Способ получения сложных эфиров @ -аминопенициллинов или их кислотно-аддитивных солей Советский патент 1985 года по МПК C07D499/68 A61K31/43 A61K31/431 A61P31/04 C07D499/70 

17,09.70. при R-J - метил и Л - аминогруппа или азидогруппа; 20,11.70,

R, - Cj

- Сф - алкил и Л - аминопригруппа.

Способ получений сложных, эфиров вб -амннопеницнллинов об1цей формулы (1) S 3 , - 1 Ri-cH-coim- СООЯу NH2 -фенил, ьксифенил, фторфенил, где R, фурил или тиенил; . «2 -группа формулы -СН-О-СО-ЕЗ СНз или -СН-0 СОО-Яз CHj где Rj - С(-С4-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, отличаю щийся тем, что сложный эфир 6-аминопенициллинойой кислО|ТЫ формулы (II) н тг СНз , -где R, имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы (III) Rt CH-COD А . где R{ имеет указанные значения; А - аминогруппа, азидогруппа или группа формулы нин-с сн-е оснз Iи СНз О или -NH-S и у - атом галогена или группа формулы :л ©Ф -ONa или -О 1Ш2(СсН11)2 : 90 в среде этилацетата, диметилформами Э да или хлороформа в качестве растворителя при температуре от до комнатной с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя сА-аминогруппы или в случае, когда А - азидогруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли. Приоритетно признакам:

I

Изобретение относится к способу получения новых антибиотиков пенициллинового ряда, а именно сложньк эфиров «i -аминопенициллйнов или их кислотно-аддитивных солей, которые могут найти применение в медицине п качестве лекарственных веществ,

Известен способ получения биологически активных (X.-аминопенициллйнов или их кислотно-аддитивньк солей ацилированием 6-аминопенициллановой кислоты реакционноспособным производным соответствующей ее -амино-, oL-замещенной амино- или ой -азидокарбоновой кислоты в среде инертного органического растворителя при температуре от -50 до 40°С с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя соС -аминогруппы или в случае использования в качестве ацилирующего агента оЬ -азидопроизводного переводом об -аэйдогруппы п об -аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли ,

Известные с(. -аминопешщиллины обладают широким спектром антибактериального действия 2 , однако остается желательным повьщ1ение всасываемости пенициллиновых антибиотиков при оральном введении, распределения в тканях организма, метаболических свойств и скорости удаления.

Цель изобретения - получение новых oi -аминопенициллйнов, которые обладают улучшенными свойствами,

Цель достигается основанным на известной реакции N-ацилирования 6-аминопенициллиновых кислот способом получения сложных эфиров об -аминопенициллинов общей формулы

S .СНз

т f С«з .

CH-CONHN- - COOR «

ш

2 0

R

- фенил, окгифенил, фторфеЧнил, фурил или тиенил;

группа формулы

-СН-О-СО-РЗ сн,

или «

-СН-О-СОО-Кз

f

снз

где RJ - C(-C f-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, которьй заключается в том, что сложный эфир 6-аминопенициллановой кислоты формулы

СНз

HoN СНз

-ъг

COOR

0

где RJИмeeт указанные значения, подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы

