;высоком вакууме до образования смолис той массы, которую дважды растворяют в небольшом количестве хлороформа и снова упаривают досуха при пониженном остаточном давлении. Полученный в остатке продукт очи,щают с помощью препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле с размером частиц 1000 мкм, содержащем флоуресцентный индикатор. Желаемая Фракция вещества обнаруживается в виде полосы c ftO-f 41|. местоположение которой на хроматографической. пластинке распознается .после 1 люйрования4%-ным 9тилацетатом в хлороформе, облучен«ем коротковолновым или1ц1инноволновым ультрафиолетовым светом в виде темной полосы. Бензил-бу5-(4-нитробензилиденамйно)-бо -ацетоксиметилпеницилланат (104 мг) удаляют и злюируют этилацетатом. Спектр ПМР ( показывает.пики в 1области 531 (1Н), 504, 495, 483, 474.{АВ-квартет; 2Н), 265 (1Н), 124 (ЗН), 1§2 (ЗН)
12
и 86 (ЗН) Гц (положение пиков на спектре указывается в герцах по отнсяиению к пику-тетраметилсилана) . На ИК-спектре (СНСЕ) присутствует . ожидаемая пара Полос поглощения карбональных групп в области 5,64 и 5,72 мкм. Выход по этой методике составляет 160 мг.
Смесь 62 мг растертого в порошок 2,4-динитрофенилгидразина и 59 мг моногидрата паратолуолсульфокислоты перемешивают в 1,0 мл абсолютного этанола в течение 20 мин, после чего к этой смеси прибавляют раствор 160 мг бензилгб/5-(4-нитробензилиденамино)-боС цетоксиметилпеницилланата в 1 м абсолютного этанола и 0,1 мл метиленхлорида . После перемешивания реакционной массы в Т1ечение 30 мин смесь отфильтровывают и осадок на фильтре 45 раз промывают .абсолютным этанолом. Фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении и температуре 1иже. комнатной или равной ей. Полученное твердре вещество несколько раз прокйлвают эфиром. Инфракрасный спектр синтезированной таким образом тозилатнрй соли бензил-б-оС-ацетоксиметил-бр-пеницилланата отличается наличием двух полос поглощения в карбональной области (5,60 и 5,72 мкм, в вазелиновом масле) . Спектр ПМР (ДМСО-1Э) характеризуется присутствием следующих пи .ков: 458, 450, 433, 425 (АВ-квартет; 4Н), 447 (5Н), 332 (1Н), 315 (2Н), 278 (1Н), 271 (широкий; 2Н), 138 (ЗН) 122 (ЗН), 97 (ЗН) и 83 (ЗН) Гц (положение каждого пика дается в герцах по отношению к пику внутренней метки тетраметилсилана).
-Готовят смесь 75 мг дикалийгидро.фосфата, 2 мл воды, 3,5 мл эфира и 0,5 МП этилацетата. К этой смеси прибавляют 120 мг тозилатной соли .бензилбоС-ацетоксиметил-б ft-аминопеницилланата, после чего смесь энергично встрхивают. После .разделения фаз и второй экстракции водной фазы 2 мл эфира органические фазы объединяют и суша безводным сульфатом магния. После фильтрования и.упаривания фильтрата при пониженном давлении полученное смолистое веществоДважды растворяют в небольшом объеме хлороформа и снова упаривают досуха пРИ пониженном давлении, получа; вещество, напоминаняцее камець Это продукт .подвергают очистк е с: помощью лрепаративн ой тонкослойной хроматографии на силик агеле с размером частиц.1000 мкм, обработаннйм флуоресцентным индикатором, Элюирование производят этилаце-; татом. Желаемая полоса, содержащая 6ензил-б« -ацетоксиметйл-б;;й-аминопеницилланат, обнаруженная облучением пластийки коротковсхпновым и длинновсшновым ультрафиолетовым, свете, удаляется с пластинки и экстрагируется этилацетатом. На ИК-спектре имеются полосы поглсвдения, соответствующие NHj-rpynne (2,95-3,05 мкм), /Ь -лактаму (5,61 мкм) и сложному эфиру (5,72 мкм). Для спектра ПМР этого продукта (CDCEi) характерно наличие иков в области 446 (5Н), 324 (5Н), 314 (2Н), 269 (1Н), 264 (широкий; 2Н 124 (ЗН), 122 (очень широкий; 2Н), 96 (ЗН) и 86 (ЗН) Гц. Тонкослойная хроматография выделенного продукта н риликагеле со среднимразмером части порядка 250 мкм при элюировании в си теме 50%-ного этйлацетата в бензоле дает практически одно пятно 0,4 Удаление этого пятна и элюировайие этилацетатом дает вещество, которое проявляет сильный молекулярный ион с . Пример 12. Синтез натрий-боС -аминометил-б/5-феноксиацетаминопени цилланата А. Бензил-б oi-азидометил-б/3-фено сиацетамидопеницилланат Смесь 132 мг моногидрата паратолу олсульфокислоты и 137 мг тонко расте того 2,4-динитрофенилгидразина перемеиивают в течение 0,5 ч в 3 мл абсо лютного этанола. К полученной суспензии прибавляют 340 мг бензил-бо -азидометил-б/3-(4-нитробензилиденамино) пеницилланата в 3 мл абсолютного эта нола и 2 мл метиленхлорида, смывают все это еще 3 мл абсолютного этанола и полученную смесь перемешивают в течение 0,8 ч. Фильтрование и упаривание в вакууме при температуре, близ кой к комнатной, дает после эфиром твердый кристаллический продук желтого цвета прёдстайляющийсобой тозилатную соль бенэиЛ-бой-азидометил-б /5 -аминопёнициляаната, К этому продукту прибавляют при перемешивании и охлаждении на ледяной бане 132 мг феноксиацетилхлорида в 3 мл метиленхлорида и 335 мл в 3 ил воды, смывая каждый раствор соответственно 2 мл метиленхлорида и 2 мл воды. После энергичного встряхивания реакционной смеси в течение 20 мин при ОС смесь обрабатывают 62 мкл пиридина, перемешивают в течение 5 мин и оставляют отстаиваться. После этого фазы разделяют, водный слой экстрагируют 2 мл метиленхлорида и 2 мл эфира. Органические фазы объединяют, сушат сульфатом магния и концентрируют в вакууме до образования смолообразной массы. 