Способ выявления условно-патогенных возбудителей кишечных инфекций Советский патент 1979 года по МПК C12K1/04 

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике кишечных инфекций,у Известен способ выявления условнопатогенных возбудителей кишечной инфекции путем посева испражнений на плотные питательные среды с последующим отбором и пересевом выросших коло ний, постановкой реакции агглютинации выделенных аутоштаммов с сывороткой больного и идентификацией возбудителя 1. Однако известный способ не обеспечивает быстроты и высокой чувствительности . Целью изобретения явл:Fз,eтcя ускорение и повышение чувствительности спо соба. Эта цель достигается тем, что отбирают пять различных по типу колоний fa реакцию агглютинации каждого аутоштамг а ставят с одной сывороткой больного, взятой в разведении причем для идентификации берут агглю тинирующиеся штаммы. Способ осуществляют следующим образом. Первичный посев испражнений прово дят на среды Плоскирева и Левина. На следующий день отбирают 5-8 культур, отражающих все разнообразие выросших колоний, которые пересевают на среды Олькеницкого, нитратный агар Сим.юнса и мясо-пептонный бульон. В этот же или на следующий день ставят реакцию агглютинации всех вьаделеьных культур в 1-ой сыворотке больного, разведенной 1:10 и 1:50. После отбора агглютинирующихся аутоштаммов проводят их идентификацию по ферментативной активности в антигенной структуре. Дополнительно проводят идентификацию культур, относящихся к трибе эшерихий по росту на средах Олькеницкого и CHNMOHca. Через 3-5 дней ставят развернутую реакцию агглютинации отобранных аутоштаммов в парных сыворотках больного, разведенных от 1:25до 1:6400. Неагглютинирующиеся в 1-й сыворотке культуры изучают в реакции агглютинации со 2-ой сывороткой, разведенной 1:10. При положительных результатах проводят постановку развернутой реакции агглютинации и идентификацию культур. П р -и м е р , В отделение кишечных инфекций поступил больной Г. При кли.- 3 ническом обЬ чрдован1ии установлен ди агноз; острый гастроэнтероколит. В день поступления г.роведен посе кала на среды Плоскирева и Левина, взята кровь для получения сыворотки При изучении роста на чашечных сред отобрано 5 культур, отражающих все разнообразие колоний. Отобранные ко нии пеоесевают на среды Олькенииког и мясо-пептонный бульон. На следующие сутки диагностическими сыворотками исключена принадлежность выделенных чистых культур к облигатным патогенным видам. С каждым живым бульонным аутоштаммом ставят реакцию агглютинации в сыво ротке больного, разведенной 1:50, в пробирках. Через 2 ч инкубации при проводят учет реакции. Установлено, что из 5 культур одна агглютинировалась на 3 креста {+++) Для идентификации по биохимическим свойствам агглютинирующую культуру пересевают. При окончательном учете реакции агглютинации других агГJПoтинaбeльныx штаммов не выявлено, Возбудитель заболевания идентифицирован как Рг. mirabilis, С контрольной целью получают сыворотку больного. В этот же день ставят реакцию агглютинации выделен ного Рг. mirabilis в парных сыворот ках в разведении от 1:25 до 1:6400 и 4 остальных аутрштаммов в разведе нии 1:25, Пробирки инкубируют 2 ч при 37°С в термостате и 20 ч при комнатной температуре. Окончательный учет выявил двухкратное нарастание титра антител к Рг. Piirabilis (максимальный титр IE 100) и отсутстэие антител к остальным бактериям. Предлагаемый способ сокращает расход времени на постановку реакции агглютинации в 4 раза и срок ответа на 5-15 дней, повыи ает бактериологическое подтверждение инфекций, выявляет возбудитель независимо от видовой, родовой принадлежности. Формула изобретения Способ выявления условно патогенных возбудителей кишечной инфекции путем посева испражнений на плотные питат.ельные среддгл с последующим отбором и пересевом выросших колоний, постановкой реакции агглютинации выделенных аутоштаммов с сывороткой больного и идентификацией возбудителя, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения чувствительности способа, отбирают пять различных по типу колоний, а реакцию агглютинации каждого ауто штамма ставят с одной сывороткой больного, взятой в разведении IsSO, причем для идентификации берут агглютинирующиеся штаммы. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Методические рекомендации Комплексные методы диагностики острых кишечных инфекций , Алма-Ата, 1975,