RI-CH-COO -,

А

где R имеет указанные значения; А - аминогруппа, азидогруппа или группа формулы

-1Ю-С СН-С-ОСН,

I я

СНз о

ли

-ш-$

ко,

35

и у - атом галогена или группа формулы

40 -ON6 -О lH2(CgHn)2

в среде этилацетата, диметилформамида или хлороформа в качестве растворителя при температуре от до комнатйой с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя с ОС -аминогруппы или в случае, когда А-аэидргруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого пролукта } свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли. Соединения общей формулы (I) хоро шо всасываются при оральном применении и дают более высокую концентрацию в крови. Сложные эфиры подвергаются гидролизу в водной среде, но такой гидролиз происходит интенсивнее при подвергании их влиянию гидро литических ферментов, например, присутствующих в сыворотке крови или других жидкостях организма человека. Это свойство сложнь1х эфиров имеет очень большое значение, поскольку оно приводит к быстрому освобождению противобактерийных аминопенициллинов из сложных эфиров при всасывании из кишечного тракта или вводимьгх другим образом в поток крови или в тканевые жидкости. Соединения формулы (I) хорошо перенос.ятся организмом и предпочтительно применяются перорально либо в свободном виде, либо в виде их солей, их можно смешивать с твердыми носителями или с вспомогательными ве ществами, или с обоими типами указан ных веществ. В таких препаратах соот ношение между лекарственным веществом и носителями или вспомогательными веществами можно варьировать от 1 до 95%. Препараты могут быть превращены, например, в таблетки, пилюли или драже, они могут быть заключены в емкости, например в капсулы, а при наличии смелей налиты в бутыли. Можно применять фармацевтически приемлемые органические или неорганически твердые или жидкие носители, подходя щие для перорального, парентерального или местного применения для при готовления препаратов. П 3йходящими для приготовления препаратов из соединений согласно изобретению являются желатин, лактоза, крахмал, стаарат магния, тальк, жиры и масла растительного или животного проиехож дения, натуральный каучук и полиэтиленгликоль. Предпочтительной солью сложных эфиров является гидрохлорид, но можно применять также соли с другими неограническими или органическими кислотами. Кроме того, препара ты могут содержать другие фармакологически активные компоненты, подходяшие для применения вместе с указан ными сложными эфирами при лечении инфекционных заболеваний, например другими подходящими антибиотика Для лечения бактериальных инфекционных заболеваний у людей соединения согласно изобретению-назначают, например, в количестве, соответствующем 5-200 мг/кг/день, предпочтительно в интервалах 10 - 100 мг/кг тельно в интервалах 10 - 100 мг/кг/день при разделенных дозах, например два, три или четыре раза в день. Их назначают в дозах, содержащих, например, 175, 350, 500 и 1000 мг соединения. Пример 1. 1 -Ацетоксиэтил- 6- ( азидофенилацетамидо) пеницилланат, а)1 -Ацетоксиэтил-6-(В-о6-азидофенилацетамидо)пеницилланат (58%, 2,8 г), растворенный в этилацетате (40 мл) , обрабатывают 0,2 М мононатрийфосфатом (40 мл) , подкисляют до рН 2,2 2 М раствором соляной кислоты и гидрируют над палладием на угле (катализатор) при условиях окружающей среды в течение 2 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этилацетатом и буфером. Органическую фазу соединенных фильтратов отделяют и экстрагируют водой при рН 2,1. Соединенные кислые водные фазы промывают эфиром, отделяют слой этилацетата и нейтрализуют добавлением 2 н.растворов гидроокиси натрия при перемешивании. Водную фазу отделяют и снова экстрагируют этилацетатом. Соединенные этилацетатные водные растворы промьгеают рассолом и водой и экстрагируют дважды водой при рН 2,5 добавлением 2 М раствора соляной кислоты.. Соединенные кислый водные экстракты промывают эфиром и концентрируют под вакуумом при 25°С, что приводит к образованию маслянистого остатка, который растворяют в изопропаноле и упаривают под вакуумом. Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-(П-ой аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,1 г) в виде слегка окрашенного порошка чистотой 100% (гидроксиламиновая проба). Продукт задерживает рост микроорганизмов вида Ktaphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,32 мг/мл, а Escherihia coli и Proteus mirabilis - при 50 мг/мл, б)Азидопроизводное сложного эфира В этилацетате (800 мл) гидрируют в

условиях окружающей среды над катализаторам, содержащим палладий (5%) на угле (25 г). Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этилацетаTOMi Соединенные фильтраты экстрагируют водой при рН 2,5 в присутствии соляной кислоты. После лиофилизации водной фазы получают хлоргидрат 1 ацетоксиэтил-6-(П-(у; -аминофенилацетамидо)пеницилланата (110 г). Т.пл, 160 164°С (с разл,), +1§4°С (С 1 CHCJ,); +179,9 (С 1, 50% лзопропанол).