347 мг полученного таким образом сырого продукта очищают препаративной тонкослой ной хроматографией на четырех пластин ках размером дюйма с силикагеле имекмцим размеры частиц порядка 1000 м -Для элюирования используют 5%-ный рас вор этйлацетата в хлороформе. Этим способом выделяют 282 мг бензил-боб-аэидометил-бр -феноксиацетамидопеницилланата. На ИК-спектре (СНС) присутствуют полосы поглощения, характерные для N Н-группы (2,9-3,1 мкм), азидной группы (4,74 мкм), --лактама (5,60 мкм), сложного эфира (5,72 мкм) и амида (5,92 мкм). На спектре ПМР (CDCE-) имеются пики в области 444103 Гц(комплекс 11Н; основные пики при 436 и 415 Гц), 327 (1Н), 308 (2Н), 269 (2Н), 266 (1Н), 241 (2Н),.84 (ЗН) и 81 (ЗН) Гц. Б. Натрий-6сС-аминометил-6/Й-феноксиацетамидопеницилланатГидрогенолиз бензил-6 сС-азидометил-6 -феноксиацетамидопеницилланата в присутствии палладия на активированном угле приводит к сопутствующему восстановлению азидометильной, группы до аминометильной группы. Полученный при этом с практически количественным выходом продукт дает на спектре ПМР (вТЭ.О следующие пикиг 448-207 (комплект ЮН; главный пик при 420 Гц), 332 (1Н), 283 (2Н), 279 (сильный пик Н„О), 254 (1Н), 224 (2Н), 92 (ЗН) И 86 (ЗН). Положение пиков на спектре ПМР выражено в герцах, причем отсчет ведется от пика тетраметилсилана, используемого в качестве внутренней метки. В положении пиков при 254 и 224 Гц наблюдается некоторая зависимость от рН среды. Бензил-боб -азидометил-буЗ - (4-нитробензилиденамино) -пеницилланат, используемый в качестве исходного вещества в разделе А описываемой методики, был получен следующим образом. Смесь 2,94 г бен,зил-б/3 - (4-нитрО7 бензилидeнa шнo)-б -оксиметилпенициланата и 1,57 г паранитробензолсульфонилхлорида в 20 мл сухого метиленхлорида обрабатывают при перемешивании ,915 мг .диизопропилэтиламина, растворенного в 5 МП сухого метиленхлорида. Перемешивание реакционной смеси продолжают в течение 4,5 ч, после чего раствор промывают последовательно водой, раствором 1,24 г К,2НРО в воде и снова водой. Затем органическую фазу сушат сульфатом магния и упаривают в вакууме до образования вспененной массы весом 4,1 г. Этот продукт очищают на 120 г силикагеля, который загружают в колонку в бензольной среде. Элюирование производят бензолом. После того, как объем элюата составит 1,7-1,8 л, пробу элюата анализируют методом тонкослойной хроматографии и обнаруживают пятно целевого продукта, который целиком был получен в следующих 300-400 мл элюата, упаривание которых дает 1,3 г бензил-бо; -(4-нитробензолсульфонилоксиметил)-6 /Ь-(4-нитробензилиденамино) пеницилланата, на ИК-спектре которого практически от15еутствует лолоса поглощения ОН-грурпы но хрисутствуют полосы поглощенияуЭ-лактама (5,.62 мкм) и сложного эфира (5,71 мкм). -На спектре ПМР (в дейтеро хлороформе), имеются пики: 518 (1Н), 56-465 (комплекс из двух квартетов, 8Н), 442 (5Н), 327 (1Н), 312 (2Н), 277 (2Н), 260 (2Н), 89 (ЗН) и 82 (ЗН) которые выражаются в герцах по отношению к тетраметилсйлану. Смесь 575 мг хлористого лития и 883 мг азида натрия перемешивают с те чен1 е10-1о ч с 13,6 мл диметилсульфоксида, высушенного молекулярными ситами-. Суспензию отфильтровывают и .растворяют в 8,2 мл фильтрата, 500 мг ,бензил-6оС- (4-нитробензолсульфонилокс .(етил) -6 /3 - (4-нитробензилиденамнно) -пеницилланата.После вьвдерживания при комнатной температуре в течение 2,8 ч смесь выливают в делительную воронку с 30 мл. ледяной воды и 30 мл этилацетата. После встряхивания и последующе го разделения фаз водный слой снова экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат сульфатом магнИЛ, отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме, получают 397 мг вязкого масла. После очистки этого продукта препаративной тонкослойной хроматографией на пяти пластинках (йд х8 дюйма) с силикагелеМ| имеющим размер частиц порядка 1000 мкм, при ис-. пользовании в качестве элюэнта Ь%-но го раствора этилацетата в хлороформе, получают 340 мгЪродукта. На ИК-спект (в CHCPg) имеются полосы поглощения азидной группы (4,76 мкм) , у2 -лактама (5.,66 мкм) и сложного эфира (5,71 мкм);/Для спектра протонного магнитного резонанса (ПМР) этого продукта в дейтерохлороформе характерно присутствие следующих пиков: 517 (Ш), 492, 483, 472, 464 (4Н) , 435 (5Н), 32Ь (1Н), 308 (2Н), 261 (1Н), 229 (2Н), 89 (ЗН) и 83 (ЗН), положение которых вБгражается в герцах от пика тетраметилсилана, взятого в качестве внутренней метки. Исходный бензил 6 уЗ -(4-нитробензилиденамино)-6 оС-оксиметилпеницилланат получают очисткой сЕлрого продукта по следующей методике: сырой бензил-6 /} - (4-н.итробензилиденамино) -6 об-оксиметилпеницилланат подвергают очи ке с помощью препаративной тонкослойной хроматографии. на силикагеле с флу оресцентным индикатором,; используя в качестве элюента .201-ный раствор этил ёщетата в бензоле. Желтая в видимом свете полоса, целевого продукта, которая выглядит темной на светлом фоне при облучении хроматографической плас тийки длинноволновым или коротковолновым, ультрафиолетовым светом и которой предшествует интенсивно желтая (в видимом свете) nciioca, удаляется
16 с пластинки и экстрагируется этилацетатом. После упаривания этилацетатного раствора получают бензил-6/3 -(4-нитробензилиденамино) 6csC -оксиметилпеницилланат. На ИК-спектре этого продукта в хлороформе присутств5 т полосы поглснценияОН-группы (2,8-3,1 мкм) /J-лактама (5,65 мкм) несложного эфира (5,72 мкм). Для ПМР-спектра с СДС характерно наличие пиков, соответствукнцих бензилиденовым и (протонам, которые выражаются острыми синглетами. при 532 и 388 рртя (внутренняя метка тетраметилсилан). П р и м ер 13. Натрий-6oi.-метил-6у -феноксиацетамидопеницилланат А. Бензил-6ой-йодометил-6 -феноксиацетамидопеницилланатИспользуя методику, соответствунвдую описанной в примере 12А, 83 мг бeнзил-6 ; -йодметил-6 р - (4-Нитробензилиденамино) пеницилланата превращают в бензил-6 oi.-йодметйл-б jf -феноксиацетамидопеницилланат, выход которого составляет, 54 мг. На спектре.ПМР полученного продукта.(в дейтерохлороформе) имеются пики в Области 443-401 Рц (комплекс 11Н,главные пики в област.и- 435 и 414 ГЦ, 322 (1Н);, 307 (2ЙГ, 2.68 (2Я) , 265 (1П), 258, 248, 229, 218 (2Н) , и 82 (6Н) Гц. Б. Натрий-6сх -метил-буЗ-феноксиацетамидопеницилланатЁосстановление бензил-боС-йОдметил-бу5 -феноксиацетамидопенициллана та водородом в присутствии палладия на активированном угле приводит к сопутствующему восстановлению йодметильной. группы в метильную группу. Поэто;му гидроге1 олиз проводят в присутст вии двух эквивалентов бикарбоната , который используется для нейтрализации кислот, образующихся в результате восстановления. Удаление йодис- того натрия из лиофилизата осуществляют путем превращения натровой соли соответствующей пенициллановой кислоты в свободную кислоту. Для этого лиофилизат обрабатывают в концентрированном водном растворе при разбавленной фосфорной кислотой и быстро экстрагируют свободнуй пенициллановую кислоту .холодным этилацетатом. Выход свободной кислоты составляет по этой методике 60-80%. Свободная пенициллановая кислота дает на спектре ПМР (в дейтерохлорофЬрме) пики в области 448-404 Гц (комплекс 10-11Н с главным пиком в Области-419 Гц), 321 Гц (1Н), 278 Гц (интенсивный пик ЕцО затемняющий 0. OCHjCO) ;: 251 (1Н) , 104 (3H)j И 86 Гц (6Н).Положение пиков иа спектре выражается в герцаХ: от пика тетраметилсилана. . . . Обработка свободкой пенициллановой кислоты одним эквивалентсм водного раствора бикарбоната Натрия и последующая лиофилизация дает с количественным выходом соответствующую натровую .соль пенициллановой кислоты, которая обнаруживает на спектре ПНР (BUgO) пики в области 450-408 (комплекс ЮН, главный пик в области 421 Гц), 321 (1Н), 278 .(интенсивный пик воды, затемняющий 0 ), 251 (1Н), 104 (ЗН и 86 (6Н), которые выражаются в герц х по отношению к пику тетраметил силана.
Бензил-б ОС -йодметил-б/& - (4-нитробензилиденамино)пеницилланат, идпользуемый в качестве исходного соединения в разделе А описываемой.методики, получают следукядим образом.
К раствору 591 мг йодистого лития в 4,3 мл диметилсульфоксида, высушенного над молекулярными ситами, прибавляют при перемешивании 300 мг бензолового эфира боб-(4-нитробензолсульфонилоксиметил)-б /4 -(4-нитробензилиденi амино)-пенициллановой кислоты. Реакционный раствор перемешивают в течение 48 ч при комнатной температуре и после соответствующей, обработки и очистки, обычной для азидометильных производных этого ряда, получают 189 мг бензилового эфира -Йодметил-б З |-Т4-нитробензилиденамидо)-пенициллановой кислоты в виде вспененной массы желтого цвета. Для ИК-спектра полученного соединения характерно наличие полос поглощения /3 -лактама (в области 5,64 мкм) и сложного эфира (5,71 мкм). На спектре ПМР указанного продукта (в дёйтерохлороформе) имеются пики в области 523 Гц (1Н), 502 Гц, 493, 473; 464 (4Н), 444 (5Н), 329 (1Н), 264 (1Н) 226 (2Н), 91 (ЗН) и 85 Гц (ЗН). Положение пиков йа спектре ПМР выражается в герцах от пика тетраметилсилана.