Найдено, %: С 50, 78; Н 5,.49; N 8,76; О 20,22; S 6,58; С1 7,39,

.се

Вычислено, %: ,90; Н 5,55; N 8,90; О 20,34; s6,79; С1 7,51.

Продукт имеет сильное ИК-поглощение при 1780-1744 см , что показывает на наличие уЗ -лактама и карбонильных групп сложного эфира. Найдено, что продукт задерживает рост Staphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг/мл.

Пример 2. 1 -Ацетоксиэтил6-(В-э: -аминофенилацетамидо)пеницилланат.

Суспензиюоб -(о-нитрофенилсульфеиил)-аминофенилацетата дициклогексил аммония (4,9 г 0,01 моль) и хлоргидрата 1 -ацетоксизтил-6-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в хлороформе .(60 мл) перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют дициклогексилкарбодиимид (2,2 г 0,01 моль) и перемешивание продолжают еще 6 ч. Реакционную смесь фильтруют и.промывают водой, разбавленной серной кислотой, 1 н.раст вором бикарбоната натрия и водой, высушивают-и упаривают досуха под вакуумом. Желтый остаток обрабатывают этилацетатом, фильтруют и снова упаривают с образованием остатка, который перекристаллизовывают из смеси этилацетата и петролейного эфира. Получают 1 -ацетоксиэтил-6-(П-«;-(о нитрофенилсульфенил)аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,5 г). Т.пл. 122 5°С.

Продукт имеет сильное ИК-поглощение при 1780-1750 см , что показывает на присутствие -лактама и карбонильных групп сложных эфиров. о-Нитрофенилсульфениламинопроизвоное сложного эфира (1,2 г, 0,02 моль растворяют в 75% диоксана и доводят

рН до 3 добавлением 2 н.раствор;) соляной кислоты. Добавляют йодистый натрий (1,2 г, 0,008 моль), смесь перемешивают и доводят рН смеси до 3 добавлением кислоты. Через 20 мин образующийся йод уменьшают добавлением 2 Н.раствора тиосульфата натрия смесь нейтрализзтот и зкстрагируют этилацетатом после добавления воды. Соединенные органические экстракты промыв-ают водой и экстрагируют водой при добавлении 2 н.раствора соляной кислоты до рН 2. Водную фазу промывают этилацетатом и лиофилизируют с получением хлоргидрата 1 -ацетоксиэтил-6-(В-64-аминофенилацетамидо)пеницилланата (0,15 г). Продукт идентифицируют по методике идентификации продукта, полученного в примере 16, с помощью ИК-спектра.

I

Пример 3. 1-Этоксикарбонилоксиэтил-6-(0- о. -аминофенилацетамидо) пеницилланатг1.

1 -Этоксикарбонилоксиэтиловый эфир 6-(0-Л -азидофенилацетамидо)пенициллановой кислоты (2,5 г), растворенный в этилацетате (40 мл), и 0,4 моль мононатрийфосфата подкисляют до рН 2,2 2 М раствором соляной кислотой кислоты (40 мл), добавляют применяемый в качестве катализатора 10%-ный палладий на угле (4 г и проводят грщрирование npii атмосферном давлении в течение 30 мин. Катализатор отделяют фильтрованием и промывают этилацетатом и буферным раствором. Фильтрат отделяют и органическую фазу экстрагируют водой при рН 2,1. Соединенные подкисленные водные фазы промьгеают эфиром, добавляют этцлацетат и проь.дят нейтрализацию при перемешивании с использованием 2 моль едкого натра. Фазы разделяют и водный раствор снова экстрагируют этилацетатом. Два этилацетатных экстракта соединяют, промывают рассолом и водой и экстратируют водой при рН 2,5 при добавлении 2 моль хлористоводородной кислоты. Соединенные подкисленные воднг 1е экстракты промывают эфиром и концентрируют под вакуумом при . Полутвердый остаток растворяют п изопропаноле, снова концентрируют и еще раз повторяют эту методику. Остаток перемешивают с эфиром л Г1пг:угл1 1т

лоргидрат 1-:)токсикарГн)нилокс1гтилового эфира 6-(D-Q(,-амипофенилцетамидо)пенициллаиопой кислоты (0,8 г) в виде желто-белого пороша с содержанием 86,А% (гидрокси- 5 аминовая проба).

Продукт задерживает рост StaphyloOCCUS aureus, Оксфорд, при концентации 0,13 г/мл Escherihia coll при концентрации 125 мг/мл (раствор испы-. тывался на агаре) и дает сильное поглощение ИК-спектра при 1750 см, то показывает присутствие ft -лактамного кольца и функциональной групы сложного эфира.5

Азидопроизводное сложного эфира (3,2 г) получают обработкой хлоргидрата 1 -зтоксикарбонилоксиэтил-6аминопеницилланата (3,3 г 0,01 моль) в сухом диметилформамиде (50 мл) 20 хлорангидридом с -азидофенилуксусной кислоты (2 г, 0,01 моль) в присутствии триэтиламина (2 г, 0,01 моль). После разбавления реакционной смеси водой выделяют сложный эфир экстрагированием атилацетатом.

Пример 4. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(В-о - амин офе НИЛ ацетамидо)пеницилланат.

а)К суспензии хлоргидрата хлоргид- 30 ринаоб-аминофенилуксусной кислоты

(2,6 г, 0,0125 моль), перемешиваемой в сухом хлороформе (50 мл) в токе сухого азота при охлаждении льдом добавляют бикарбонат натрия (1,1 г, 35 0,0125 моль) и хлоргидрат 1 -этокси-. карбонилоксиэтил-6-аминопвницилланата (3,3 г, 0,01 моль). После перемешивания в течение 90 мин смесь фильтруют и к фильтрату добавляют изопропа- 40 НОЛ (15 мл). После упаривания под вакуумом при комнатной температуре получают маслянистый остаток, который при разбавлении петролейным эфиром образует остаток хлоргидрата 45 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(В- U,аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,5 г). Продукт очищают осаждением из смеси ацетона и петролейного эфира.50

Идентичность продукта устанавливают по его ИК-спектру.

б)N-(1-Метоксикарбонилпропан-2ил)- /-ами11офенилацетат натрия

(2,5 I, 0,0092 моль) и К-метилморфо- 55 ЛИН (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при изобутилхлороформиатом

(1,4 г, 0,01 моль). Через 6 мни по каплям добавляют 1 -этоксикарбопилоксиэтил-6-аминопеницнллпнатп(0,.01 моль) в этилацетате (20 м.ч) при продолжающемся перемегиивании н температуре -15°(;. Через 10 мин посл прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешивание продолжают еще 45 мин. Реакционную CMCCI, промывают водой, 0,5 моль бикарбонйта натрия и снова водой, высушивают и концентрируют под вакуумом до образования маслянистого остатка, который обрабатывают тетрагидрофураном (20 мл) и водой (20 мл). Смесь подкисляют до рН 2,5 добавлением 2 н. раствора соляной кислоты. Через 30 мин большую часть тетрагидрофурана удаляют под вакуумом и подкисленную водную фазу промывают этилацетатом и упаривают. Получают хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(П-о6аминофенилацетамидо)пеницилланат (0,35 г) в виде аморфного твердого вещества, идентифицируемого по его ИК-спектру.

Пример 5.1 -Лцетоксиэтил6-(D-K -амино-м-фторфенилацетамидо)пеницилланат.

Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в сухом диметилформамиде (50 мл) перемешивают на ледяной бане и обрабатывают N,N-димeтилaнилинoм (2,4 г, 0,002 моль), а затем раствором хлорангидрида Л -азидо-м-фторфенилуксусной кислоты (2,1 г, 0,01 мол в сухом эфире (5 мл). После перемешивания в течение 1 ч добавляют воду (100 мл), доводят рН смеси до 6,5 и экстрагируют трижды этилацетатом. Соединенные органические экстракты промывают водой и рассолом высушивают и упаривают под вакуумом. Получают 1 -ацетоксиэтил-6-D-и-азидо-м-фторфенилацетамидо)пеницилланат (1,5 г) в виде маслянистого остатка. Этот продукт дает сильное ИК-поглощение при 2110 и 1780-1750см , указывающее на присутствие азидогруппы, /3-лактамного кольца и карбонильных групп сложных эфиров.