П р и м е р 14. Получение натриевой соли б-ос-хлорметил-6-/3 -феноксиацетамидопенициллановой кислоты
А. Бензиловый эфир 6с)6-хлорметил-буЗ -феноксиацетамидопенициллановой Кислоты. По методике, описанной в приведенном вышепримере 12А, бензил-боб-хлорметил-б Р-(4-нитробензилиденамино)-пеницилланат (58 мг) превращают в бензил-6оС-хлорметил-6уЗ -фенокси-ацетамидопеницилланат, выход которого составляет 85 мг. Па спектре ПМР полученного продукта (в дёйтерохлороформе) имеются пики: 437-397 Гц (комплеке НИ, главные пики в области 430 и 408 Гц), 326 (1Н), 303 (2Н), 265 (2П 262 (1Н), 250, 243, 231 (2Н), 82 (ЗН) И 80 (ЗН). Положение пиков на спектре ПМР выражаются в герцах от пика тетраметилсилана.
В./Натриевая соль бсгС-хлорметил-б/ -феноксиацетамидопенициллановой кислоты
Восстановление бензилового эфира St -хлорметил-б у5 -феноксиацетамидопенициллановой кислоты водородом в присутствии палладия на активированном угле, осуществляемое в соответствии с методикой, описанной в примере 10Б, приводит к получению желаемой натриевой соли б ос-хлорметил-6/3-феноксиацетамидопенициллановой кислоты с почти количественным выходом. На спектре ПМР полученного соединения, снятом в в присутствии тетраметилсилана В качестве внутренней метки, имеются пики в области 448-406 Гц (комплекс ЮН; главный пик соответствует 419 Гц 32а Гц (1Н), 280, 252 (1Н), 249 (2Н) , 87 (ЗН) и 85 Гц (ЗН) .
Бензиловый эфир. боС-хлорметил-6/3-(4-нитробензилиденамино)-пенициллановой кислоты, испоЛЪзуемый в качестве исходного соединения в разделе А описываемой в данном примере методики, получают следующим образом.
К свежеприготовленному 1М раствору хлористого лития в диметилсульфоксиле, высушенном с помощью молекулярных сит, прибавляют бензил-б ею-(4-|1итробензолсульфонилоксиметил)-б /5-(4-нитробензилиденамино)пениЦилланат из расчета 50 мг бензилпеницилланата на 0,5 мл раствора. После вьадержки реакционной смеси при комнатной температуре в течение 17 ч, ее обработки с целью вьщеления продукта реакции (процедура выделения аналогична описанным в предыдущих примерах) получают 25 мг бензил-6сэ6-хлорметил-6/5- (4-нитробензилиденамино)-пеницилланата. Для спектра ПМР ( CD С22) характерно наличие следующих пиков: .513 Гц (1Н), 488, 480, 469, 461 (4Н), 433 (5Н), 325 (1Н), 306 (2Н), 259 (1Н), 238 (2Н), 89 (ЗН) и 83 (ЗН) . Положение пиков на спектре выражается в герцах от пика тетраметилсилана .
П р и м е р 15. Натриевая соль 6ot-фторметил-6 /5 .-фенок.сиацетамидопенициллановой кислоты
А. Бензил-бе ;-фторметил-6 /J-феноксиацетамидопеницилланат .
В соответствии с только что описанной методикой исходный бензиловый эфир боС-фторметил-6 (4-нитробензилиденамино)пенициллановой кислоты превращают в соединение, название которого указано в подзаголовке. На ИК-спектре этого соединения (в хлороформе) присутствуют пики в области 5,60 мкм ((Ь-лактам), 5,72 мкм (сложноэфирный карбонил) и 5,91 мкм (амидный карбонил). Для спектра ПМР этого продукта (в дёйтерохлороформе) характерно присутствие ряда пиков, соответствующих 448-392 Гц (комплекс 11Н; главные пики в области 439 и 418 Гц), 337 Гц (1Н), 318, 316 (1Н), 310 (2Н), 270 (4Н), 86 (ЗН) и 82 Гц (ЗН), причем отсчет при определении положения пнкгч на спектре производится от пика тетраметилсилана, используемого в качест ве внутренней метки, Б. Натриевая соль бос-фторметил.-6-/J -Феноксиацетамидопенициллановой кислоты Восстановление бензилового эфира 6о6-Фторметил-6 уЗ Феноксиацеталшдо-, ,пенициллановой кислоты водородом в пр сутствии палладия на активированном угле, осуществляемое в соответствии с обычной методикой гидрирования, опи санной в предьадущих примерах, приводит к получению целевого соединения с практически количественным выходом. Для спектра ПМР этого соединения) О характерно наличие следующих пиков: 440-396 (комплекс ЮН; главный пик соответствует 412 Гц), 326 (1Н), 309 -41Н), 275 (HOD-пик; затемняет 264 {1Н),.250 (1Н) и 88 (5Н), положение которых на спектре выражается в герцах от пика тетраметилсилана. Бензил-б.оС.-фторметил-6/Э - (4-нитрог бензилиденамино)-пеницилланат, исполь зуемый в качестве исходного вещества в разделе А данного примера, получают следующим образом, / Раствор 444.