Азидозамещенное сложного эфира (0,7 г) растворяют в 60%-ном этаноле (7 мл) и добавляют к предварительно гидрированному каталитическому никелю Ренея (0,7 г) в 80%-ном этаноле (5 мл). Гидрирование происходит в течение 30 мин в условиях окружающей среды. Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этанолом. Соединенные фильтраты контдентрируют под вакуумом при 35°С до маслянистого остатка, которь1й растворяют в этилацетате. Добавляют воду (20 мл) и доводят рН до 1,6 добавлением 2 и.раствора соляной кислоты к перемешиваемой смеси. Водную фазу отделяют и упаривают под вакуумом при 35°С. Получают хлоргидрат l -ацетоксиэтил-6-(В-сЬ -амино-мфторфенилацетамидо)пеницилланат (0,4 г) в виде кристаллического остатка.

Продукт задерживает рост Staphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,25 г/мл и дает сильное ИК-поглощение при 1760 , свойственное /) -лактаму. .

Пример 6. 1 -Ацетоксиэтил6-(D- -амино-п-оксифенилацетамидо)пеницилланат.

(-) N-(1-Meтoкcикapбoнилпpoпeн2-ил)- -амино-п-оксифенилацетат натрия (2,9 г, 0,01 моль) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при температуре от -15 до -20°С N-метилморфолином (несколько капель), а затем изобутилхлорформиатом (1,4 г, 0,01 моль). Через 5 мин быстро добавляют раствор 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (3 г, 0,01 моль) в этилацетате (20 мл), охлажденном до -15С. После перемешивания в течение 1 ч без наружного охлаждения реакционную смесь промывают водой, 0,5 М раствором бикарбоната калия, высушивают и упаривают под вакуумом при комнатной температуре досуха. Остаток растворяют в смеси (1:1) тетрагидрофурана и воды (50 мл), перемешивают и выдерживают в течение 30 мин при рН 2,5, добавлением 2 М, раствора соляной кислоты. Тетрагидрофуран упаривают под вакуумом, а остающуюся водную фазу промывают этилацетатом, разбавляют изопропанолом и упаривают под вакуумом при комнатной температуре. Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил6-(D-o6 -амино-п-оксифенилацетамидо)пеницилланата (2,3 г) в виде белых кристаллов. Продукт дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, свойственое р -лактаму и карбонильным группам сложных эфиров. Он, как было найдено, ингибирует рост Staphylococcxis aureus, Оксфорд, при конце11траг|,ии 0,25 мг/мл.

Применяемый раствор 1 -ацетоксиэтил-6-(D-OG -аминофенш/ацетамидо)пеницилланата получают нейтрализацие водного раствора его хлоргидрата и экстрагированием этилацетатом.

Пример 7. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(В- (и -амино-п-оксифенилацетамидо) пеницилланат.

Согласно методике примера 6 получают 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(В06 -амино-п-оксифенилаце амидо) пенцилланата, выделяемый в виде его хлоргидрата (1,4 г) из (-) Ы-(1-метоксикарбонилпропен-2-ил)- -амино-л-оксифенилацетата натрия (2,8 г, 0,01 моль и 1 -этоксикарбонш1оксиэтил-6-аминопеницилланата (0,01 моль).

Продукт дает сильное ИК-поглощени при 1760 см , показывающее, на присутствие -лактама и карбонильных групп сложных зфиров. Быпо найдено, что он задерживает рост микроорганизмов вида Staphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг/мл.

Пример 8. 1 -Ацетоксиэтил6- (вЬ -амино-3-фурилацетамидо) -пеницилланат.

N-( 1 -Метоксикарбонилпропен--2-ил) -амино-Э-фурилацетат натрия (2,5 г, 0,0095 моль) и N-метилморфолин (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл), перемешивают и обрабатывают при -15°С изобутиловым эфиром хлормуравьиной кислоты (1,4 г, 0,01 моль). Через 5 мин добавляют 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланат в этилацетате (20-мл) при продолжении перемешивания и при -15°С. Через 10мин после прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешивание продолжают еще 45 мин. Реакционную смесь промывают водой, 0,5 моль бикарбоната натрия и снова водой, высушивают и концентрируют под вакуумом до маслянистого остатка который обрабатывают тетрагидрофуранрм (20 мл) и водой (20 мл) и доводят рН до 2,5 в течение 30 мин добавлением разбавленной соляной кислоты. Болыиуго часть тетрагидрофурана упаривают под вакуумом и водную фазу промывают этилацетатом и лиофилизируют. Получают хлоргидрат 1 -ацегокси-6-(о4 -аминс-3-фурилацетамидо)пеницилланата (1,9 г) в виде белой стекловидной массы.

Продукт, как было найдено, задерживает рост микроорганизма вида Staphylococcus aureus, Оксфорд при концентрации 0,63 мг/мл и дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, свойственное / -лактамному кольцу и группам сложных эфиров.

Пример 9. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(«; -амино-3-тиенилацетамидо)пеницилланат.

По методике, описанной в примере 8, получают хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-((1б-амино-3-тиенил

ацетамидо)пеницилланат из 1 -этоксикapбoнилoкcиэтил-6-a mнoпeнициллaнaта и Н-(1-метоксикарбонилпропен-2ил)-оЛ -амино-3-тиенилацетаТа натрия.

Продукт, как было найдено, дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, что показывает на присутствие Я -лактамного кольца и остатков сложных зфиров.

Примерю. 1 -Ацетоксиэтил6-(D-в6-амино-3-тиеиипацетамидо)пеницилланат.

Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтш1-6- о, амино- 3-тиенилацетамидо)пеницилланага (1,2 г) получают по методике примера 8 из К-(1-метоксикарбонилпропен-2-ил)-о(. -амино-3-тиенилацетата натрия (2,8 г. О,Оt моль) и 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницш1ланата(0,01 моль).

Продукт дает сильное ИК-поглощение, свойственное -лактаму и группе сложного эфира (при 1760 ).

Пример П. Свободное основанне 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6(D-ot -аминофенилацетамидо)пеницш1ланата.

Гидрохлорид 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(В-вй -аминофенилацетамидо)пеницилланата (5,4 г, 0,t1 моль растворяют порциями в tOO мл охлаждемой льдом воды при перемешивании на ледяной бане. При энергичном перемешивании добавляют 200 мл диэтилового эфира с последующим добавлением 5 г бикарбоната натрия. Смесь поддерживают при энергичном перемешивании в течение 1 мин, когда весь бикарбонат натрия растворяется. Орг ническую фазу отделяют и промывают 125 мл ледяной воды, а затем сушат с помощью перемешивания в течение

15 мин нд ледяной бане с 2 г бепподного сульфата магния и фильтруют. При перемешивании при добанляют 100 мл петролейного эфира по каплям ло тех пор, пока не получают мутньпТ раствор. Последний затем хранят при -25°С в холодильнике в течение ночи, давая кристаллический осадок из пластин и длинных игл (5-10 мм).

Осадок декантируют и сразу же помещают под высоким вакуумом над пятиокисью фосфора, получая белый продукт из микрокристаллических пластинок и иголок 1,5 г (30%) свободного основания 1-этоксикарбонш1оксиэтил-6-(0-о6-аминофенилацетамидо)-пеницилланата с точкой плавления 4849°С.

Данные йодометрического анализа показали чистоту 87% и 5,8% пенициллановой кислоты.

Кривая ИК-спектра имеет сильную полосу при 1780 см для fi -лактама и при 1760 см для группы сложного эфира карбоновой кислоты,

Н-ЯМР DMCO d6, fi млн. долей, ТМС в качестве внутреннего стандарта): 1,22 (т., ЗН, J 7 Гц); 1,44 (д., ЗН); 4,15 (кв., 2Н, J 7 Гц); 6,62 (кв., 1Н, J 5 Гц) для группы сложного эфира карбоновой кислоты и 5,41 (д., 1Н, J 5 Гц) и 5,51 (д., 1Н, J 5 Гц) для р -лактамных протонов. Кривая ЯМР показала резонанс для сложного эфира в смеси эпимеров сложноэфирной группы в соотношении 65:35 при S 4,34 и 4,37 (с., 1И) Cj-протон.