мг высушенного фтористого тетраэтиламмОния . (E-t N Р ) в 5 м сухого ацетонйтррла йр:ибавляют к 855 бензилового эфира бй(:;-трифторметансул фонилоксиметил-6 /J-(4-нитробензилиден амино)-пенициллановой кислоты. Через 2-3 ч эту смесьподвергают обработке с целью выделения продукта реакции, причем методика выделения не отличает ся от аналогичных процедур, описанных в предыдущих примерах. Выход продукта составляет 134 мг. На ИК-спектре (в CHCPj) имеются полосы поглощения/3-ла тама (5,65мкм) и сложного эфира (5,72 мкм). Спектр ПМР (в дейтерохлороформе) состоит из пиков, соответствующих: 524 Гц (1Н), 496, 488, 477, 468 (4Н), 439 (5Н), 331 (1Н), 264 (1Н 90 (ЗН) И 84 (ЗН) Гц, причем отсчет производится от пика тетраметилсилана, вводимого в анализируемый раствор в качестве внутренней метки. Бензиловый эфир боб - (трифторметансульфонилоксиметил)-6/3 -(4-нитробензилиденамино)-пенициллановой кислоты получают- путем взаимодействия бензил 6/5 - (4-нитробензилиденамино) -б сС-рк- . симетилпеницилланата с трифторметансульфониевым ангидридом. -На ИК-спектре продукта этой реакции (в СНСН) присутствуют полосы поглощения ft -лак тама (5г61 мкм) и сложноэфирной группы (5,71 мкм) . Спектр ПМР (в Ct)Cg3 ) включает, пики::: 525 Гц (1Н), 500, 482, 480, 471 {4Н;), 441 Л5И);-331 (1Н), 311 (2Н), 295 (2Н), 265- (1Н), 90 (ЗН) и 84 (ЗН), причем отсчет положения пиков в герцах производится от пика тетраметилсилана, Пример 16. Натриевая соль боб-метил-б jb-(2-фенилацетамидо)пенициллановой кислоты и, Бензил-6сзС-метил-6/}-(2-фенилацетамидо) пеницилланат Бензиловый эфир боС-метил-6/3-аминопенициллановой кислоты (3 г) растворяют в 80 мл метиленхлорида и полученный раствор обрабатывают сначала 3 мл пиридина, а затем раствором 1,16 г фенилацетилхлорида в 20 мл метиленхлорида, который перемешивают в течение 3 мин. Еще через 3 мин растворитель упаривают в вакууме и остаток разбавляют 100 мл бензола, после чего раствор последовательно промывают водой, водным раствором фосфатного буфера с рН 2, снова водой и водным раствором фосфатного буфера.с рН 8. Органический слой сушат, сульфатом магния, отфильтровывают и фй;1Ьт1ра упаривают. В остатке получают 3-. гсьфого продукта (выход 74% от теории), Хроматография на 120 г силикагеля с использованием в качестве элюента хлороформа дает 1,0 г кристаллического бензил-боб-метил-6-у5 -(2-фенилацетамидо) пеницилланата, который перекристаллизовывают из смеси бензола с циклогексаном, Т,пл. 143-145 С, Спектр ПМР: 1,25; 1, 30 5 (гем.диметил) ; 1,7S (6 X-метил); 3,5 S (CHjCO) ; 4, 3 в (3-Н) ; 5,1 S (OCHjj 0 ) ; 5,3 S (5а;-Н) ; 6,0 S (WH); 7,Г; 7,2 8 (20S) . ИК-спектр: Н (2,9 мкм), /5 -лакт 1М (5,61 мкм), сложноэфирный карбонил (5,71.мкм), амидный карбонил (5,95 мкм), Масс-спектрг 8, 250, 248, 189,174. Б, бой -Метил-6 1Ь (2)-фенилацетамидо)пеницилланат натрия/ Бензил-6об-метил-б /&-(2-фенилацетамидо) пеницилланат .(500 мг) гидрируют под давлением 40 фунтов/дюйм в течение 1 ч в 50 мл метанола и 12 мл воды в присутствии 500.мг 10%-ного Pd/C и 96 мг бикарбоната натрия. Смесь фидьтpyvyf и лиЬфилизУют получая 404 мг . .би; -метил-б р-(2-фенилацетамидо)пеницилланата натрия. БенЗил-6 ос-метил-бр -аминопеницилланат, используемый .в качестве исходно.го соединения в разделе Л данного примера, пблучаю.т следующим образом, д: 110 мг бензиловогр эфира .6-(liapaнитробензилиденамино);пенициллановой кислоты растворяют в 4 сухРготет.рагидрофурана, К э.трму ЬаствРру при (-78)°С прибавляют: в атмосфере азота 0/109 мл .2, ДМ раствора финиллити я, в результате чего образуется бензил боб-литий-б/5-(паранитробёнзилиденамино)пеницилланат, К этому соединению прибавляют при -78с в атмосфере азота раствор а,2 мл-йодистого метила в 5 мл сухого диметилформамида, Смесь церемешивают в течение 5 мин при (-78)с, а затем оставляют нагреват ься до комнатной температуры на 20-. 30 мин. После этого к реакционной сме си прибавляют 50 мл бензола и раствор промьшают 6 раз водой, причем вто рую промывку осуществляют водой, подкисленной до рН 2, а для пятой промывки используют В9ДНЫЙ фосфатный буфер, имеющий рП 8. Далее раствор сушат сульфатом магния, затем отфильт рбвывают и фильтрат упаривают в вакууме, получая в итоге 130 мг бензил-бй -метил-6 Ь - (паранитробензилиден мино)пеницилланата. . Ик-спектр: /3 -лактамный и сложноэфирный карбонилы в области 5,4 и 5,7 мкм соответственно. Выделенное соединение (130 мг) обрабатывают 50 мг тонко растертого 2,4-динитрофенилгидразина и 48 мг монсгидрата паратолуолсульфокислоты в МП этанола ;в течение. 30 МИ1. Затем реакционную смесь отфильтровывают, осадок на фильтре промывают несколько раз абсолютным этанолом, фильтрат упа ривают в вакууме досуха и остаток быстро проливают небольшим количество диэтилового эфира. После этого остаток обрабатывают водным раствором и дважды экстрагируют диэтиловым эфиром. Эфирный экстракт высушиBcUOT сульфатом магния, отфильтровывают и фильтрат упаривают,. получая 75 м сырого продукта. Препаративная хроматография в тонком слое cиликaгeля, . при элюировании смесью хлороформ-этия ацетат (4:1) дает чистый бензил боб-метил-бу5-аминопеницилланат 4(19,5 мг ИК-спеКтр: уЗ -лактамный и слОжнрэфирный карбон.илы/в области 5,61 и 5,71 м соответственно. Масс-спектрs сильный 320, 292.,,-;. :. - v-: .. о :- П РИМ ер, 17 .. Натриевая соль боб-тридейтерометиЛ-7 ft - (2-фенилацета мида) пенициллановой кислоты : ;,. Целевое соединение гтолучают путем взаимодействия бензил-.бсзб-литий-6 ft - (паранцтробензилиденаминр)пён.йцилланата .с ридейтерометилйодидоМ с целью образования бензил-6оС-тридейтерометил-б р-(паранитробензилиденамиНо)пеницилланата. Доследующие стадии превращения этого бензилового эфира в целевой продукт осуществляют в-соот-: ветствии с методикой, описанной в примере-16 :::. .. - ; физические характеристики полученных продуктов совпадают с характеристиками аналогичных б-метильных соединений ИЗ примера б:эа исключением того, что группу СТЭ не видно на спектре ПМР, а для масс-спектров полученных дейтеропроизводных характерно уве личение массы соответстэукяцих молекулярных дионов на 3 единицы. П р JI м е р 18. Бенэил-б сС-(1-оксиэтил)-6 ft-феноксиацетамидопеницилланатК суспензии 1,04 г бензил-боС-(1-оксиэтил)-б ft-аминопеницилланата (тозилатной его соли) в 12 мл метиленхлорида прибавляют 1,45 г К-НРО в 12 мл воды. Полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин, а затем добавляют раствор 725 мг дикалийгидрофосфата в 4 мл воды н реакционную смесь охлаждают до 5с. К охлажденному раствору прибавляют 0,3 мл феноксиацетилхлорида в 4 мл метиленхлорида и смесь оставляют перемешиваться при на 15 мин. Затем реакцию прерывают путем введения в реакционную смесь 0,3 мл пиридина. Далее реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Органическую фазу отделяют, сушат и упаривают, получая в остатке красное маслообразное вещество, представляющее собой сырой бензил-бсх;- (1-оксиэтил)-6 уЗ-феноксиацетмидопеницилланат. Этот продукт хроматографнруют на колонке с силНкагелем, заполненной в среде бензола. Продукт элюируют в системе этилацетатбензол, постепенно увеличивая содержание этилацетата в элюенте. Целевой продукт элюируют 50%-ным раствором этилацетата в бензоле. Элюат упаривают и пол/чают 738 мг бензил-боб-(2-оксиэтил)-6ft -феноксиацетамидопеницилланата в виде смолообразного вещества желтого цвета.. Спектр ПМР выделенного соединения соответствует его строению. Пример :19 , А. Бензил-бой-бензилоксикарбонил-б р-феноксиацетамидо-пеницилланат К суспензии 600 мг бензил-боб-бен.эилоксикарбонил-б ft -тозиламинореницилланата в 4,5 мл метиленхлорида прибавляют раствор 350 мг дикалийфосфата в 4,5 мл воды и полученную реакционную смесь энергично перемешивают в течение 15 мин. Затем к этой реакционной смеси прибавляют раствор 174 мг дикалИйфосфата в 2 мл воды и смесь охлаждают до 5°С. К охлажденному раствору прибавляют раствор 159 мкл феноксиацетилхлорида в ;i мл метиленхлорида. Смесь перемешивают при в течение 15 мин, после чего прибавляют к ней 150 мкл пиридина и оставляют нагреваться до комнатной температуры. Органическую фазу отделяют, сушат и после упаривания получают 563 мг бенз1сл-6с)6-бензилоксикарбонил-6 /J-феноксиацетамидопеницилланата в виде оранжевого масла. Полученный таким образом сырой продукт очищают хроматографией на силикагелв с использова:нием в качестве элюента системы этилацеТат-бензол с 10%-ным содержанием этилацетата. В результате выделяют 173 мг чистого продукта, чистота которого помимо данных тонкослойной хроматографии, бьша псдтзерждена результатами ИК- н ПМР-спек -роскопии. ; Б. Динатриевая соль брС-карбокси-6 (Ь -феноксиацетамидопенициллановой кислоты К раствору 150 мг бензил 6о6-бен зилоксикарбонил 6 р-феноксиацетамидопеницилланата в 2 мл метилового спи та прибавляют 150 мг палладия на акти вированном угле и 45 мг бикарбоната натрия в 1 мл воды. Полученную реакционную смесь встряхивают при комнат, ной температуре.-в /течение 3-4 ,ч при давлении водорода -.40 фунтов/дюйм .Реакционный раствор отфилггтровывают и упаривают досуха, получая .-.10,8, мг динат рий-бо -карбокси-б у5-фё;нрв:р а1Детами яопеницилланата. .;:. При м е р 20. Натрий-6ой-{метоксикарбонил)-б/5.-феноксйадетамидопеницилланатA.