К маточной жидкости добавляют дополнительно 50 мл холодного (-20°С) петролейного эфира. Раствор выдерживают в течение -25°С, получая кристаллический продукт из длинных игл, которые отфильтровывают на холодном стеклянном фильтре С, и промывают 5 мл холодного петролейного эфира. Фильтр с кристаллическим продуктом сразу же сушат в холодном эксикаторе, получая кристаллический продукт из длинных игл (10-15 мм) весом 0,5 г (10%) с точкой плавления 48-5tC.

Данные йодометрического анализа показали чистоту 87%.

Пример 12. Свободное основание 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6- (Б-в -аминофенилацетамидо)пеницилланата.

3,2 г (0,006 моль) гидрозсдорида

1-этоксикарбонилоксиэтил-6-{В-«й аминофенйлацетамидо)пениципланата растворяют порциями в 150 мл холод нс«й воды при +1 с и пропивают три раза диэтиповым эфиром. ВоднУю фазу освобождают от эфира упариванием

в вакууме и добавляют по каплям к 150 мл холодной воды при охлаждении льдом, при этом в это же самое время непрерьгено из автотитратора добавляют 2,0 и.гидроокись натрия (0,0066 моль) с такой скоростью, чтобы рН поддерживать постоянньм на уровне 9-9,5, что во время реакции составляет до 10 мин, Добавление

2н,раствора гидроокиси натрия начинают, когда к реакционному раствору добавлено 10% раствора гидрохлорида

Выпавший в осадок продукт шьтруют на холодной (-ЮС) воронке Бюхнера, промывают 2x5 мл холодной воды (+0С) и быстро переносят в эксикатор для сушки в вакуу при 1 мм рт.ст., получая 2,10 г (75,3%) свободного основания 1 -этоксикарбо- НШ10КСИЭТИЛ-6-(D-« аминофеннлацетамидо)пеницилланата.

Чистота по данным меркуриметрического анализа (ртутный анализ) с6став ляет 96,4%.

Н-ЯМР (DMCO d6,S млн долей, ТМС В качестве внутреннего стандарта): 1,22 (т., ЗН, J 7 Гц), 1,44 (д., ЗН); 4,15 (кв., 2Н, J 7 Гц), 6,62 (кв., 1Н, J 5) для группы карбонатного сложного и 5,41 (д., 1Н, J 5 Гц) и 5,51 (д., 1Н, J 5 Гц) для -лактамных протонов.

Пример 13. Оральное всасыванне 1 -ацетоксиэтил-(соединение I) и 1 -ацетоксикарбоню1окснэт1Ш-(соединение ll)-6-(D-oi -аминофенилацетамидо)пеницилланата у человека.

Изучают оральное всасывание 1 -этоксикарбонилоксиэтил-б- О-об аминофенилацётамидо)пеницилланата (I) и l -ацетоксиэтил-6-(1)- ci -аминофенилацётамидо) пениципланата (II) на опытах с 9 здоровыми добровольцами мужского пола с применением 6-(D-o(, -аминофенш1ацетамидо)пенициллановой кислоты - ампициллин 2 в качестве контроля. Соединения вводят в виде таблеток следующего состава, мг: I II

Сложный эфир

пенициллина 359 338

101 10

102 10

Количество сложных эфиров соответствует 250 мг свободного ампициллина. В качестве контроля применяют ш 1ею1циеся в продаже таблетки (доктациллин 0,25 г), содержащие 250 мг свободного ампициллина. Таблетки принимают нат(щак. Берут образцы крови в определенные интервалы времени и 1К двергают их анализу на определение содержания ампициллина с пршиекением микробиологических проб В табл. t приведены концентрации аятибиотика в сьшоротке со средней стандартной ошибкой.