Бензил-бсх;- (метоксикарбонил)б й-феноксиадетамидопеницилланат К раствору 5,2 г бензил-бо -{меток сикарбонил)-буЭ -тозиламинопеницилланата в 45 мл метиленхлорида прибавл; ют раствор 3,86 г в 45 мл воды Полученную реакционную смесь переме шивают при комнатной температуре в течение 15 мин, затем охлаждают до и добавляют еще 1,92 г дикалийфосфата в 22,4 мл воды. После этого к реакционной смеси в течение 14 мин прибавляют по каплям раствор, 1,74 мл феноксиацетилхлорида в 22 мл метиленхлорида. К образовавшейся реакционной смеси добавляют затем 1,5 мл пиридина органический слой отделяют, сушат и упаривают, получая в остатке 5,0 г целевого бензил-бог - (метоксикарбонил) -&jb -феноксиацетамидопеницилланата в виде оранжевого вязкого масла. 4,0 г этого прод5Т та хроматографируют на (и ликагеле, используя в качестве элюента 20%-ный раствор этилацетат.а в бензоле, получая 362 мл чистого вещества B.Натрий-боб-(метоксикарбонил)-б/ -фенокснацетамидопеници/щанат К раствору 360 мгбензил-боб -(метоксикарбонил) -буЗ -Феноксиацетамидопеницилланата . в 4 мя-: метанола прибавл ют 360 мг палладия на..-.акт.ивированном угле, 61Мг бикар6рна$а1.на:Трия И: 2 мл воды. Реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре и /давлении водорода 40 фунтов/дюйм в, течение 1,5 ч. Восстановленный продукт.-отфильтровывают и. промываю.т водой. Филь рат упаривают досуха, получая 160 мг натрий-6с6- (метоксикарбонил)-бД-феноксиацетамидопеницилланата в виде вспененной массы оранжевого цвета. Этот продукт экстрагируют этилацетатом и промыват водой. Водную фазу упа ривают.досуха. Остаток после упаривания весом 133 мг повторно растворяют в меаЧШенхлориде и обрабатывают водным растворомбикарбоната натрия, содержащим 133 мг МаНСО. Водньай сцоЪ отделяют, подкисляют кислым фосфатом калия и разбавленной: соляной кислотой до рП 3,а затем экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат и упаривают досуха. В остатке получают 53 мг свободной пенициллановой кислоты в виде желтого вспененного вещества. Исследование этого продукта методом тонкослойной хроматографии,а также спектр ПМР указывают на то, что полученный продукт имеет приписываемое ему строение, П р и м е р 21. Натрий-боб-диметиламинометил-б у2 -феноксиацетамидопеницилланат . A.Бензиловый эфир-боб-диметиламинометил-б-ф ей ок си ац ет амидопенидилланов ой кислоты 210 мг бензил-боб-диметиламинометил-б- (4-нитробензилиденамино)пеницилланата превращают в соответствующий тозилат (258 мг по методике, опис&нной выше, к полученной тозилатной соли прибавляют при интенсивном перемеи1иваг1ии и охла кдении до 96 мг фенокснацетилхлорида в 3,5 мл метиленхлорида и 220 мг дикалийгидрофосфата в 3,5 мл воды. Реакционную смесь перёмепшвают при в течение 20 мин, после чего добавляют 15,5 мкм пиридина и перемешивание продолжают еще в течение 5 мин. Затем фазы разделяют и экстрагируют ВОДНЫЙ слой метиленхлоридом и эфиром. Объединенные органичес- . кие фазы промызг :г водой, сушат сульфатом магнкя и концентрируют при пониженном давлении. В остатке получают 250 мг сырого бензил-бс6-диметиламинометил-буЗ -феноксиацетамидопенчцилла;ната, который очищают препаративной тонкослойной хроматографией на-трех пластинках размером 8x8 дюйма; с силикагелем, имеющим размер частиц-Порядка 1000 мкм. В качестве .элюента.. ;используют систему зтилацетат-бенэол. В итоге выделяют 45 .мгхромат ографйчески чистого продукта/- на. ,ИКгспектре кото ога (в CHCPj). .имеются полосы поглощейия NH . (2,,92 мкм),,|5 -ллактамя1 (;5,61 мкм), сложноэфирного,;Ка:рб;онила ;(5,71 мкм) и амидной.ФуПпм.: 5у-92 мкм) .Спектр ПМР этого соединения (в дейтеррхдорофор-, ме) характер изуется наличием пиков S области 449-405 Гц (комплекс 11Н; главные пики соответствуют ,440 и 418 Гц, 328 Гц ОН) 311 (2Н) , 260 (ЗН), 192 (2Н), 138 (бН), 91 (ЗН) и 84 Гц (ЗН), причем положение пиков указывается в герцах от пйка.тетраметилсил-аиа. B.Натриевая соль 6ой-днметиламино-г метил-бр -феноксиацетамидопенициллановой кислоты
Бен3иловый эфир расщепляют гидрогенолизок в воднометанольном растворе содержащем один эквивалент бикарбоиана натрия, путем встря ивания этого раствора в сосуде для гидрирования с равньм по весу количеством паляадиевого катализатора 10%-ного палладия на активированием угле при комнатно температуре и. давлении водорода 40 фунтов/дюйм г. П|щ И1 овЭНие продолжают в течение 1 «, .пос,ве чего катализатор отфйльтрсм ра ют а (фильтрат .лиоФилизуют. в рфаулёарвит с прчтй количественным BUXI%QC M целевой продукт - натриейаяс с Б: .боб-диметиламинометил-6 - Фенрксиац амидопенициллановой кислоты. Строение продукта подтверждается данными ИК- и ПМР-спектрами.
Приме р,22. б- Эфеноксиацета1Мидо-бо -метилтиопенициллановая кис лота
А. Бензил-бой-метилтио-бЛ-феноксиацетамидопеницилланат
Сырой бензил-б« -метилтио-б-(4-нит робензилиденамино пеницнлланат, полученный из 500 мг бензил-б-(4-нитрОбензилиденамино)пеницилланата, прибавляют, предварительно растворив в 1-2 мл хлороформа, к смеси тонко измельченного 2,4-динитрофенилгиддаазина (232 мг) и 223 мг моногидрата паратолуоЛсульфокислоты, которую перемешивают в течение $0 мин в 2 мл этанола. После перемешивания реакционной смеси еще в течение 30 мИн твердый продукт отфильтровывают, осадок на фильтре промывают несколько раз небольшими порциями этанола, и объединенный фильтрат концентрируют при пониженном остаточном давлении, поддерживая температуру в процессе упаривания на уровне комнатной или несколько Ниже. Полученное масло размешивают в 5 мл метиленхлорида, добавляют 5 мл воды, бОб мг дикалийгидрофосфата и при энергичном перемешивании и охлажд НИИ до О С: прибавляют в течение 30 ми 280 мг Ф ен6к 2йаЦетилхлорида. После этого к реак1|йрнной .Меси добавляют две к-$пл)1{1ири,.Д рем &Ц вание продоля й1р еще за /течение 10 мин. После раэде 1Йййя ,ф.)ган №ческую фазу . несколькр )т;:.в.сщой,:. сушат сульфатом/М1ад нйя; 5уп 11ВАЮ Т. Полученный продукт очищают Пр)ешад1ативной тонкослойной хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента 5%ный раствор этилацетата в хлороформе. Очищенный продукт (79 мг) обнаружи- , i вает на спектре ПМР (в .дейтерохлоро-; форме) ряд пиков в области 443-405 Гц (ЮН мультиплет с главными пикги и в области 437 и 416 Гц); 333 (1«), 309 (2Н), 270 (2Н), 265 (2Н), 134 (ЗН), 85 (ЗН) и 80 Гц (ЭН), причем отсчет положения пиков в герцах производитЕЯ от пика тетраметилсилана. На ИКспектре полученного соединения, снятом для пленки вещества, приготовленной упариванием хлороформенного раст/вора, присутствуют полосы поглощения (3,01 мкм), уЭ -лактамного карбонила (5,60 мкм), сложноэфирного карбонила (5,71 мкм) и карбонила амидной группы (5,90 мкм).
В. б/5-Феноксиацетамидо-бо6-метилтиопенициляановая кислота .Раствор 34,9 гбензнлового эфира б -метилфио-г.|6 у феяоксиацетамидопе; нициллановой гийнота в 1 мл метанола обрабатывают водой до помутнения, затем прибавляют 5,9 мг бикарбоната натрия и 100 мг 10%-ного палладия на активированном угле, после чего реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре в атмосфере водорода под давлением 40 фунтов/дюйм в течение 1ч. Затем смесь отфильтровывают, а фильтрат упаривают при пониженном остаточном давлений. Остаток обрабатыва от смесью метиленхлорида и воды (для извлечения непрореагировавшего исходного эфира) и водную фазу лиофилизуют. Остаток растворяют примерно в 0,8 мл воды и после охлаждения оаствора до прибавляют к небольшое количество хлористого натрия и тут же обрабатывают раствор разбавле1П1ой фосфорной кислотой, немедлено производя экстракцию водной системы этилацетатом. После многократной промывки водной фазы этилацетатом экстракты объединяют, сушат и упарнвают в вакууме до образования смолообразной массы весом 2,3 мг. Этот продукт растворяют в небольшом количестве хлороформа на спектрометре 100 МГц :характеризуется наличием пиков в области 742, 734, 726, 725 (5П), 562 (Itl) , 457 (211) , 446 (1П) , 229 (ЗП) , 152 (611) Гц. (отсчет положения пиков в герцах производится от пика тетраметилсилана).
При мер 23. Патрий-бой-метил-6 - (2-фенилацетамидо)пеницилланат
А. Бензил-бой-метнл-буЬ-(2-фенилацетамидо) пеницилланат
К раствору 3 г бензилового эфира 6о6-метил-6 у5-аминопенициллановой кнслоты в.80.мл метиленхлррида прибавляю сначала 3 мл .пиридинаf а затем на протяжении 3 мин i,16 г фенилацетилхлорида -В 20 МП метиленхлорида. После ;Этого растворитель ОТГОНЯЮТ:в вакууме остаток разбавляют 100 мл бензола и бензольный раствор промывают после- (довательно водой, водным раствором фосфатного буфера с рИ 2, водой, водным раствором фосфатного буфера с рН 8 и снова водой. После высушивания сульфатом магния раствор упаривают и получают 3 г сырого бензил-боС метил-6/3- (2-фенилацетамидо) пеницил