Средние кумулятивные выделения с мочой через 8 ч следующие, % к дозе:

Соединение I 53,,5 Соединение II 53,7-t-4,9 Ампициллин 34,5+2,8 Пример 14. Гидролиз сложных эффов аминопенициллина в соответстаунщие аминопеницшшины в буфере и в присутствии сыворотки кров человека,

Гщ pQJmз сложных эфиров аминопеницшшинов, полученных согласно изобретению, определяют в буферном растворе в присутствии и отсутствии сыворотки крови человека. Сложные эфиры выдерживают в течение 30 мин при 37°С при концентрации 10 г/мл в фосфатном буфере Серенсена (рН 7,4), а в другом опыте - в таком же буфере, содержащем 10% сыворотки крови человека. Испытуемые растворы экстрагируют этилацетатом для удаления негидролиэованных сложных эфиров и подвергают микробиологическому анализу на содержание аминопенициллинов, контрольные величины были получены при растворении сложных эфиров в фосфатном буфере при тех же концентрациях и непосредственно перед экстрагированием. Величины в табл.2 скорректированы.

Как видно из приведенных данных, новые соединения проявляют высокую скорость их всасывания и гидролиза при повышенном максимальном сывороточном уровне и более коротком времени его достижения.

Пример 15. Токсичность слоных эфиров аминопенициллинов при внутривенном введении мьшам.

Исследовалась острая токсичность соединений согласно изобретению при внутрийенном введении их мышам. Каждая доза испытывалась на группе из 10 животных и такие соединения как гидрохлориды растворялись в физиоло.гическом растворе и вводились в боковун) копчиковую вену мышам, за котрыми после введения устанавливалось наблюдение в течение 7 дней. Во все случаях смерть наступала через 2ч после введения. Результаты даны в табл. 3.

П р и м е р 16. Лекарственные препараты.

Дяя получения таблеток составлен препараты по следу1одей рецептуре:

а)Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-б-ХТНй-аминофенилацетамидо)-пеннцилланата338 мг

. КрахмалtOO мл

Стеарат магния10 мг

б)Хлоргидрат 1 -этоксикарбрнилоксиэтил-6-С1 аминофеиилацетамино)пеишришаната359 мг Крахмал 100 мг Стеарат магния10 мг

в)Хлоргидрат этоксйкарбонил6ксиметил-6(р-в4 - акмнофенилацетамидо)пенициллината 350 мг , Карбонат кальция 100 MJi Стеарат магния10 мг

г)Хлоргидрат |-этоксикарбонилоксиметйл-6-(Вod -аминофенилацетанндо)пенициллината 359 мг Лактоза100 мг Стеарат магния10 мг

д)Хлоргидрат I -этоксиг карбонилоксиметил 6-(

-амино-м-фторфеиил- ацетамидо)пенициллината 370 мг Микрокристаллическая целлюлоза Авицель 100 мг Стеарат магния10 мг

е) Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-(В-оь -аминофенилацетамидо)пенициллината338 мг

Карбонат кальция 100 мг Лактоза100 мг

Стеарат магния10 мг

Для заполнения в капсулы составлеы следующие рецептуры: .ж) Хлоргидрат 1-ацетоксиэтил-6-(1)-ct-аминофенилацетамидо)пенициллината 350 мг

5 мг

Стеарат магния

з) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонш1оксиэтил-6-(В-ой аминофенилацетамидо)пенициллината350 мг

Лактоза40 мг

Стеарат магния5 мг

Для перорапьных суспензий пригоовлены препараты по следующей рецепуре:

и) Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-(В-о(,-аминофенилацетамидо )пенициллинат 34 мг Моностеарат алюминия 50 мг Таиин-80 1,2 мг

Арахисовое масло До 1000 мг к) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-Л -аминофенилацетамидо)пеницнллината36 г..

Бензонат натрия 0,48г Хлористый натрий 0,75 г Отдушка4,7 г

Аэросия 0,3 г

Антифоам 0,0375 г

Сопи щелочного металла сульфатов полисахаридов 4,0 г Сахаринат натрия . О,1 г Сорбит °

Таблица 1